不同糊精含量低氮饲料对鲤生长及生理生化指标的影响
2021-04-06韩依笑汤雨郭立程镇燕孙金辉崔培乔秀亭
韩依笑,汤雨,郭立,程镇燕,孙金辉,崔培,乔秀亭
不同糊精含量低氮饲料对鲤生长及生理生化指标的影响
韩依笑,汤雨,郭立,程镇燕,孙金辉,崔培,乔秀亭通信作者
(天津农学院 水产学院,天津 300392)
本试验研究了不同糊精含量低氮饲料对鲤(13.12±0.55)g生长及部分生理生化指标的影响。3组试验饲料(分别记作D1、D2和D3)糊精添加量分别为0%、7.5%、15.0%。经56 d养殖试验后测定鲤的生长和部分生理生化指标。结果表明,鱼体的增重率、特定生长率和肥满度差异均不显著(>0.05),D1的增重率和特定生长率均高于其他两组,均值为357.43 %和2.53 %,D3的肥满度达到3组最高,均值为4.00 %。D2的血清中总胆固醇、甘油三酯和血清低密度脂蛋白胆固醇含量显著低于其他处理组(<0.05),均值分别为16.70、1.73和1.27 mmol/L,血清高密度脂蛋白含量显著高于其他处理组(<0.05),均值为2.33 mmol/L。D2的血清活力显著高于D1(<0.05),与D3无显著差异(>0.05)。肝胰脏中活力,D3为最高值,且与其他组没有显著差异(>0.05)。D2血清活力最高(<0.05),血清及肝胰脏内活力最低(<0.05),和活力最高,且D2与D3的活力差异显著(<0.05)。由此可知,本试验饲料中糊精含量对鲤的生长没有显著效果,添加7.5%糊精的饲料对鲤的抗氧化能力和免疫力均有提高。
鲤;糊精;生长;生理生化指标
鲤()是我国主要淡水养殖品种,脊索动物门硬骨鱼纲鲤形目鲤科,属于杂食性鱼类,荤素兼食,单独或成小群生活在水体中层或底层[1]。中国养鲤已有2 400余年历史,鲤存在于除西部高原外的各地淡水中,现世界各地均有养殖,是重要的养殖鱼类。遵照《2018年中国渔业统计年鉴》,2018年中国鲤鱼产量达到296.2万吨,鲤是黄河流域、苏北和辽宁的重要养殖和食用对象。随着水产养殖行业逐渐发展,影响鲤健康生长的因素也逐渐增多,如饲料对水体的污染、营养配比及投喂方法等[2]。要解决饲料污染问题,必须从饲料研制抓起,通过营养调整的方法来降低氮、磷及微量元素的排泄量,将对水环境的破坏降低到最小。目前,在鲤的养殖生产中,育苗期的饲料蛋白水平一般在36%~40%,养成阶段常用饲料的蛋白水平在32%左右。饲料中营养配比、投喂时间和投喂量都要改进,这样不仅可以降低饲料投喂量,减少饲料成本,同时还可以提高饲料利用率、减少环境污染[3-4]。
水产养殖动物饲料中最主要的供能原料之一是糖类,它在饲料中所占的比例决定了鱼体的生长情况及机体的健康状况,同时也是饲料成本中所占比例较大的部分[5]。糖在鱼体内的生理功能主要体现在以下几方面:供给热能、构成神经和细胞的成分和解毒作用,所以人们对饲料中糖的适宜添加量进行了很多研究,发现不同种鱼类对糖的需求量也不同[6-7]。众所周知,糖类对蛋白质有节约作用,但糖添加量过多会对鱼体造成不利影响,合理调节饲料中糖的比例对养殖对象的生长至关重要。WILSON等认为鱼类是先天性“糖尿病体质”,对糖的利用能力较低,饲料中碳水化合物水平过高在一定程度上会抑制鱼体生长,死亡率升高,但是用量适宜可以为鱼体提供能量,从而达到节约蛋白的作用[8-14]。一般来说,鱼类对糖的需要并不明显,蛋白质和脂肪分解后会产生一定的糖元累积,而且由于鱼类先天的“糖尿病”体质,对糖的利用也不明显,饲料中过多的糖也会降低饵料适口性,进而导致鱼类生长缓慢、饲料利用率低等问题[8]。但由于其成本低廉,人们开始了糖对蛋白质节约作用的研究。近20年来,对糖的生理功能、鱼类糖需要量及利用特点的研究都取得了一定的成果[15]。综上所述,适宜的配比可以改善饲料的营养平衡,减少对水环境的破坏,促进饲料转化,提高经济效益。本试验中所有饲料蛋白质水平均保持在28.41%,以糊精作为主要糖源及变量,研究不同糖含量低氮饲料对鲤生长及生理生化指标是否有影响,为鲤的饲料配方调整提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验设计
养殖试验在天津晨辉金水族水产养殖有限公司进行。健康鲤暂养7 d后,选择360尾,初始体重为(13.12±0.55)g,随机分为3组,每组3个重复,每个重复30尾,随机放入9个150 L养殖箱中。饲养周期为56 d。
1.2 试验饲料
试验饲料以豆粕、花生粕、棉粕和菜籽粕作为蛋白源,豆油作为主要脂肪源,糊精作为主要糖源及变量,添加量分别为0 %、7.5 %、15.0 %,记作D1、D2、D3。各饲料原料混合均匀后制成颗粒饲料,常温下晾干,用封口袋密封包装。饲料配方粗脂肪含量≥6.3 %,粗灰分含量≤8.1 %。饲料组成及营养水平见表1。
1.3 试验管理
试验期间为流水养殖模式,每天分别在8:00和17:00进行饱食投喂(日投喂率为体重的3%~6%),并观察鲤鱼的健康状况和摄食情况,记录摄食量,养殖期间自然光照,养殖用水水质理化因子变化范围:水温(28.00±3.00)℃,pH为(7.50±0.20),溶解氧大于6.00 mg/L。
1.4 样品采集
在养殖试验结束后,禁食24 h,测量其体长、体重和全长。尾静脉取血于2 mL离心管中,4 ℃,4 500 r/min,离心10 min,取得上清。取肝胰脏,准确称量组织重量,加入预冷生理盐水,按重量体积比加入9倍的生理盐水制成10%的组织匀浆,2 500 r/min,离心10 min,取上清液(即为粗酶液)。以上样本均置于-80 ℃冰箱内保存,待测。
1.5 指标测定
1.5.1 生长指标测定
增重率(,%)=100×(W-W)/W
特定生长率(,%)=100×(lnW-lnW)/
肥满度(,%)=100×/3
存活率(,%)= 100×N/N
式中:W为终末体重(g);W为初始体重(g);L为终末体长(cm);为试验天数(d);N为终末存活尾数;N为初始放养尾数。
1.5.2 饲料成分测定
本试验饲料成分测定参照AOAC(Zeitoun et al. 2011)测定方法进行,方法如下:
水分:105℃恒温恒压烘干法(GB/T5009.3- 2010);
粗灰分:550℃高温灼烧法(GB/T5009.4- 2010);
粗脂肪:索氏抽提法(GB/T5009.6-2010);
1.5.3 血清指标测定
总胆固醇(mmol/L)=(样本OD值-空OD值)/(校准OD值-空白OD值)×校准品浓度
高密度脂蛋白胆固醇(mmol/L)=((样品A2-样品A1)-(空白A2-空白A1))/((标准A2-标准A1)-(空白A2-空白A1))×校准品浓度。
低密度脂蛋白胆固醇(mmol/L)=((样品A2-样品A1)-(空白A2-空白A1))/((标准A2-标准A1)-(空白A2-空白A1))×校准品浓度。
甘油三酯(mmol/L)=(样本OD值-空白OD值)/(校准OD值-空白OD值)×校准品浓度。
1.5.4 非特异性免疫和抗氧化指标测定
超氧化物歧化酶()、过氧化氢酶()、丙二醛()、碱性磷酸酶()、溶菌酶()均采用南京建成生物工程研究所试剂盒测定。
超氧化物歧化酶()活力单位定义:每mL反应液中(每mg组织蛋白在1 mL反应液中)抑制率在50%时所对应的量为一个活力单位(U)。
过氧化氢酶()活力单位定义:每mL血清(每mg组织蛋白)每sec分解1 μmoL的H2O2的量为一个活性单位。
丙二醛()测定原理:采用TBA法,可形成红色产物,在532 nm处有最大吸收峰。
碱性磷酸酶()单位定义:每100 mL血清(每g组织蛋白)在 37 ℃时与基质作用15 min产生1 mg 酚为1个金氏单位。
溶菌酶()单位定义:在试验条件下,每mL血清每min吸光值减少0.001为一个酶活力单位。
1.6 统计分析
所有数据均以平均值±标准误(Means±S.E.)表示,并用Excel 2019及SPSS 18.0进行分析处理。利用Excel软件制作各指标的标准曲线,并利用标准曲线计算得出各样品中对应指标的活性。利用SPSS 18.0软件进行单因素方差分析,若差异达到显著水平(<0.05),则进行Duncan’s多重比较。
2 结果
2.1 不同糊精含量低氮饲料对鲤生长和肥满度的影响
经过56 d的饲养试验,不同含量的糊精对鲤鱼的生长和肥满度均有影响。如表2所示,鱼体的增重率、特定生长率和肥满度均呈现先下降后上升的趋势,差异均不显著(>0.05)。其中,D1的增重率和特定生长率高于其他两组,均值为357.43 %和2.53 %,而D3的肥满度达到3组最高,均值为4.00 %。
表2 不同糊精含量低氮饲料对鲤生长和肥满度的影响
注:表中数据为3个重复平均值。表中同一列标有不同字母的数据表示差异显著(<0.05)
2.2 不同糊精含量低氮饲料对鲤血液指标的影响
如表3所示,鲤鱼血清总胆固醇含量和甘油三酯含量呈先下降后上升趋势。其中,D2的总胆固醇含量与甘油三酯含量显著低于其他处理组(<0.05),均值分别为16.70 mmol/L和1.73 mmol/L。血清低密度脂蛋白胆固醇含量呈先下降后上升趋势,其中D2显著低于其他处理组(<0.05),均值为1.27 mmol/L,血清高密度脂蛋白含量呈先上升后下降趋势,D2显著高于其他处理组(<0.05),均值为2.33 mmol/L。
表3 不同糊精含量低氮饲料对鲤血液指标的影响
注:表中数据为3个重复平均值。表中同一列标有不同字母的数据表示差异显著(<0.05)
2.3 不同糊精含量低氮饲料对鲤抗氧化能力的影响
不同糊精含量低氮饲料显著影响了鱼体血清和肝胰脏中、的活力及含量(<0.05)。其中,D2中的血清活力达到最高值(图1),均值为55.57 U/mL,显著高于D1(<0.05),与D3无显著差异(>0.05)。而肝胰脏中活力的最高值发生在D3,均值为47.00 U/mg,与其他组没有显著差异(>0.05)。随着糊精含量升高,活力在血液和肝胰脏中基本都呈现先上升后下降的趋势,在D2中血清活力最高(<0.05),均值为26.39 U/mL。而活力呈先下降后上升趋势,在D2组中血清及肝胰脏内含量最低(<0.05),均值分别为7.10和 1.97 U/mg。
注:数据柱上标不同字母表示组间差异显著(0.05)
2.4 不同糊精含量低氮饲料对鲤血清AKP和LZM活力的影响
不同糊精含量低氮饲料显著影响了鱼体血清中和活力(<0.05)。血清中和活力均随着饲料中糊精含量增加呈现出先稍稍上升再下降的趋势(图2),其中,D2血清中和活力最高,平均值分别为27.11 U/100mL和5.75 U/mL,D2与D3的活力差异显著(<0.05),且D3中活力与其他两组差异显著(<0.05)。
注:数据柱上标不同字母表示组间差异显著(<0.05)
3 讨论
3.1 不同糊精含量低氮饲料对鲤生长和肥满度的影响
糖是鱼类饲料中重要的非蛋白能源物质,适宜的添加水平可以促使鱼体最大限度地利用饲料中的蛋白质[16]。但大多数鱼类对糖的利用能力比较低,当饲料中糖水平过高时会引发鱼类产生一系列病症[17]。对步行鲇()和斑点叉尾鮰()的研究表明,当饲料中糖的添加量在适宜水平时,蛋白质利用率和蛋白质效率都达到顶峰[18-19]。当摄入高糖饲料时,会诱导硬骨鱼对葡萄糖的摄取,导致高血糖[20]。本试验结果显示,鲤的生长、饲料利用情况及鱼体形态指标间差异均不显著(>0.05),FURUICHI等对鲤研究表明,当对鲤投喂饲料中含有10%、20%和30%的糊精时,生长均未出现显著性差异(>0.05),但投喂含有40%糊精的饲料时生长出现下降[21],这与本试验结果相似。
3.2 不同糊精含量低氮饲料对鲤血液指标的影响
甘油三酯和胆固醇是血脂的重要部分,给机体提供能量,是一些酶或激素等物质的合成原料,同时也是反映鱼体对脂肪转化的重要参考[22]。血液中甘油三酯和总胆固醇的升降有一定相关性,王爱民等研究发现,吉富罗非鱼(GIFT,)血清中血糖、甘油三酯、总胆固醇的含量随饲料脂肪水平的升高而升高[23]。高密度脂蛋白俗称“血管清道夫”,它可以将周围组织中的总胆固醇送回肝脏中进行代谢,而低密度脂蛋白的功能与之相反。鱼体摄取饲料中的糖类除用于氧化供能外,还可转化合成糖原或通过磷酸戊糖途径提供合成脂肪的材料[24]。郭小泽等[25]以小麦次粉为糖源,研究发现高糖组草鱼()血清胆固醇水平显著高于对照组,而在本试验中,随着饲料中糖含量的增加,血清中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇含量呈现出先下降再上升的趋势,与其结果有一定差异,原因可能与鱼的种类、食性、糖种类、投喂方式以及投喂时间等因素有关。血清中高密度脂蛋白胆固醇呈先上升后下降趋势,在D2含量最高。在吴凡等[26]对奥尼罗非鱼(×)的研究结果中表明,血清中的总胆固醇(-)、甘油三酯()、低密度脂蛋白胆固醇 (-)含量随着饲料碳水化合物水平升高而上升, 高密度脂蛋白胆固醇(-)含量则呈下降趋势,与本试验结果相似,这说明饲料中糊精含量增高可以提高鱼体糖代谢功能,减少了蛋白质和脂肪的过多消耗。
3.3 不同糊精含量低氮饲料对鲤抗氧化能力的影响
、、是鱼体中最重要的抗氧化指标,和能清除体内的超氧化物自由基和过氧化氢。作为脂质过氧化反应的主要代谢产物,可以反映机体内脂质的过氧化程度,其含量升高实际上是脂质过氧化反应增强、脂质过氧化物增多的表现。其含量的高低不仅可以间接反应活性氧自由基含量的多少,还可以进一步呈现出细胞受损伤的程度[27]。在本试验中,添加糊精的D2、D3的血清和肝胰脏中与活力均比没有添加糊精的D1高。高妍等[28]研究不同水平糊精对乌克兰鳞鲤()生长的影响,结果表明饲料中糊精水平为15 %和25 %时,血浆和肝胰脏活性显著低于20 %糊精水平(<0.05),而20%糊精水平活性显著低于另外两个水平(<0.05),20 %糊精组肝胰脏活性比15 %和25 %糊精组分别提高了30.27%和28.26%(<0.05)。由此可见,饲料中添加一定量糊精对于提高鱼体自身的抗氧化能力有一定的作用。
3.4 不同糊精含量低氮饲料对鲤免疫活性的影响
是促进机体生长和代谢、控制内环境稳定状态及保持机体健康所必需的酶类,其活性越高说明免疫状态越好,是生物体内重要的水解酶,主要存在于巨噬细胞溶酶体中[29],在生物体内起着催化和转移磷酸基团的作用,也是血清和动物体各脏器、骨骼中不可或缺的免疫相关酶。许多学者也证明了在营养物质的消化、吸收和转运过程中起着重要作用,也是动物体内重要的解毒体系。溶菌酶也是重要的非特异性免疫指标,鹿璇等[30]对鲤的研究表明,饲料蛋白水平对溶菌酶活力无显著影响(>0.05)。施兆鸿等[31]对褐菖鲉()的研究表明,活力随饲料脂肪水平升高呈先升高后降低的趋势,且脂肪含量为12.4 %饲料组活力显著高于其他处理组(<0.05)。在本试验中,随着糊精含量的增加,及活性均呈现先上升后下降的趋势,在D2中鲤血清及活性最高,这与缪凌鸿等[32]关于异育银鲫()的研究结果相一致,说明饲料中的糖含量过高会对鱼体产生影响,使其生长受到限制,免疫功能及抗病能力都会下降。
4 结论
本试验使用以糊精作为饲料中糖变量的低氮饲料,经过56 d的养殖试验后,对鲤生长及生理生化指标进行检测,确定其有无影响。最终确定饲料中添加糊精含量的多少对鲤的生长没有显著效果,但对鲤的抗氧化能力和免疫能力均有提高。
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Effects of low nitrogen feed with different dextrin content on growth and physiological and biochemical indexes of common carp()
Han Yixiao, Tang Yu, Guo Li, Cheng Zhenyan, Sun Jinhui, Cui Pei, Qiao XiutingCorresponding Author
(College ofFisheries, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300392, China)
In this experiment, the effects of low nitrogen feed with different dextrin content on the growth of carp(13.12±0.55)g and some physiological and biochemical indexes were studied. The additions of dextrin in the three groups(D1, D2 and D3)were 0%, 7.5% and 15.0%, respectively. After 56 days of breeding test, the growth and some physiological and biochemical indexes of carp were determined. The results showed that there was no significant difference in fish body weight gain rate, specific growth rate and fullnes(>0.05). The weight gain rate and specific growth rate of D1 were higher than those of the other two groups, with the average values of 357. 43% and 2.53%. The fatness of D3 reached the highest in the three groups, with an average value of 4.00%. The contents of total cholesterol, triglycerides and serum low-density lipoprotein cholesterol in D2 in serum were significantly lower than those in other treatment groups(<0.05). The density lipoprotein content was significantly higher than other treatment groups(<0.05), with an average value of 2.33 mmol/L. The serumactivity in D2 was significantly higher than D1(<0.05), and there was no significant difference with D3(<0.05). Theactivity in liver and pancreas D3 was the highest and there was no significant difference with other groups(>0.05). D2 was the highest in serumactivity (<0.05),activity was the lowest in serum and liver and pancreas(<0.05),andactivity was the highest, andactivity was significantly different between D2 and D3(<0.05). It can be concluded from this test that the content of dextrin in the test feed has no significant effect on the growth of carp, and the feed containing 7.5% dextrin has improved the antioxidant capacity and immunity of carp.
; dextrin; growth; physiological and biochemical indexes
S963
A
1008-5394(2021)01-0034-06
10.19640/j.cnki.jtau.2021.01.007
2019-12-30
韩依笑(1994—),女,硕士在读,主要从事水产动物营养与饲料研究。E-mail: hanyixiao0514@163.com。
乔秀亭(1965—),男,教授,硕士,主要从事水产动物营养与饲料研究。E-mail:qxt6510@126.com。
责任编辑:张爱婷