2019年中国医科大学附属第一医院细菌耐药性监测结果分析

陈静静，李富顺，田素飞，孙国全，褚云卓

（中国医科大学附属第一医院检验科，沈阳 110001）

近年来耐药细菌如耐甲氧西林葡萄球菌属、碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌（carbapenem-resistantEnterobacteriaceae，CRE）、耐万古霉素肠球菌（vancomycinresistantEnterococci，VRE）等在临床日益常见，其发病率高、死亡率高，并导致住院时间延长、住院费用增加，成为人类健康的重大威胁［1］。细菌耐药性动态监测可以了解细菌分布及耐药趋势，为临床医生和感染控制人员合理应用抗菌药物提供依据［2］。现将中国医科大学附属第一医院2019年临床分离细菌的菌种分布及耐药数据分析总结如下，供临床参考。

1 材料与方法

1.1 病原菌

收集2019年1月1日至12月31日中国医科大学附属第一医院分离的细菌，同一患者相同部位重复菌株仅保留第一株；凝固酶阴性葡萄球菌和草绿色链球菌仅保留脑脊液、血液和无菌体液标本检出的菌株。按照操作规程进行标本采集、菌株分离鉴定及药物敏感性检测。

1.2 菌株鉴定及药敏检测

采用Vitek 2自动微生物鉴定仪、BD全自动细菌鉴定药敏系统或Vitek MS质谱仪进行菌种鉴定。Vitek 2自动微生物鉴定仪（GN09、GN16、GP67或GP68药敏卡）或BD全自动细菌鉴定药敏系统（PMIC/ID-55、PMIC-92、NMIC-413或NMIC/ID-4）进行菌株药敏检测，仪器法不能覆盖的药物采用MH琼脂纸片扩散法进行补充。金黄色葡萄球菌ATCC 29213、大肠杆菌ATCC 25922、粪肠球菌ATCC 29212和铜绿假单胞菌ATCC 27853作为质控菌株来保证耐药检测的准确性。

1.3 耐药菌定义

对甲氧西林、苯唑西林或头孢西丁耐药的金黄色葡萄球菌定义为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistantStaphylococcus aureus，MRSA），对其敏感的金黄色葡萄球菌为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（methicillin-sensitiveStaphylococcus aureus，MSSA）。对甲氧西林、苯唑西林或头孢西丁耐药的凝固酶阴性葡萄球菌判定为耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（methicillin-resistant coagulasenegativeStaphylococci，MRCNS），否则判定为甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌（methicillin-sensitive coagulase-negativeStaphylococci，MSCNS）。对万古霉素检测为不敏感的肠球菌属定义为耐万古霉素肠球菌。碳青霉烯类耐药肠杆菌指对亚胺培南、美罗培南或厄他培南中任一种药物耐药的肠杆菌科细菌。按照2019版美国临床和实验室标准协会 CLSI标准进行药敏结果判读，替加环素药敏结果按照美国FDA折点判读。

1.4 统计学分析

采用Whonet 5.6软件对数据进行统计分析，将2019年实验室数据导入软件后，进行菌株分布及药物敏感性等分析。P＜ 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 菌株分布

2019年共收集5 061株非重复临床分离株，其中革兰阳性菌占31.4%（1 588株），革兰阴性菌占68.6%（3 473株），最常见的10种细菌依次为大肠埃希菌（14.7%）、肺炎克雷伯菌（13.4%）、鲍曼不动杆菌（11.5%）、铜绿假单胞菌（9.1%）、屎肠球菌（7.1%）、金黄色葡萄球菌（5.7%）、粪肠球菌（3.3%）、洋葱伯克霍尔德氏菌（2.7%）、嗜麦芽窄食单胞菌（2.6%）和表皮葡萄球菌（2.3%）。住院患者和门、急诊患者分离的菌株分别占88.5%和11.1%，分离菌最常来源的科室为重症医学科（13.3%）、泌尿外科（8.5%）、神经内科（7.5%）、呼吸内科（7.0%）、神经外科（7.0%）、急诊内科（5.7%）、肝胆外科（3.4%）和感染科（2.9%）。痰标本（32.1%）、尿液标本（28.4%）和血液标本（16.8%）分离菌株约占全部菌株的75%。

2.2 革兰阳性菌对抗菌药物的耐药率

最常见的革兰阳性球菌依次为屎肠球菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、表皮葡萄球菌和人葡萄球菌。

2.2.1 葡萄球菌属：葡萄球菌属中MRSA检出率为32.3%（70/217），MRCNS的检出率为82.3%（233/283）。MRSA和MRCNS对多数大环内酯类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类及其他抗生素耐药率均显著高于MSSA和MSCNS（P＜ 0.05），未发现对万古霉素、利奈唑胺和替加环素耐药的葡萄球菌属细菌（表1）。此外MRSA中庆大霉素、利福平、复方新诺明、替考拉宁和呋喃妥因的敏感率均＞80%，MRCNS对利福平、呋喃妥因的敏感率＞80%。

2.2.2 肠球菌属：屎肠球菌和粪肠球菌分别占肠球菌属的68.4%和31.6%。除四环素、高浓度庆大霉素和利奈唑胺外，粪肠球菌对其他抗菌药物的耐药率均低于屎肠球菌（表2）。发现4株屎肠球菌对万古霉素耐药，VRE检出率为1.7%，此外还有5株粪肠球菌对利奈唑胺耐药。屎肠球菌对万古霉素、替加环素、利奈唑胺和替考拉宁的敏感率较高（＞80%），粪肠球菌对氨苄西林、万古霉素、青霉素G、呋喃妥因、替加环素、利奈唑胺和替考拉宁的敏感率均＞80%。

表1 葡萄球菌属细菌对抗菌药物耐药率和敏感率（%）Tab.1 Resistance rates of Staphylococcus to antimicrobial agents（%）

表2 肠球菌属细菌对抗菌药物耐药率和敏感率（%）Tab.2 Resistance rates of Enterococcus to antimicrobial agents（%）

2.3 革兰阴性菌对抗菌药物的耐药率

肠杆菌科细菌占革兰阴性菌的54.7%，最多见细菌依次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌和阴沟肠杆菌；不发酵革兰阴性菌占革兰阴性菌的44.1%，最常见细菌依次为鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、洋葱伯克霍尔德氏菌和嗜麦芽窄食单胞菌。

2.3.1 肠杆菌科细菌：大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌中超广谱 β-内酰胺酶（extendedspectrum β-lactamase，ESBL）检出率分别为 53.8%、44.2%和44.4%。最常见的3种CRE为肺炎克雷伯菌（74.7%）、大肠埃希菌（6.0%）和阴沟肠杆菌（4.2%），肠杆菌科细菌对碳青霉烯类药物呈现不同的耐药率：大肠埃希菌（1.3%）和奇异变形杆菌（1.0%）耐药率低，肺炎克雷伯菌（18.9%）和阴沟肠杆菌（7.0%）耐药率较高。CRE最常来源于重症医学科（27.7%）、神经外科（18.7%）、呼吸内科（11.4%）、神经内科（9.0%）和胰胆外科（4.2%）等科室。碳青霉烯类耐药的菌株对β-内酰胺酶抑制剂、头孢菌素类、氨基糖苷类及氟喹诺酮类等多种抗生素耐药率均较高。肠杆菌科细菌对哌拉西林/他唑巴坦、碳青霉烯类、阿米卡星和替加环素（奇异变形杆菌和阴沟肠杆菌未检测）耐药率较低，其他抗生素的耐药情况见表3。

2.3.2 非发酵革兰阴性杆菌：鲍曼不动杆菌对美罗培南和亚胺培南的耐药率高，分别为81.2%和82.0%，除替加环素敏感率较高外，对其他药物敏感率均较低（表4）。铜绿假单胞菌对美罗培南和亚胺培南的耐药率分别为23.4%和30.0%，对哌拉西林/他唑巴坦、庆大霉素、头孢他啶、头孢吡肟、环丙沙星、左氧氟沙星及哌拉西林的敏感率均＞80%。洋葱伯克霍尔德氏菌对美罗培南的耐药率为3.3%，此外对头孢他啶、复方新诺明和左氧氟沙星的敏感率均＞80%。嗜麦芽窄食单胞菌对复方新诺明、左氧氟沙星和氯霉素的耐药率较低，分别为6.3%、14.1%和16.9%。

表3 肠杆菌科细菌对抗菌药物耐药率和敏感率（%）Tab.3 Resistance rates of Enterobacteriaceae to antimicrobial agents（%）

3 讨论

2019年中国医科大学附属第一医院共收集5 061株非重复菌株，最常见的革兰阳性球菌为屎肠球菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、表皮葡萄球菌和人葡萄球菌；革兰阴性菌占68.6%，常见的为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、洋葱伯克霍尔菌、嗜麦芽窄食单胞菌、奇异变形杆菌和阴沟肠杆菌。

葡萄球菌中MRSA检出率为32.3%，MRCNS的检出率为82.3%，检出率与CHINET监测结果基本一致［3］。耐甲氧西林葡萄球菌对多种药物的耐药率较甲氧西林敏感葡萄球菌高，万古霉素、呋喃妥因、利奈唑胺、替加环素和替考拉宁对葡萄球菌属保持较好敏感率。本院临床分离的屎肠球菌较粪肠球菌多，屎肠球菌对多种抗菌药物的耐药率均高于粪肠球菌，这与其他医院一致［4］。发现4株对万古霉素耐药的屎肠球菌及5株对利奈唑胺耐药的粪肠球菌，提示实验室应加强对肠球菌属的监测并检测其耐药基因型。肠球菌属对万古霉素、替加环素、利奈唑胺和替考拉宁的敏感率较高，均＞80%，此外，粪肠球菌对氨苄西林、青霉素G和呋喃妥因的敏感率也＞80%。

表4 非发酵革兰阴性杆菌对抗菌药物耐药率和敏感率（%）Tab.4 Resistance rates of non-fermentative gram-negative bacteria to antimicrobial agents（%）

革兰阴性细菌耐药越来越严重，碳青霉烯类药物是抵御革兰阴性菌感染的最后防线。最常见的3种CRE为肺炎克雷伯菌（74.7%）、大肠埃希菌（6.0%）和阴沟肠杆菌（4.2%），本研究监测结果显示，其耐药率分别为18.9%、1.3%和7.0%，与CHINET监测水平相似［6］。CRE菌株对多种常用抗生素耐药性均较碳青霉烯类敏感株高。CRE检出率近年来逐渐增高，临床医生应该重视，合理使用抗生素并采取相应的感染控制措施，遏制耐药菌发展［5］。

不动杆菌属耐药形势依然严峻，鲍曼不动杆菌对多数药物耐药率均较高，对美罗培南和亚胺培南的耐药率分别为81.2%和82.0%。碳青霉烯类耐药菌株对多数常用抗菌药物耐药率较高，部分泛耐药菌株仅对替加环素和多黏菌素敏感，对于这类细菌实验室应与临床医生积极沟通，增加可能有效药物的药敏检测［7］。铜绿假单胞菌对美罗培南和亚胺培南的耐药率分别为23.4%和30.0%，洋葱伯克霍尔德氏菌对美罗培南的耐药率为3.3%。洋葱伯克霍尔德氏菌和嗜麦芽窄食单胞菌可选择治疗药物较少，应加强监测，及时了解细菌耐药动态。

综上，本研究监测结果显示，2019年我院临床分离菌株对各种抗菌药物均存在不同程度的耐药，耐甲氧西林葡萄球菌属、碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌及非发酵革兰阴性杆菌均是临床治疗的巨大挑战。因此，应高度重视抗菌药物的临床合理应用，采取有效措施监督和管理医院感染，遏制耐药菌发展。