中性粒细胞胞外诱捕网对组织器官损害的研究进展

余武汉，陈浪，李腾飞，肖国辉，张有成

（兰州大学第二医院普通外科，甘肃兰州730000）

中性粒细胞（neutrophil） 是人类免疫系统中最丰富的先天免疫效应细胞，含有广泛有效的抗菌剂，这些抗菌剂主要储存在特殊的颗粒中。由于中性粒细胞库也能损害宿主组织，因此它的三种主要作用受到严格调节：吞噬、脱颗粒和释放中性粒细胞胞外诱捕网（neutrophil extracellular traps，NETs）。NETs 是在2004年Brinkmann 等[1]发现中性粒细胞在12 豆蔻酸-13- 乙酸佛波醇（phorbol 12-myristate 13-acetate，PMA） 的刺激下释放出的一种以DNA 为骨架,其上附着髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）、瓜氨酸化组蛋白3（citrullinated histone 3,CitH3）、丝氨酸蛋白酶、基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase 9，MMP-9）、中性粒细胞弹性蛋白酶（neutrophil elastase，NE）等物质所形成的具有抗菌功能的网状结构[2]，能够捕捉、中和并杀死细菌[3]、真菌[4]、病毒[5]和寄生虫[6]等，从而发挥保护机体的防御作用。

然而，除了抗菌功能外，NETs 与临床疾病密切相关。一项关于NETs 在急性肝功能衰竭（acute liver failure，ALF）患者的研究[7]显示，ALF 的肝组织中发现高表达的NETs 标志物CitH3，并发现NETs 标志物水平与ALF 预后不良呈正相关，原因是NETs 通过各种机制激活止血系统，继发性加重缺血性损伤。同样地，在另一项临床脓毒症患者的研究[8]显示，脓毒症患者入院时记录的序贯器官衰竭检测评分（Sequential Organ Failure Assessment，SOFA） 和急性生理与慢性健康评分（Acute Physiology and Chronic Health Evaluation Score，APACHE）与NETs 的形成呈正相关，同时也与肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α，TNF-α）、白介素8（interleukin 8，IL-8）等促炎因子呈正相关。以上两项临床研究表明NETs 可促进疾病的发生发展，针对NETs 的治疗，可改善疾病的预后。另外，NETs 的主要成分对机体的损伤是多方面的。在急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome，ARDS）中，肺表面活性物质可被NETs的产物（丝氨酸蛋白酶）降解，减少肺部炎症因子的清除。同时，NE 通过改变上皮细胞的肌动蛋白骨架增加肺泡上皮的通透性，以多重因素加重ARDS 的进展。其他的NETs 组分亦可损伤组织：MPO 可通过诱导氧化应激损伤组织；组蛋白对内皮细胞产生毒性作用，引起血栓形成，还通过Toll样受体2（toll like receptor 2，TLR2）和TLR4 造成组织损伤[9]。

因此，NETs 的过度形成和（或）清除减少可能会促进炎症[10-12]、自身免疫性疾病[2]、血管性疾病[13]、血栓形成和缺血再灌注损伤[14]，并可能促进肿瘤的生长和转移[15-16]，参与多种病理损伤。因此，减少NETs 形成及其组分释放对一些病理损伤和炎症性疾病的控制有一定的帮助，这些措施在动物模型中被证明是有效的，是一种有前途的治疗方式[17]。

1 NETs的形成途径

中性粒细胞释放NETs 的主要有两种方式[18]：非烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate，NADPH） 氧化酶（NADPH oxidases，Noxs） 依赖性形成途径和Noxs依赖性形成途径。前一途径是中性粒细胞的胞浆中存在大量的肽基精氨酸脱亚胺酶 4（Peptidylarginine deiminase 4，PAD4），该酶与钙离子结合后，PAD4 就会移位到中性粒细胞核，接着PAD4 在细胞核内介导组蛋白过瓜氨酸化形成CitH3，这是形成非Noxs 依赖性NETs 所必需的[19]。后一途径是运用PMA 和脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）等激动剂刺激引起NETs 的产生，它们通过不同的机制诱导Noxs 依赖的NETs 形成。前者是PMA 刺激后，来源于内质网的钙离子进入胞浆，在胞浆内激活蛋白激酶C 的活性，使蛋白激酶C 磷酸化gp91phox/Nox2[20]，促进了Noxs 酶的组装，从而驱动活性氧（reactive oxygen species，ROS） 的产生，ROS 随后分解颗粒和细胞核的膜[21]，使得NE和MPO 可以自由地与细胞核相互作用，从而裂解组蛋白，促进染色质的解缩。这一过程最终导致中性粒细胞膜完整性的丧失，此时带有颗粒状内容物的去凝聚DNA 被释放到细胞外环境中，发挥抗微生物功能[1]。而后者形成的具体机制尚不清楚，虽然类似于Nox2 磷酸化后的PMA，但这一步骤的上游与PMA 刺激途径有明显不同。原因在于LPS 与中性粒细胞表面的 Toll 样受体 4（Tolllikereceptor4，TLR4） 结合，可诱导Noxs 依赖性NETs 的形成，且呈剂量依赖性，而抑制剂TAK242 可消除这一效应[22]。此外，c-Jun 氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase，JNK） 抑制剂SP600125 和TCSJNK60 对LPS 诱导的NETs 形成有显著的干扰作用，但对PMA 无明显影响，表明这两种激动剂确实通过两种不同的机制发挥作用

2 NETs对机体的损伤

NETs 在抵抗急性感染的免疫防御中起重要作用，但当机体内产生的NETs 过多和（或）NETs 清除减少时就会对机体造成一系列损伤[17,23]。

2.1 NETs与肺部疾病

近年来，囊性纤维化（cystic fibrosis，CF）[24]、哮喘[25]和输血相关急性肺损伤（transfusion-related acute lung injury，TRALI）[26]等多种肺部疾病的潜在发病机制都与NETs 的形成有关。

CF 是一种常染色体隐性遗传性疾病，由囊性纤维化跨膜转导调节因子（cystic fibrosis transmembrane conductance regulator，CFTR） 基因突变引起[27]。在CF 患者的肺部中存在大量的中性粒细胞，并且中性粒细胞自发性凋亡受到抑制，其原因与中性粒细胞上的CFTR 功能降低有关，从而使延迟凋亡的中性粒细胞在CF 患者更有效地形成NETs。大量的NETs 和CFTR 的缺失将诱导巨噬细胞释放炎性细胞因子，造成CF 患者频繁的肺部感染[24,28]。同时，相关实验表明，CF 患者的肺部环境更能诱导中性粒细胞的生存表型[28]，通过运用ivacaftor（CFTR 增强剂） 治疗G551D 突变的CF 患者，可以有效逆转这种现象。脱氧核糖核酸酶（deoxyribonuclease，DNase） 是特异性靶向DNA 的核酸内切酶，主要由DNase1 家族发挥降解双链和单链DNA 的作用[29]。DNase1 常用于CF 治疗，主要通过分解NETs 释放的细胞外DNA（extracellular DNA，eDNA），降低肺部黏液浓度[30]。实验研究[31]显示，运用DNase I 治疗的患者显示出良好的治疗效果，患者咳嗽次数、活动水平、食欲和睡眠得到改善。

在哮喘患者的支气管活检中检测到来自中性粒细胞和嗜酸性粒细胞释放的NETs[32]。一项研究[33]显示，哮喘患者的肺功能损伤程度与痰液中eDNA 成正相关，同时检测到在高浓度的eDNA 亚组中表达更高的NE-DNA 复合物和CitH3-DNA 复合物，并且哮喘控制分数相比低浓度eDNA 患者明显降低，高浓度eDNA 亚组患者的用力肺活量（forced vital capacity，FVC） 更差，表明NETs 形成会加剧哮喘的严重程度[34]。同样，与低浓度eDNA的患者相比，高浓度eDNA 患者的痰液检测到更高活性的天冬氨酸蛋白水解酶1（caspase-1）及更高水平的白细胞介素1β（IL-1β），这两种物质均是炎症体激活的标志物，与增加哮喘气道炎症密切相关[32]，并与以往的一项研究结果一致[33]。因此，哮喘中的NETs 对呼吸道疾病的发病机制起着重要的作用，过量的NETs 积聚通过激活先天免疫反应，加重肺部感染。然而，目前对于NETs 引起肺部疾病的确切机制尚未完全阐明，以及直接针对NETs 的靶向治疗是否会给患者提供益处，亦不完全清楚，仍需进一步探索。

TRALI 是一种在输血过程中出现的罕见并发症，以急性非心源性肺水肿、低氧血症为主要临床表现，其发病机制尚不清楚。组织学上，TRALI的特征是肺部存在肺水肿和大量中性粒细胞浸润[35]。目前关于TRALI 的发病机制理解为二次打击学说模型[36]：第一次打击包括长期酗酒、抽烟、休克、肝手术、机械通气时气道压的峰值升高、白细胞介素10（IL-10）水平降低和全身性炎症等原因造成。第二次打击可能由血制品中存在抗白细胞抗体或其他因素引起，其中在80%是由抗人类白细胞抗原（human leukocyte antigen，HLA） 的I、II 类抗体或抗粒细胞特异性抗原（human neutrophil antigen，HNA） 的抗体引起TRALI 的发生。

在一项体外研究[37]中，运用HNA-3a 与中性粒细胞共培养时检测到NETs 的产生。进一步的体内研究发现，诊断TRALI 患者血清循环eDNA、核小体和MPO 水平显著升高[30]，但引起TRALI 的献血者中没有明显检测到有关NETs 及其标志物的存在。关于NETs 在TRALI 的形成，其机制可能由活化的血小板与中性粒细胞相互作用而产生，而NETs 可进一步增加单层血管内皮细胞的通透性，加重TRALI 引起的肺水肿[38]。同样地，Caudrillier等[26]在实验性TRALI 模型中运用阿司匹林或糖蛋白IIb/IIIa 抑制剂抑制血小板活化可减少NETs 形成，改善肺部组织损伤，同时使用组蛋白阻断抗体和DNase 1 直接作用于NETs 的主要成分后，显著减轻了NETs 在肺部的沉积，改善小鼠肺部功能及提高机体血氧水平。另有研究[32]显示、，在血液储存期间，血小板释放的生物活性脂质可以激活中性粒细胞并引起NETs 形成，这是一种非抗体介导TRALI 的发生。TRALI 是导致患者输血过程中死亡的原因之一，2018年英国SHOT 报告显示，在2003—2018年期间，TRALI 的死亡病例数占确诊人数的17.8%，但是目前临床上缺乏有效的治疗手段[39]。而多项研究[26,37]显示，DNase 可以破坏NETs 结构，减少肺水肿，可能是TRALI 潜在的治疗靶点。然而，NETs 网状结构的形成是复杂的，血小板的聚集和活化与NETs 结构也密不可分，因此，需要更多研究进一步探究其对TRALI 的治疗性效果。但不可否认的是，NETs 对TRALI 的发生具有直接作用。

2.2 NETs与肝脏疾病

NETs 除了参与肺部疾病的损伤外，还参与肝脏损伤，包括肝缺血再灌注损伤（hepatic ischemia and reperfusion injury，HIRI）、脓毒症相关肝损伤（sepsis-related liver injury，SRLI） 等。HIRI 是肝移植和肝切除手术过程中常涉及的共同病理生理变化，由多种因素共同参与，包括无氧代谢、线粒体损伤、氧化应激和ROS 的分泌、细胞内Ca2+超载、Kupffer 细胞和中性粒细胞产生的细胞因子和趋化因子等都参与了HIRI 的发病过程[40]。据报道[41-43]，NETs 与HIRI 密切相关。Zhang 等[43]数据显示，HIRI 组小鼠比空白对照组检测到更高水平的Cit-H3-DNA 复合物和循环游离DNA（circulating-free DNA，cfDNA）等NETs 的组分，诱导NETs 形成关键酶PAD4 的mRNA 亦明显增高，并且NETs 与肝损伤指标（丙氨酸转氨酶/天冬氨酸转氨酶）成正相关。在另外一项实验中，Huang 等[41]运用PAD4 的特定抑制剂（YW3-56 或YW4-03） 或DNase I 处理小鼠后，肝窦扩张和肝门管区周围的肝细胞坏死明显减轻，推测减少NETs 可减轻小鼠HIRI 损伤。研究[41,43]认为，肝脏恢复血液供应后大量中性粒细胞被招募、浸润于肝脏，造成肝细胞的损伤。而损伤的肝细胞释放的HMGB1 和组蛋白等损伤相关分子模式（damage-associated molecular pattern，DAMP）物质，通过TLR4-/TLR9-MyD88 信号通路刺激NETs 的形成。同时，NETs 还可以诱导Kupffer细胞释放IL-6、TNF- α 和趋化因子配体10（chemokine ligand 10，CXCL-10）等炎症因子，形成恶性循环，加重HIRI 的损伤[44]。

脓毒症是一种全身感染性综合征，肝脏既是免疫介导病理损伤的目标，亦是清除血液中细菌及细菌毒素的关键部位[45]。肝脏抵御机体免受病原体感染是通过中性粒细胞和Kupffer 细胞互补作用而发挥免疫防御功能，其中Kupffer 细胞通过免疫球蛋白超家族受体（complement receptor of the immunoglobulin superfamily，CRIg）的补体受体捕获细菌，而中粒细胞通过NETs 的形成捕获循环病原体，对抵御机体感染至关重要[46]。然而，在机体发生严重感染期间，肝脏内形成大量的NETs 并超过其他的器官[47]。原因是LPS 刺激内皮细胞上的TLR4 受体可促进中性粒细胞的CD44 与活化的透明质酸（hyaluronic acid，HA）结合，从而增强中性粒细胞在肝窦内的黏附，并且肝窦上表达的血管性血友病因子（von Willebrand factor，vWF），将中性粒细胞释放的NETs 牢固地锚定在肝窦内皮细胞（liver sinusoidal endothelial cells，LSEC），延长NETs在肝窦中的作用[48]。而NE 和组蛋白等NETs 组分具有细胞毒性特性，可以破坏上皮细胞和内皮细胞[49]。一项利用活体显微镜观察耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染小鼠的研究[46]发现小鼠肝脏内的eDNA、组蛋白和NE 等清晰地排列在肝血窦上，并且有局灶性坏死的肝组织附近表现强阳性的组蛋白和NE 染色。该研究进一步使用PAD4 缺陷型小鼠研究，发现肝组织损伤程度因NETs 的抑制而明显改善，NE 抑制剂西维来司他（sivelestat）也能明显改善MRSA 感染后的肝损伤，这表明在感染的背景下，NETs 是造成肝脏损伤的重要因素。然而，鉴于NETs 在免疫防御中的关键作用，因此必须权衡在感染环境下抑制NETs 形成以减轻肝脏损害的潜在益处和传播感染的风险。

2.3 NETs与肠道疾病

在人类肠道组织中发现许多种类的细菌、真菌和寄生虫已被证明能刺激NETs 的形成。NETs 发挥抵御细菌入侵的防御功能是不可否认的。然而，激活的中性粒细胞与类肠细胞Caco-2 细胞的共培养模型表明，NETs 可能通过其相关的蛋白酶与肠上皮细胞之间的局部直接接触而导致肠上皮细胞损伤[50]，表现为人肠上皮样细胞的F-actin 细胞骨架受到破坏，这种破坏可以通过抑制NETs 上的蛋白酶释放而发生逆转[50]。此外，研究发现，在细菌性肠炎模型中，NETs 可以使病原体肠致病性大肠杆菌（enteropathogenic Escherichia coli，EPEC）和产志贺 样 毒 素 大 肠 杆 菌（shiga toxin-producingescherichiacoli，STEC）通过DNA 链附着在肠道黏膜上，从而造成肠道黏膜的损伤[51]。并且大肠杆菌菌株能够吸收细胞外的DNA，并将其用作营养物质，促进大肠杆菌的生长[52]，使肠道菌群发生紊乱。在溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）患者的结肠黏膜中已经检测到了五肽相关蛋白PTX3、MPO 和NE，它们也是NETs 的成分，虽然这些分子可以独立于NETs 分泌，但数据支持NETs 参与UC的观点[53]。而这些NETs 组分参与UC 患者的发病机制可能是由于NETs 发挥促凝活性，增加UC 患者肠道的血栓栓塞事件，加剧UC 进展[54]。除此之外，NETs 组分可以直接诱导细胞的凋亡[55-56]，减少其在肠道中的局部浓度，可降低NETs 带来的毒害作用[49]；NETs 还会损害肠道微血管内皮细胞，导致微血管通透性增加，引起组织水肿和氧化损伤。然而，NETs 参与肠道功能损伤的机制很是复杂，但相关研究较少，所以关于NETs 介导的肠道损伤的详细和确切机制仍需进一步深入研究。

2.4 NETs与肿瘤

最近，一些研究调查了NETs 在肿瘤中的作用，并报道了它们参与肿瘤的进展、转移扩散等过程[15]。研究发现27 例接受择期根治性切除的结直肠癌肝转移（colorectal liver metastasis，CRLM）患者的组织病理学研究显示，CRLM 患者的肿瘤组织中有高水平的CitH3 表达，并显示CRLM 内NETs的存在与患者预后较差有关[57]，在弥漫性大细胞B细胞淋巴瘤患者中也发现了类似的结果[58]。此外，PAD4 缺陷型小鼠的皮下肿瘤生长明显慢于野生型小鼠，同时肝转移模型显示，PAD4 缺陷型小鼠的肿瘤转移明显少于野生型小鼠，而且肿瘤负担也更小[57]。其机制为NETs 增强了肿瘤细胞的线粒体功能，为肿瘤细胞的加速生长提供额外的能量。具体而言，NETs 释放的NE 激活肿瘤细胞表面的TLR4，导致过氧化物酶体增殖物激活受体γ 辅激活因子1α（peroxlsome proliferator-activated receptor-γ coactlvator-1α，PGC-1α）上调，增加线粒体的生物合成，从而促进肿瘤的生长[57]。以上表明，NETs通过改变肿瘤细胞的代谢程序，在肿瘤进展中起着重要作用。除此之外，NETs 可以包裹循环肿瘤细胞（circulating tumor cells，CTCs），有利于肿瘤的转移扩散[15]。研究[59]显示，NETs 能够捕获CTCs，并继发黏附到远处的器官上，运用DNase 治疗时，发现肿瘤细胞在肝窦的黏附减少，表明NETs 在一定程度上可以增加肿瘤的转移。Rayes 等[60]亦表明了NETs 生成缺陷、PAD4-/-及使用DNase1 可以有效减少肿瘤细胞转移到其他组织器官。因此，NETs对肿瘤的发生发展密切相关，抑制NETs 生成可一定程度上阻止癌症进展，在将来可成为有希望的治疗措施。

2.5 NETs与其他疾病

促进血栓形成NETs 的多种成分也被认为是凝血的激活剂，如中性粒细胞丝氨酸蛋白酶（neutrophil serine proteases，NSPs）通过降解组织因子途径抑制物（tissue factor pathway inhibitor，TFPI）促进凝血，而NE 和组织蛋白酶G 通过蛋白酶激活受体激活血小板[61]；组蛋白H4 刺激血小板释放无机多聚磷酸盐（inorganic polyphoshpate，PolyP） 从而激活FXII 途径，发生凝血[62]。McDonald 等[63]证实了NETs 诱导的血管内凝血依赖于NETs 中的组蛋白H4、血小板和PolyP 的释放之间的协同作用。再者，NETs 内的细胞外组蛋白可以通过接触途径组织因子上调以及间接通过血小板激活以多效性的方式促进凝血[64]。Zhou 等[65]表明，NETs 结构易导致脑卒中患者凝血酶和纤维蛋白的形成，从而构成动脉粥样硬化血栓形成的组装平台。此外，NETs 相关蛋白酶和组蛋白可以通过诱导蛋白S（protein S，PS）暴露和诱导内皮细胞表达组织因（tissue factor，TF）来放大内皮屏障功能障碍，诱导促凝血剂表型，而DNase I 和/或乳胶黏附素可降低这种促凝血活性，对动脉粥样硬化血栓形成的治疗起到一定的作用。

NETs 与自身免疫性疾病许多研究发现，NETs被认为是自身免疫性疾病中自身抗原的主要来源，特别是那些与抗中性粒细胞衍生蛋白的自身抗体相关的疾病[66-67]。研究者[68]在抗中性粒细胞胞浆抗体（antineutrophil cytoplasmic antibody，ANCA）相关性小血管炎患者的肾活检标本中发现NETs 沉积的证据，这些患者产生抗MPO 和抗蛋白酶3 等NETs成分的抗体。 类似地，类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）患者的滑膜液中也检测到NETs 成分[69]。原因是中性粒细胞自发或LPS 刺激后形成NETs 促进抗瓜氨酸蛋白抗体（anticitrullinated protein antibodies，ACPAs） 的产生，释放IL-6、IL-8 等免疫刺激分子，加剧自身免疫反应。而ACPAs 反过来也可刺激NETs 产生，由此形成一种恶性循环[70]。NETs 还参与系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE） 的发病过程[70-71]。SLE 患者血清中的中性粒细胞抗菌肽LL-37与双链DNA 所形成的免疫复合物能作为自身抗原通过B细胞受体和TLR9 活化B细胞，产生抗DNA抗体和抗菌肽LL-37 抗体，进而有利于核苷酸结合寡核苷酸结合域样受体蛋白3（nucleotide binding oligomerization domain like receptor protein 3，NLRP3）炎性小体激活，释放IL-1β 和IL-18，而IL-18 又可促进NETs 产生，形成促炎反馈回路，扩大炎症反应。研究还发现，SLE 患者存在NETs 的清除障碍，其原因在于SLE 患者体内产生抗NETs 抗体，使NETs 免受DNase I 破坏，导致NETs 在体内的积累[71]。此外，一些自身免疫刺激诱导的NETs 通过TLR9 和TLR7 信号通路激活浆细胞样树突状细胞(plasmacytoid dendritic cell，PDC)，从而促进α 干扰素（interferon α，IFN-α）的表达。IFN-α 的大量表达又可以促进单核细胞向树突状细胞分化，树突状细胞可以呈递自身抗原给CD4+T 细胞，导致T 和B 淋巴细胞的大量增殖，产生自身免疫效应[72]。因此，SLE 患者体内异常数量的NETs，不仅是自身抗原的重要来源之一，还可刺激低密度粒细胞（low-density granulocytes，LDGs）、内皮细胞和PDC等细胞产生炎性因子，参与狼疮肾炎等过程，加重SLE 病情的发展。因此，以作为靶点，控制NETs 的释放和清除有望成为临床治疗SLE 的方向。

3 针对NETs的治疗

到目前为止,通过调节NETs 生成主要有两大方式。分子药物及针对酶的抑制剂。前者包括抗炎药（阿司匹林），它选择性抑制血小板及减少血栓烷A2 信号，抑制NETs 生成[73]。抗血栓药物（血栓调节蛋白）调节中性粒细胞的过度激活，从而进一步抑制NETs 生成及促凝血反应[74]；抗氧化剂（丙酮酸乙酯）通过阻断ROS 介导的丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）/细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases，ERK1/2）和p38MAPK 活化来减轻NETs 形成和败血症引起的肠道损伤[75]。而后者包括各种针对酶的抑制剂，如磷酸二酯酶III，通过增加环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate，cAMP）水平抑制血小板聚集，以及抑制内皮细胞上的黏附分子表达，减少白细胞与内皮细胞的相互作用[76]；Cl-amidine（PAD4 抑制剂） 通过抑制PAD4介导的组蛋白H3 的瓜氨酸化，及降低MMP2 和MMP9 表达，从而减少NETs 组分的释放，避免组织器官的损伤[77]。此外，DNase I 对NETs 的降解减少了组织器官的损害[31,60]。

4 小 结

关于NETs 的研究仍在不断地深入，所涉及的疾病也极为广泛。虽然中性粒细胞释放的NETs 对宿主防御发挥重要的作用，但NETs 参与多种疾病的病理损伤不断地被研究。在肺部疾病中，NETs可激活先天性免疫反应，释放炎症激活标志物，造成频繁的肺部感染。通过DNase1 降解NETs 结构，可有效改善肺功能。在肝脏疾病中，NETs 参与HIRI 和SRLI 的发生。在炎症因子的作用下，中性粒细胞对肝脏具有特殊的“亲和力”，其与活化的透明质酸（HA）结合，使中性粒细胞在肝脏聚集黏附，并且肝窦上表达的VWF 将NETs 牢固地锚定在LSEC，这对NETs 在肝脏疾病发生发展起到促进作用。在肠道疾病中，NETs 可破坏肠上皮细胞的F-actin 细胞骨架和促进UC 患者的肠道微循环形成血栓。此外，NETs 还与肿瘤密切相关，通过改变肿瘤细胞的代谢水平，促进肿瘤发生发展。目前，针对NETs 及其组分的药物在动物实验取得较好的疗效，但NETs 组分对机体的确切作用尚未完全阐明，因此，仍需进一步研究NETs 的相关调控机制，为今后临床相关疾病的治疗方案和特异性靶点药物的开发提供新的发展思路。