研究人员开发出能更有效分离和鉴定T细胞的方法

T细胞受体（TCR）通过识别主要组织相容性复合物传递的肽来监视细胞环境。特定的TCR克隆可用作癌症和自身免疫性疾病的治疗剂。TCR通过V、D、J区段的体细胞重组最多可产生1 015个独特序列，因而需要高灵敏度和特异性的技术来分离和鉴定对目标抗原有反应的TCR序列。

当T细胞遇到抗原时，TCR就会识别并起作用，从而产生大量自身复制并指示免疫系统的其他部分攻击携带该抗原的细胞。在此过程中，一些不能对引起免疫反应的抗原起反应的细胞也会被周围细胞的免疫活动所激发。采用传统方法分离T细胞时会捕获许多上述细胞，因此需要对收集到的细胞进行分离，接着采用液滴的mRNA测序法（Drop⁃seq）对分离后细胞进行分析。然而，分离具有特定受体的T细胞的过程会用到交联技术，交联会降解T细胞的RNA，这给Drop⁃seq分析带来了极大的挑战性。

近日，美国加州大学等高校的研究人员采用化学可裂解的伯胺交联剂，构建了一种通过交联剂调控的mRNA测序的方法——CLInt⁃Seq，该方法利用了可逆的交联方式保留了T细胞的RNA的完整性，可有效回收细胞中与细胞内蛋白质（如细胞因子或转录因子）相关的抗原特异性TCR。该方法可以高通量分离和鉴定对任何抗原具有特异反应的低频TCR。该方法或可用于确定对SARS⁃CoV⁃2病毒起反应的T细胞受体、开发针对前列腺癌的T细胞疗法等。

研究的相关结果于2021年1月19日发表在《PNAS》期刊上。