局部腐烂水果的细菌检测与分析

郭晓 李文超

摘要：目的：检测局部腐烂水果的细菌含量可以促使人们更加重视自己的饮食习惯，提高生活水平。方法：先将三种实验水果放置在正常室温下一段时间，待其局部腐烂后，切取样本进行细菌培养培养24-48小时，每隔相同时间观察细菌生长情况，进行菌落计数。结果：水果因为放置时间过长而发生局部腐烂后，细菌会渗透到整个水果;腐烂部分的细菌增长率均高于完好部分的细菌增长率。腐烂部分的细菌增长率均约为完好部分细菌增长率的2倍。结论：水果无论腐烂的部位大小都不能再次食用，在日常生活中应该提高重视程度，健康生活。

关键词：局部腐烂水果;细菌;基础培养基

1引言

1.1细菌

细菌广泛分布于土壤和水中，或与其他生物共生。人体身上也带有相当多的细菌。由此可见，细菌对人类活动有很大的影响。所以本实验中检测局部腐烂水果中细菌含量具有重要意义。

1.2腐烂水果中常见的细菌及危害

腐烂水果中常见细菌有青绿色霉菌、枯草杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌等。食用局部腐烂的水果后，轻则引起肠道不适，腹泻呕吐等，重则会造成肠胃炎或脱水休克等。

1.3检测局部腐烂水果中细菌数量的意义

水果是我们生活中必不可少的营养来源，局部腐烂的水果中存在着细菌，真菌等微生物，細菌在这几类微生物中占绝大多数量。所以，检测局部腐烂水果的细菌含量可以促使人们更加重视自己的饮食习惯，提高生活水平。

2实验条件与方法

2.1实验材料

新鲜的苹果，香蕉、梨各三个：均采购于济南市郭店街道华联超市。营养琼脂、蒸馏水、纱布、生理盐水。

2.2实验仪器与设备

培养皿、离心管、恒温箱、高压蒸汽灭菌锅、天平、大、小烧杯、玻璃棒、试管、锥形瓶、量筒、超净工作台、天平、研钵、漏斗、剪刀、移液枪、酒精灯。

2.3实验方案

2.3.1新鲜水果预处理

将采购的水果放置于室温中数天，待其出现局部腐烂变质。

2.3.2琼脂的配置

首先，根据需要倒的平板数计算所需的各种原料的数量。按照33：1000的比例用量筒量取蒸馏水，再用天平称取营养琼脂加入水中，并不断用玻璃棒搅拌。配置好后，放入微波炉中180摄氏度，加热5分钟。

2.3.3器材前期准备

将配制好的培养基倒入锥形瓶中，用纱布和牛皮纸将瓶口封紧。准备20支试管，将试管清洗干净，向其中分别加入9ml的生理盐水，并试管塞塞紧;将所需要的实验器：离心管、试管、配置好的琼脂液、培养皿、移液管材清洗、沥干，并用废旧报纸或牛皮纸整齐包装好。

2.3.4灭菌

将上述实验材料和器材放入高压蒸汽灭菌锅中，103.43kPa（121.3摄氏度）灭菌1.5小时至2小时，保证灭菌效果，同时不损伤琼脂液的有效成分。

将实验过程中可能用到的工具（剪刀，移液枪，酒精灯等）统一放进超净工作台，利用超净工作台内的紫外线灯光进行照射，照射半小时，并提前开启通风，保证空气流通。

2.3.5取样

取样方法：直接取样法

取样部位：用剪刀分别剪取苹果、香蕉、梨腐烂变质和没有腐烂变质的部分各10g。

2.3.6提取果液

将切取下来的样本分别放入研钵压出汁液，将研磨后的汁液置于漏斗上，用纱布分别过滤到6个洁净烧杯中备用，用记号笔标记好取样部位。

2.3.7原液

用移液枪分别吸取烧杯中的果液各1ml注入不同的试管中，再分别向试管中缓缓注入1ml生理盐水，震荡混合均匀配置而成原液，做好标记。

2.3.8稀释

稀释10倍：用移液枪吸取1ml苹果未腐烂部分和腐烂部分的菌液分别注入含有9mL生理盐水的两支试管中，配置而成1：10的稀释液，其余2种实验材料按上述操作分别进行，做好标记。

2.3.9接种

将上述配置好的原液，10倍稀释液分别用移液管各移取1ml，接种到灭菌培养皿中。全过程在酒精灯旁操作，避免杂菌感染，保证实验结果的准确。

2.3.10分装

待琼脂液温度适中（太热会杀死细菌，使实验结果出现误差;太冷琼脂液会发生凝固）。一手持培养皿，一手持锥形瓶，开塞前在酒精灯上过火1—2次，迅速倒入10ml，再过火1-2次塞回。培养基不能超过培养皿容积的2/3。倒完后轻轻震荡，使其混合。混合完，将培养皿放于桌面，等待琼脂液自然凝固。琼脂液凝固后，将培养皿倒放，全过程在酒精灯旁操作，避免杂菌感染，保证实验结果的准确。

2.3.11培养

将上述培养皿用记号笔标记好接种时间和采样部位，放置在培养箱中，培养24-48小时，每隔相同时间观察细菌生长情况。

2.3.12数据记录

采用平板菌落计数法。

3实验结果与分析

实验数据显示，在水果因为放置时间过长而发生局部腐烂后，细菌会渗透到整个水果，所以无论局部腐烂的水果无论未腐烂的部分还是腐烂的部分都不能食用，否则会损害健康。

数据显示腐烂部分的细菌增长率均高于完好部分的细菌增长率。腐烂部分的细菌增长率均约为完好部分细菌增长率的2倍，但在梨中腐烂部分的细菌增长率约为完好部分细菌增长率的7倍。我们发现之所以出现高于其他两表比值的原因在于选取梨腐烂部分的样品时，选取了表面带有霉菌的部分，从而导致48h梨腐烂部分的细菌培养结果增加许多。

分析处理数据发现即使在实验过程中选取相同重量样本的前提下，三种实验水果的细菌含量却不同。我们发现问题在于与水果腐烂程度有关，水果局部腐烂程度越大，完好部分和腐烂部分的细菌含量也越多。相反，局部腐烂程度越小，细菌含量也相对来说越少。

3.1水果中细菌数量监测的结论与意义

通过本实验，可以得出局部腐烂水果的细菌数量。其中，无论是腐烂还是未腐烂的部分都含有细菌。从而可以得出水果无论腐烂的部位大小都不能再次食用。在日常生活中应该提高重视程度，健康生活。

3.2实验的不足与改进

在配置原液过程中以及倒平板的过程中混有空气中或实验水果带来的外部细菌，无法保证所培养出的细菌都是水果本身含有的，从而影响实验结果。因此实验过程中应尽量避免混有杂菌，全过程在酒精灯旁操作，保证结果的准确。

参考文献

[1]王继东.变质水果谨慎下口[J].发明与创新：大科技，2015（3）：1.

[2]史军.有选择地吃"烂果子"[J].健康博览，2015（4）：2.

[3]林泉.腐烂水果不烂部分有毒吗？[J].百科知识，2017（16）：1.

通讯作者：李文超，山东协和学院。

基金项目：山东协和学院2021年度大学生实验室开放项目《局部腐烂水果细菌的检测与分析》，项目编号：2021SYKF26