镇栗青和东升南瓜多糖含量及抗氧化活性初步研究

2021-03-19高英春吴晓东韦武青张文文高云宝

农业装备技术 2021年1期

高英春，吴晓东，韦武青，张文文，高云宝

（1.镇江市蔬菜研究所，江苏镇江 212004；2.镇江市农产品质量检验测试中心，江苏镇江 212000；3.内蒙古蒙兰农业科技有限公司，内蒙古 010020）

南瓜是葫芦科(Cucurbitaceae)南瓜属(Cucurbita)的一种一年生蔓生草本植物。目前，南瓜在我国的种植范围较广。南瓜软糯甘甜，既可当菜、又可作为杂粮，种子还能食用或制油[1]。南瓜中富含多糖、蛋白质、氨基酸、微量元素等，具有降脂、降糖等功能[2]，具有较高的营养价值和开发应用价值。南瓜中含有丰富的南瓜多糖，能提高机体的免疫功能，直接参与降血糖、降血脂等有关活动，对预防糖尿病有明显功效[3]。我国南瓜资源丰富，种类繁多，品种不同，营养成分含量不同[4]。镇栗青南瓜是镇江市蔬菜研究所培育的新南瓜品种，与常见红皮东升南瓜相比，口感软糯沙甜。本文以两种南瓜为研究对象，测定多糖的含量，并初步研究了南瓜多糖的体外抗氧化性，为开发利用南瓜资源提供试验依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

镇栗青南瓜：蔬菜所选育的品种，果实扁球形，质量约2 kg，果皮墨绿色，肉黄色；肉质致密，口感细腻，味如板栗。

东升南瓜：蔬菜所引进的西洋南瓜新品种，早生，易结果，果实厚扁球形，质量约1.5 kg，果皮金红色，肉厚，橙色，肉粉质香甜，风味优美。

两种南瓜均于2019 年3 月12 日采用穴盘电热线辅助育苗，3 月28 日按株行距35 cm×100 cm 定植于蔬菜所试验田内，正常田间管理。6 月30 日南瓜成熟采收，冻干成粉末，储存在-18 ℃度冰箱待用。

1.2 试验方法

1.2.1 镇栗青、东升南瓜多糖含量测定

葡萄糖标准曲线的绘制：将葡萄糖置于105 ℃烘箱中烘干至恒重，配成1 mg/mL 葡萄糖标准液，再稀释成不同浓度的葡萄糖标准溶液( 40、80、120、160、240 μg/mL)。取0.5 mL 不同浓度葡萄糖标准液于试管中，加入1 mL 5%苯酚溶液，混匀后快速加入5 mL 浓硫酸，混匀，30 ℃水浴显色30 min。将显色完全的溶液于490 nm 处测定吸光度，最后增加一个去离子水代替葡萄糖标准溶液做空白对照。绘制标准曲线，以不同葡萄糖浓度为X 轴，吸光度为Y 轴。测得的标准曲线为：Y=0.006 5X+0.072 3，R2＝0.99（n=6）（见图1 所示）。

图1 葡萄糖标准曲线

苯酚—硫酸法[5]测南瓜多糖含量：用分析天平准确称取两种干燥南瓜粉各0.25 g，再向250 mL 圆底烧瓶中加入150 mL 无水乙醇，在80 ℃恒温的条件下回流2 h，用布氏漏斗抽滤，残渣用无水乙醇洗涤后将乙醇回收。接着把沥干的南瓜粉转移至圆底烧瓶中，加入100 mL 蒸馏水溶解后再用沸水浴中提取2 h，抽滤取滤液。多次抽滤并将滤液合并，合并后的滤液转入250 mL 容量瓶中，蒸馏水定容后得待测粗多糖溶液。分别吸取1 mL 镇栗青、东升南瓜粗多糖溶液，与标准曲线处理相同，显色完全后于490 nm处测定其吸光度，依据标准曲线方程计算样品多糖含量。

1.2.2 镇栗青、东升南瓜多糖的抗氧化能力分析

南瓜多糖清除DPPH 能力的测定：精确称取DPPH 标准品19.75mg，无水乙醇溶解并定容于500 mL容量瓶中，配制成0.1 mmoL 的DPPH—乙醇溶液。取1 mL 不同浓度的南瓜多糖溶液（0～5 mg/mL），接着加入2 mLDPPH—乙醇溶液，摇匀，室温反应30min（避光），于波长517 nm 处测定其吸光度(AS)，用去离子水作为空白对照测定吸光度(AC)，VC作为阳性对照，DPPH 清除率公式如下：

南瓜多糖清除ABTS 能力的测定：取7 mmoL的ABTS 溶液5 mL，2.45 mmoL过硫酸钾溶液88μL 加入小烧杯中，混匀，室温下放置16 h（避光），用无水乙醇稀释至734 nm 处的吸光度为0.70±0.02。取不同浓度的南瓜多糖溶液（0～5mg/mL），6min 后在734nm下测定吸光度（AS）。去离子水为空白对照测定吸光度（AC），VA为阳性对照。ABTS 清除率公式如下：