TCT 联合HR-HPV DNA 检测在宫颈癌及癌前病变筛查中的应用

张冬燕

（河南科技大学第二附属医院 体检科， 河南 洛阳471000）

宫颈癌是临床常见妇科恶性肿瘤之一， 发病率在女性恶性肿瘤中居第二位， 但其是唯一可以防治的癌症。 因此， 早筛查、早诊治对于宫颈癌及癌前病变患者具有重要的临床意义［1］。 当前， 宫颈液基薄层细胞学 （TCT） 检查是针对宫颈病变的主要筛查手段， 但仍然存在漏诊以及误诊的风险［2］。 相关研究［3－4］表明， 宫颈转化区被人乳头瘤病毒 （HPV） 感染是造成宫颈癌的最主要原因， 辅助进行高危型人乳头瘤病毒基因 （HR－HPV DNA） 检测， 可进一步提高诊断准确率。 基于此， 本研究旨在探讨TCT 联合HR－HPV DNA 检测在宫颈癌及癌前病变筛查中的应用价值， 现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2016 年2 月至2017 年2 月在我院行宫颈病变筛查的受检者70 例， 其中未婚者30 例， 已婚者40 例；年龄20 ～64 岁， 平均 （45.31 ± 4.33） 岁。

1.2 入选标准纳入标准： 有性生活史； 子宫完整； 无放疗以及化疗史。 排除标准： 近期接受宫颈病变药物治疗者； 合并非宫颈组织的其他恶性肿瘤者； 6 个月内给予免疫调节剂或免疫抑制剂者； 7 d 内有阴道给药史者； 免疫功能缺陷者； 严重传染性疾病者。

1.3 方法①所有受检者均先行TCT 检查： 使用专门制作的一次性宫颈刷采集受检者宫颈外口、 宫颈管处的脱落细胞， 然后将其放于甲醛保存液中并多次进行充分漂洗， 将漂洗后的脱落细胞放在全自动制片机进行人工制片处理， 处理后进行人工巴氏染色， 并放于光学显微镜下进行观察分析， 最后参考中国医学科学院肿瘤医院制定的Bethesda 法进行分类： 无上皮内病变或恶性病变、 意义不明的不典型鳞状上皮细胞、 倾向高度病变的不典型鳞状上皮细胞、 低级别鳞状上皮内病变、 高级别鳞状上皮内病变和宫颈癌。 将意义不明的不典型鳞状上皮细胞及其以上病变判断为筛检阳性。 ②对不同类型的宫颈病变进行HRHPV DNA 检测， 具体操作如下： 使用广州安必平医药科技有限公司生产的检测试剂盒以及珠海黑马医学仪器有限公司生产的基因扩增PCR 仪、 佛山达安医疗设备有限公司的全自动核酸分子杂交仪， 严格按照产品说明书进行操作。 对16 种高危HPV 进 行 检 测： HPV16、 HPV18、 HPV31、 HPV33、 HPV35、HPV45、 HPV51、 HPV52、 HPV53、 HPV56、 HPV58、 HPV59、HPV66、 HPV68、 HPV73、 HPV82。 判断标准： 1 种HPV DNA≥1.0 ng／L 即为检测阳性。 在完成TCT 及HR－HPV DNA 筛查当天通过阴道镜对患者进行宫颈病变组织多点病理活检， 必要时采取宫颈锥切， 在常规病理制片、 苏木精－伊红染色法染色、盲法阅片后做出诊断， 并以此为金标准。

1.4 评价指标以病理活检结果作为 “金标准”， 分析TCT 联合HR－HPV DNA 检测筛查宫颈病变的准确度、 灵敏度、 特异度及与病理活检结果的一致性。

1.5 统计学处理采用SPSS 20.0 统计学软件处理数据。 计数资料以百分数和例数表示； 进行Kappa 一致性检验， Kappa＜0.4，一致性较差； 0.4≤Kappa＜0.75， 一致性一般； Kappa≥0.75，一致性较好。 P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 病理活检结果70 例受检者中， 经病理活检确诊宫颈低级别鳞状上皮内病变35 例， 宫颈高级别鳞状上皮内病变20 例，宫颈癌15 例。

2.2 TCT 联合HR-HPV DNA 检测的诊断效能TCT 联合HRHPV DNA 检测筛查宫颈癌及癌前病变的准确度为91.43% （64／70）， 灵敏度为92.73% （51／55）， 特异度为86.67% （13／15）。见表1。

表1 TCT 联合HR-HPV DNA 检测的结果 （例）

2.3 一致性检验经Kappa 一致性检验， TCT 联合HR－HPV DNA 检测结果和病理活检结果的一致性较好 （Kappa ＝0.757，P ＝0.000）。

3 讨论

宫颈病变的高危因素包括高危型HPV 持续感染史、 性传播性疾病史、 长期使用免疫抑制剂类药物或患有免疫抑制性疾病史等， 其中最为主要的原因是宫颈以及黏膜被HPV 感染［5］。宫颈癌并不是程度不同的单一病理性改变， 而是在宫颈浸润性癌产生之前， 存在着很长时间的癌前病变［6］， 并且根据病情的不断进展出现明显差异的病变反应， 具体表现为低级别鳞状上皮内病变以及高级别鳞状上皮内病变。 既往， 宫颈癌在老年患者中较为常发， 但是当前宫颈癌逐渐呈现低龄化发展的趋势，严重损害女性患者的生理以及心理健康。 因此， 寻求准确度、灵敏度、 特异度均高的检测方法对宫颈癌以及癌前病变进行筛查， 并根据筛查结果采取针对性治疗措施临床意义重大。

TCT 是用来判断宫颈细胞是否有病变的一种检查方法， 基于脱落细胞制片技术进行检测， 只需要采集较少的样本细胞，可减少细胞的重叠率， 呈现出较为清晰的结构图像， 通过对细胞核的异型性、 细胞质的形态或者染色情况进行分析， 进而对上皮细胞的病变程度进行评估［7］。 但是TCT 取样过程中会存在病变部位宫颈上皮细胞的漏取， 并且观察TCT 形态学时会受到检查者主观判断的影响， 降低TCT 检查的准确性［8－9］。 而针对TCT 检查提示有低级别鳞状上皮细胞内病变或者高级别鳞状上皮内病变的人群， 需要进一步做HR－HPV DNA 筛查。 HRHPV DNA 检测是对宫颈上皮细胞HPV DNA 的扩增情况进行评估， 进而判断HPV 感染程度， 通过HR－HPV DNA 检测柱状上皮细胞的高危病毒基因， 可以有效避免检测环境以及温度对检测结果的影响， 有较高的可靠性； 另外， 在进行HR－HPV DNA 检测时， 在较低的基础性细胞浓度要求下就能实现对HPV 病毒的扩增， 对病毒载量进行有效评估， 上皮细胞感染程度的评估准确性较高［10－11］。 本研究结果显示， TCT 联合HRHPV DNA 检测筛查宫颈癌及癌前病变的准确度、 灵敏度、 特异度均较高； 且经Kappa 一致性检验， TCT 联合HR－HPV DNA 检测结果和病理活检结果的一致性较好， 表明TCT 联合HR－HPV DNA 检测筛查宫颈癌及癌前病变的价值较高。

综上所述， TCT 联合HR－HPV DNA 检测能有效筛查宫颈癌及癌前病变， 临床应用价值较高。