超高效液相色谱-串联质谱法测定粮谷中18种农药残留

宁阳阳

（辽宁省农产品及兽药饲料产品检验检测院，辽宁沈阳 110032）

1 材料和方法

1.1 材料与试剂

本次研究采用的试剂中，除去一些特别的标注外，大部分为分析纯，而试验用水则是超纯水；甲醇（色谱纯）；乙腈（色谱纯）；甲酸（优级纯）。

农药种类为噻虫胺（99.25%），乙氧氟草醚（99.40%），抑霉唑（99.00%），异稻瘟净（97.50%），扑草净（99.00%），氯磺隆（99.00%），氯嘧磺隆（98.00%），茚虫威（99.50%），杀虫脒（99.50%），野麦畏（99.00%），异丙隆（99.00%），生物苄呋菊酯（100 mg/L），甲草胺（100 mg/L），氧乐果（100 mg/L），乙草胺（100 mg/L），丙草胺（100 mg/L），异丙甲草胺（100 mg/L），三唑磷（100 mg/L）。

1.2 仪器与设备

超高效液相色谱串联四级杆质谱联用仪（ACQUITY UPLC，Quattro Premier XE），冷冻高速离心机（Avanti J-E），Milli-Q超纯水纯化系统，中性氧化铝柱（500 mg/3 mL），12管固相萃取装置，分析天平[1]。

1.3 试验方法

1.3.1 溶液的配制

（1）标准储备液配制。分别准确称取固体标准品适量，加入乙腈溶解，定容到100 mL，配成质量浓度约为500 mg/L的标准储备溶液。

（2）标准中间液配制。取标准储备溶液1.00 mL，用乙腈定容至10 mL，配成质量浓度约为10 mg/L的标准中间液，放置于4 ℃冰箱中保存。

1.3.2 基质加标标准溶液

取粉碎的粮谷样品10 g，放置于50 mL离心管中，加入10 mL水，静置10 min后再添加10 mL乙腈并混匀，经超声波振荡提取30 min，之后添加5 g氯化钠，混匀，在10 000 r/min离心条件下离心5 min；取上清液5 mL于中性氧化铝柱中进行净化，然后采集流出液，用乙腈（1 mL）淋洗小柱，吹干后收集，在40 ℃氮气下吹至近干，60%乙腈定容至1.0 mL，混匀，在离心机上离心3 min（转速为16 000 r/min），经0.2 μm滤膜过滤，再添加适量的标准溶液于过滤后的提取液，制成基质加标的标准溶液，要求现配现用[2]。

1.3.3 甲酸（0.1%）、乙腈（60%）的配制

（1）甲酸配制。水（500 mL）+ 甲酸（0.5 mL）。

（2）乙腈配制。水（400 mL）+ 乙腈（600 mL）。

1.3.4 样品处理

取粉碎的粮谷样品10 g，放置于50 mL离心管中，加入10 mL水，静置10 min后再添加10 mL乙腈并混匀，经超声波振荡提取30 min，之后添加5 g氯化钠，混匀，在10 000 r/min离心条件下离心5 min[3]；取上清液5 mL于中性氧化铝柱中进行净化，然后采集流出液，用乙腈（1 mL）淋洗小柱，吹干后收集，在40 ℃氮气下吹至近干，60%乙腈定容至1.0 mL，混匀，在离心机上离心3 min（转速=16 000 r/min），经0.2 μm滤膜过滤，待测。

1.3.5 测定条件

（1）色谱条件。色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）；柱温：35 ℃；检测仪器：串联四极杆质谱仪；流动相：0.1%甲酸-乙腈梯度洗脱；进样量：10 μL。

（2）质谱条件。电离源：电喷雾质谱正离子模式；毛细管电压：3.5 kV；离子源温度：120 ℃；脱溶剂气的温度及流量：400 ℃、700 L/h；碰撞室压力：2.7×10-3mbar。

2 结果与分析

2.1 线性关系

由表1可知，在各自的线性范围，其中氧乐果、杀虫脒、野麦畏、抑霉唑、氯嘧磺隆、乙氧氟草醚、生物苄呋菊酯的线性相关系数显示R2＞0.99，而三唑磷、噻虫胺、异丙隆、异丙甲草胺、扑草净、氯磺隆、甲草胺、乙草胺、丙草胺、茚虫威、异稻瘟净的线性相关系数显示R2＞0.999。

表1 18种农药的线性方程与相关系数

2.2 检出限和定量限

依据线性范围最低的质量浓度进行进样[4]，然后在信噪比3∶1及10∶1的条件下得出各农药的检测限及定量限，结果如表2所示。

表2 18种农药的检测限和定量限结果

2.3 回收率和精密度

利用空白样品的基质溶液进行标准工作溶液的配制，空白样品即是未检出的样品。每种农药残留进行3个梯度的加标试验，每个梯次加标质量分数平行测定2份，最后取数据的平均值[5]。

由表3可知，研究的18种农药中，13种农药的（噻虫胺、乙氧氟草醚、抑霉唑、异稻瘟净、扑草净、氯磺隆、氯嘧磺隆、茚虫威、野麦畏、异丙隆、生物苄呋菊酯、氧乐果、三唑磷）平均回收率在80.8%～104.0%，其RSD在0.2%～7.1%。另外5种农药的（丙草胺、甲草胺、乙草胺、杀虫脒、异丙甲草胺）平均回收率62.1%～89.4%，RSD为0.2%～11.1%。

表3 加标回收试验结果

续表3

3 结论

本方法可以同时对粮谷中的18种农药残留进行检测，并且在各自的检测质量浓度范围内，其线性关系表现较为良好，有11种农药的R2＞0.999，7种R2＞0.99；并且检测限及定量限全部符合相关的标准，并且检测效率高；13种农药的（噻虫胺、乙氧氟草醚、抑霉唑、异稻瘟净、扑草净、氯磺隆、氯嘧磺隆、茚虫威、野麦畏、异丙隆、生物苄呋菊酯、氧乐果、三唑磷）平均加标回收率80.8%～104.0%，5种农药的（丙草胺、甲草胺、乙草胺、杀虫脒、异丙甲草胺）平均回收率62.1%～89.4%。与国标方法相比，本方法在对样品的前期处理中，进一步简化了样品净化和提取的复杂工序，提升了工作效率；试验中未选择使用GPC凝胶净化仪，是因为其成本高，由此可以减少检验的成本投入。