非酒精性脂肪性肝病患者血清SDC4变化及其临床意义探讨*

2021-02-04夏淑晶张莉莉张秀梅赵根宝周松伟罗欲承陈红芹王子华成凤干范建高

实用肝脏病杂志 2021年1期

夏淑晶，张莉莉，张秀梅，赵根宝，周松伟，罗欲承，陈红芹，王子华，成凤干，范建高

既往研究发现，与炎症(脂联素)、细胞凋亡(细胞角蛋白18片段)和氧化应激(细胞色素P450)[4]相关的血清标记物可以用于非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)的无创诊断[1-4]。由于此类指标的敏感性和特异性还不高，并不能满足临床的需求。多配体蛋白聚糖-4(syndecan-4，SDC4)是一种表达在细胞表面的蛋白聚糖，属于硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(heparan sulfate proteoglycans，HSPGs)类的多配体蛋白聚糖家族成员之一。SDC4广泛分布于多种组织细胞中，通过参与调节细胞因子间信号转导和介导细胞与细胞外基质的粘附等功能，在体质量控制、糖脂代谢、炎症反应、损伤修复、血管生成等病理生理过程中发挥作用[5-8]。本研究检测了健康体检成人血清SDC4水平，分析了其变化的影响因素以及在诊断NAFLD方面的临床应用价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象 2019年6月～12月在江苏省兴化市人民医院参加健康体检的人群。NAFLD的入选标准为无饮酒史或平均每周饮酒量小于 210 g(女性为小于140 g)，腹部超声检查符合弥漫性脂肪肝的影像学特征。排除病毒性肝炎、酒精性肝病、药物性肝损害、自身免疫性肝病、肝豆状核变性、全胃肠外营养、甲状腺功能亢进或减退、恶性肿瘤、血液系统疾病、阻塞性睡眠呼吸暂停综合征、严重的感染、心肺功能不全、多囊卵巢综合征、处于妊娠期、哺乳期或口服避孕药的女性或存在可以导致脂肪肝的特定疾病[9]。本研究已经兴化市人民医院医学伦理委员会审核通过。

1.2 临床资料的收集询问并记录研究对象的性别、年龄、既往病史、个人史(吸烟、饮酒、用药等)、家族史，并测量身高、体质量、腰围、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、计算体质指数(BMI)= 体质量(kg)/身高2(m2)。

1.3 实验室指标检测使用XE-2100 全自动血细胞分析仪测定血液红细胞(RBC)计数和血红蛋白(HB)含量(美国贝克曼库尔特公司)；使用AU-2700 型全自动生化分析仪及其配套试剂盒检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、尿酸(UA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、载脂蛋白A1(APOA1)、载脂蛋白B(APOB)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FBG美国贝克曼库尔特公司)；采用免疫层析法检测糖化血红蛋白(HbA1c，日本东曹株式会社))；使用ADVIA DX3检测仪和采用化学发光法检测空腹胰岛素(FINS，美国贝克曼库尔特公司)，依据公式计算HOMA稳态模型检测的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR = FBG(mmol/L)× FINS(mIU/L)/22.5)；采用ELISA法检测血清SDC4含量(美国 BM公司)。

1.4 肝脏超声检查常规行腹部超声检查。弥漫性脂肪肝的诊断及其严重程度评估依据： (1)肝脏近场回声弥漫性增强，强于脾脏和肾脏，远场回声逐渐衰减；(2)肝内管道结构显示不清；(3)肝脏轻至中度肿大，边缘圆钝；(4)彩色多普勒血流显像提示肝内彩色血流信号减少或不易显示，但肝内血管走形正常；(5)肝右叶包膜及横隔回声显示不清或不完整。具备上述第1项和第2～4项中任一项者为轻度脂肪肝，具备上述第1项和第2～4项中两项者为中度脂肪肝，具备上述第1项和第2～4项中两项及第5项者为重度脂肪肝[10]。

2 结果

2.1 基本资料在209例体检成人中，发现NAFLD组102例(48.8%)，男性69例，女性33例；平均年龄为52.7±11.0岁；健康人107例，男性41例，女性66例；平均年龄为51.3±7.3岁。NAFLD组男性患者占比、BMI、腰围、RBC、HB、ALT、AST、GGT、UA、TC、TG、FBG、HbAlc、FINS和HOMA-IR等指标显著高于健康人，而ApoA1和HDL-C则显著低于健康人(P<0.05，表1)。

2.2 血清SDC4含量与NAFLD病变程度的关系重度脂肪性肝病患者血清SDC水平显著高于轻度患者(P< 0.05，表2)。

2.3 影响NAFLD发生的相关因素分析 Logistic回归分析发现，BMI、腰围、RBC、HB、ALT、UA、TG、FBG和SDC4与NAFLD发生独立相关(表3)。

2.4 血清 SDC4对NAFLD的预测价值根据ROC分析，SDC4诊断NAFLD的曲线下面积(AUC)为0.917 (95%可信区间为0.878～0.956，P<0.001)，诊断的截断点为8.45 ng/mL，敏感度为84.3%，特异度为87.9%(图1)。

3 讨论

NAFLD不仅导致肝硬化和肝细胞癌，还与肥胖、糖尿病、代谢综合征互为因果并共同促进心血管疾病和肝外恶性肿瘤的发生。肝活检是诊断NAFLD和判断疾病严重性的“金标准”[11，12]，因为至今仍缺乏理想的血清学标记物无创诊断NAFLD及评估肝脂肪变、炎症损伤和纤维化的程度。

SDC是由核心蛋白和糖胺多糖组成的跨膜HSPG，共有四个亚型[13]。蛋白聚糖共同结构的胞外区为硫酸肝素链样结构，能够与细胞外配体结合，从细胞表面水解脱落转变为可溶的硫酸肝素效应子，脱落的可溶性SDC分子可由旁分泌或自分泌的形式调节细胞的生物学活性，或作为竞争性抑制剂产生负反馈，调节多种病理生理过程14]。由于脱落的可溶性SDC胞外区经释放进入血液循环，在外周血液中可被检测出来，所以可作为某些疾病诊断及预后判断的标记物[15]。已发现血液SDC1检测可以用于慢性病毒性肝炎患者肝纤维化的无创诊断，还被发现有助于判断多发性骨髓瘤、宫颈癌、肺癌等恶性肿瘤患者的预后16]。SDC4的 rs1981429位点在健康儿童中被发现与其腹部内脏脂肪增加有关17]，在成人中则被发现与血浆甘油三酯升高密切相关。高脂饮食喂养雌性Sdc4-/-小鼠比野生型小鼠有较高的体脂含量和胰岛素抵抗，以及更高的血液甘油三酯和葡萄糖水平[18]。然而，至今鲜见有关血清SDC4与NAFLD关系的相关研究报道。本研究采用酶联免疫吸附法检测了209例无过量饮酒史且无其他肝病的健康体检成人的血清SDC4含量，并通过肝脏超声检查判断有无脂肪肝及其程度，结果发现102例NAFLD患者。与既往研究结果相似，男性、BMI、血脂、血糖及胰岛素抵抗等指标与NAFLD关系密切，提示肥胖、高脂血症、高血糖、低HDL-C、IR是NAFLD的危险因素[19, 20]。本研究发现，NAFLD组血清SDC4水平显著高于健康人，提示SDC4可能亦与NAFLD有关。亚组分析发现，血清SDC水平随着肝脏脂肪含量的增加而呈显著增高趋势，提示血清SDC4水平与NAFLD患者肝脂肪变程度有关。有分析发现，血清SDC4水平与健康体检成人BMI、腰围、血糖、血脂及HOMA-IR等呈正相关，而肥胖、高血脂、高血糖都是代谢综合征的重要组分，提示血清SDC4水平同样可以反映代谢心血管危险因素，可能是血清SDC4水平与NAFLD及严重程度相关的原因。我们经Logistic逐步回归分析显示，血清SDC4水平与健康体检成人NAFLD的独立相关，提示血清SDC4增高可能独立于传统的代谢心血管危险因素参与NAFLD的发病。本研究经受试者工作特征曲线研究发现，血清SDC4水平大于8.45 ng/mL对无传统损肝因素的健康体检成人脂肪肝诊断有较高的敏感性和特异性，提示血清SDC4水平可以作为独立标志物用于无创诊断及评估NAFLD。