咳宁糖浆的薄层色谱鉴别研究

曹铃铃

（江苏省南通市通州区中医院药剂科，江苏 南通 226300）

咳宁糖浆是由重楼、大青叶、枳壳、黄芪等11味中药组成的复方制剂，具有清热益气、宣肺化痰的功效，主治风热犯肺症，多用于治疗急慢性支气管炎和支气管哮喘，尤其适用于反复发作、迁延不愈的顽固性咳嗽，临床疗效确切。重楼、枳壳、黄芪三味药材是咳宁糖浆组方中的君药，其成分含量与药材质量对制剂的疗效有着直接影响。为控制咳宁糖浆产品质量，笔者参考《中国药典》（2010版）关于三味药材或饮片的薄层色谱鉴别方法[1]，以及含有这三味药材的中成药制剂对药材的鉴别方法，建立简单易行、专属性强的薄层色谱法对三味药材进行定性鉴别。经反复试验，增加了重楼、枳壳、黄芪的薄层色谱鉴别，并对其阴性对照进行了薄层色谱鉴别的研究，效果满意，现报道如下。

1 仪器与试药

仪器：瑞士GAMAG薄层色谱数码成像系统，型号：TLC Visualizer；赛多利斯 BS110S电子天平，精度0.0000g；上海KZW-G型恒温不锈钢水浴锅；昆山舒美KQ-250B型超声波清洗机，超声频率20～40 KHz。

试药：咳宁糖浆（批号：140825、140902、140903）及阴性对照，均由通州区中医院提供；重楼对照药材（121157-200402），购自于中国食品药品检定研究院；枳壳对照药材（120981-200403），购自于中国食品药品检定研究院；黄芪甲苷（110781-200613），购自于中国食品药品检定研究院。

试剂：硅胶G薄层板，产自青岛海洋化工厂；乙腈为色谱纯试剂；其他试剂均为分析纯。

2 方 法

2.1 重楼的薄层色谱鉴别

取咳宁糖浆20 ml，加入30 ml水饱和正丁醇液（混合比1:1）振摇提取，重复操作2次，将2次振摇提取的正丁醇溶液合并，加入氨试液20 ml洗涤，重复操作2次后，弃去氨试液，蒸干正丁醇液，取残渣以1 ml甲醇溶解，作为供试品溶液。另取重楼对照药材1 g，加水50 ml煎煮30 min，滤过取液，浓缩至20 ml，加30 ml水饱和的正丁醇溶液，同法制成对照药材溶液。

取一张硅胶G薄层板，上面分别点上供试品溶液、对照药材溶液各5 µ1，操作参照《中国药典》（2010版附录Ⅵ B）[2]，展开剂为三氯甲烷-甲醇-水下层液，成分比15:5:1。样本常规展开、取出、晾干后，表面喷10%硫酸乙醇溶液，在烘箱105℃加热至斑点清晰显色，分别在日光下和紫外光灯下进行检视，紫外线波长365 nm。供试品色谱中与对照药材色谱相应的位置上，是相同颜色的斑点或荧光斑点。

2.2 枳壳的薄层色谱鉴别

取咳宁糖浆用乙酸乙酯振摇提取，除此之外，供试品溶液与对照药材溶液的制作方法同重楼一致。同法依照《中国药典》，分别在硅胶G薄层板上滴加枳壳供试品溶液5 μl、对照药材溶液10 μl，成分比100:17:13。展开约5 cm后，取出晾干，再次使用展开剂甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水上层液展开，展开剂成分比20:10:1:1。再次取出后晾干，表面喷三氯化铝试液，热风吹干后，365 nm波长紫外灯下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，呈相同颜色的荧光斑点。

2.3 黄芪的薄层色谱鉴别

取本品20 ml，用水饱和正丁醇振摇提取二次，每次30 ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤二次，每次40 ml，弃去氨试液，正丁醇液蒸干黄芪取用量、振摇提取方法、洗涤与蒸干方法等同重楼，残渣加水5 ml溶解后，通过D101型大孔吸附树脂柱，树脂柱参数：直径1.5 cm，高1.2 dm。依次使用水50 ml洗脱、稀乙醇50 ml、70%乙醇50 ml洗脱样本，收集洗脱液，蒸干后残渣加甲醇1 ml溶解，制成供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加入甲醇制成比例为1 ml:1 mg的对照品溶液。同法硅胶G玻板上滴加两种溶液各5 µ1，以三氯甲烷-甲醇-水下层液为展开剂，成分比13:7:2，放置温度10℃。展开后取出晾干，喷10%硫酸乙醇溶液，105℃加热显色后日光和紫外线下检视，具体同重楼测定操作一致，其供试品色谱斑点的位置与颜色显示情况也同重楼。

2.4 观察指标

获取薄层鉴别色谱图，观察不同批次样本重楼、枳壳、黄芪三味药材与对照药材的斑点情况，验证专属性。

3 结 果

咳宁糖浆组方中重楼的薄层色谱鉴别色谱图见图1，发现不同批次的样本均检出与重楼对照药材相对应的斑点，而缺重楼的阴性对照在相同位置未检出斑点，说明阴性对照无干扰，方法的专属性较好。枳壳的薄层色谱鉴别图见图2，发现不同批次的样品均检出对照品斑点，且与枳壳对照药材相应的位置有相同的荧光斑点，缺枳壳的阴性对照无干扰，说明方法的专属性较好。此外，黄芪的薄层色谱鉴别图上也可见不同批次的咳宁糖浆均检出与黄芪甲苷对照品相对应的斑点，阴性无干扰，说明该薄层鉴别方法的专属性比较好。

图1 重楼薄层色谱鉴别图

图2 枳壳薄层色谱鉴别图

4 讨 论

薄层色谱法利用不同成分对吸附剂吸附能力的差异进行成分分离，根据比移值与对照物按同法所得色谱图比移值进行对比，来鉴别药品、检查杂志或测定含量[3]。此法具有操作简单、分离能力强、展开时间短、显色方便、斑点集中、色谱直观性强的技术特点和优势[4]，可以快速分离和定性分析少量物质，灵敏度高，在药品纯度检测与质量控制方面发挥着重要作用[5]。本研究采用此法对我院自制咳宁糖浆中的三味君药进行定性鉴别，结果示专属性强，重现性好，且无阴性干扰，提示用该制剂质量控制有效可行，对我院自制制剂质量标准提高起到积极地推动作用，有利于确保临床用药安全与有效，值得推广使用。