血浆Septin9基因甲基化与结直肠癌的研究进展

许冠雄，吴钇江

(重庆医科大学附属第二医院检验科，重庆400010)

0 引言

结直肠癌是世界第四大致死癌症，随着经济高速发展，人口老龄化进程加快，国民生活习惯和饮食结构也随之转变，近年来我国患有直结肠癌的患者比例逐年上升，发生率占据各肿瘤疾病发生的前5位且我国早期诊断率仅5-10%[1]。早期预防，早期筛查，早期诊断并采取有效措施进行干预治疗对于减少CRC的发病率和病死率，提高患者的带病生存年限具有至关重要的作用。目前，结直肠癌常见的早期筛查方式为CEA检测、FOB试验和结直肠镜检。然而前两者CEA与FOB的临床应用价值有限，而后者结直肠镜检虽为金标准、特异度高，但早期筛查敏度不甚理想，且其需肠道准备、检查禁忌证多、患者依从性差、侵入性操作易造成并发症等诸多不便而应用有限[2]。上述情况对于结直肠癌早期筛查、诊断造成一定的障碍。而血浆mSeptin9检测的检测标本为血浆，可达到无创取样、方便且检测快速的目的，且在 CRC 中诊断价值较高，近年来逐渐开始用于结直肠癌的相关早期筛查、诊断之中。

1 SEPTIN9基因甲基化与CRC的发生、发展的相关性

结直肠癌的发生、发展是一个由多种基因参与、受众多因素影响，并需经历多阶段演变的复杂过程，其确切机制尚不明确，目前较公认的是“腺瘤→癌变”学说[3]，其致病机制主要包括有CpG岛甲基化、微卫星不稳定和染色体不稳定3种，其可单独致病，也可多种途径交错综合作用。Septin9基因在结直肠癌发生中起抑癌基因作用，若中央鸟核苷酸序列结构域发生突变，该基因的抑癌功能就会丧失，从而导致细胞分裂的调控紊乱，并逐渐趋向癌变。研究表明[4, 5]，直结肠癌患者在患病的过程中约90%的患者SEPT9基因中的CpG岛发生甲基化。Toth[6]等通过检测CRC患者在不同阶段中体内mRNA及相关蛋白表达水平，发现Septin9 mRNA及相关蛋白表达水平会因为结肠癌细胞逆甲基化而增加，这说明mSeptin9状态与CRC的发生、发展过程紧密相关，而且这个过程具有可逆性，所以mSeptin9将来也可能发展为CRC干预治疗和预后监测的重要指标。综上，从近年来相关研究中我们可以得出一个结论，CRC的发生、发展与mSeptin9具有高度相关性。

2 血浆mSeptin9检测在结直肠癌中的临床价值

mSeptin9的独立早期筛查价值康倩[7]等研究发现，相比于高敏感，低特异的粪便潜血试验，CRC患者血浆中mSeptin9检测的检测灵敏度为75.0%，特异度为98.1% ，具有较好的临床应用价值。Grutzmann R[8]等通过双盲法病例对照研究血浆中的mSeptin9检测情况，检测结果显示实验组（CRC患者组）的阳性检出率远远高于对照组（健康人群），此差异具有统计学意义。同时为更加充分地阐述Septinn9基因甲基化与结直肠癌的关系，该研究还纳入非恶性疾病患者和其他恶性肿瘤患者作为研究对象,对照研究结果显示CRC组的阳性检出率明显高于非恶性疾病患者和其他恶性肿瘤患者，该差异也有统计学意义。其他相关报道[9]也得出类似的结论:与非结直肠癌患者和正常健康人群相比,CRC患者血浆中mSeptin9水平明显升高。另有研究表明[5]，直结肠癌患者在整个病程中约90%的患者Septin9基因中的CpG岛发生甲基化，相比于正常的癌旁或结肠组织有明显的统计学差异，具有较高的特异性，已成为结直肠癌的早期诊断分子标志之一。

当然，这种方法也存在一定的不足。陈培[9]等研究发现mSeptin9阳性率在各结直肠癌临床病理分化阶段以及肿瘤存在部位的相关性无统计学意义。Warren[10]和Church[11]等针对结直肠腺瘤和息肉进行研究，设置实验组（结直肠腺瘤和息肉患者）和对照组，实验结果显示实验组与对照组的阳性检出率间的差异都没有统计学意义，这说明血浆Septin9基因甲基化检测在结直肠腺瘤和息肉等癌前病变中的特异性和敏感度极低，对于此类疾病的检出效果非常不理想。李士杰[12]等也针对23例腺瘤患者进行了mSeptin9检测，结果也得出了类似的结论：该方法在腺瘤中的阳性检出率极低。

综上，我们可以得出结论，虽然血浆中mSeptin9检测可适用于结直肠癌临床病理分化程度各阶段的患者，但是与其各阶段间的相关性不大。且此方法在结直肠癌癌前病变患者中的检出率极低，亦不能针对此类癌前病变进行早期筛查、早期诊断。

mSeptin9与FOB或CEA联合检测的临床应用价值黎阳[2]等研究显示，mSeptin9的ROC曲线下面积（AUC）为0.828，FOB的AUC为0.674，而mSeptin9与FOB联合诊断的AUC为0.851，这说明二者联合诊断的临床应用价值高于mSeptin9和FOB单独检测。吴东等[13]研究阐明mSeptin9联合FOB检测，其诊断大肠进展期腺瘤的灵敏度为67.6%，特异度为47.4%，这说明二者联合检测对监测结直肠的癌前病变也有一定的参考价值。邓子昂[14]等以诊断为结直肠癌且尚未行抗肿瘤治疗的患者为受试者进行mSeptin9和CEA单独检测与联合检测的阳性率比较，发现mSeptin9单独检测诊断结直肠癌的阳性率和CEA比较，差异具有统计学意义；同时，当mSeptin9和CEA两者联合检测时，诊断结直肠癌阳性率为78.5%，显著高于mSeptin9与CEA的单独检测的66.4%和41.1%，这证明了mSeptin9与CEA的联合检测的临床应用价值明显高于二者单独检测。故mSeptin9与CEA或FOB的联合检测将大大提高结直肠癌的诊断阳性率，临床应用价值远高于三者单独检测对结直肠癌患者的诊断，且对监测结直肠的癌前病变也有一定的参考价值。

mSeptin9在结直肠癌术后及预后的监测价值黄剑辉[15]等通过对开展了腹腔镜手术治疗后的结直肠癌患者的mSeptin9、CEA的阳性率随访监测中，发现2至6个月内mSeptin9对结直肠癌术后转移与复发的监测准确率为86.73%、灵敏度 73.68%、特异度 95.00%、阳性预测值90.32%、阴性预测值85.07%，其结果远高于CEA与之对应的监测准确率62.24%、灵敏度 34.21%、特异度 80.00%、阳性预测值 52.00%、阴性预测值 65.75%。这表明血浆mSeptin9具有比血清CEA更高的结直肠癌术后监测价值，作为结直肠癌腹腔镜手术后随访项目具有一定的意义。杨宁等[16]研究表明有97.5%的结直肠癌患者在接受手术治疗后1d mSeptin9的水平出现了明显的下降乃至阴性，且术后7d内mSeptin9水平呈现持续下降趋势。这也可得出结论：mSeptin9的水平与疾病的进展和预后有着良好好的相关性。由此，血浆mSeptin9检测作为结直肠癌的早期筛查诊断指标之外，其在结直肠癌的术后及预后中亦可起到一定的监测价值，这对于通常以手术创伤程度、术后恢复速度与生存时间的传统术后及预后评价方法来说也极具创新意义。

3 讨论

经证实，mSeptin9与CRC的发生、发展、预后呈现高度相关性。基于血浆mSeptin9检测方法具有微创，取样方便，患者依从性高，检出效果理想，特异性较高等优点，适合于结直肠癌的临床诊断，因此它可作为结直肠癌临床诊断的重要肿瘤标志物之一，更重要的是该指标不受年龄、性别及肿瘤发生部位的影响。当然我们对Septin9基因与结直肠癌发生发展的关系的了解还只是冰山一角，目前尚无针对mSeptin9、FOB、CEA三者联合检测的临床应用价值进行探讨的报道；其次，mSeptin9联合检测对癌前病变的早期筛查价值虽有所改观但有待进一步的研究。希望通过今后不断地深入研究，系统阐明Septin9基因的生物学功能和表达情况及其与结直肠癌的关系，进一步探索其在结直肠癌治疗干预和术后监测的临床应用价值，使其成为早期预测结直肠癌发生的肿瘤标志物和基因治疗的理想靶点。

综上所述，血浆mSeptin9检测及其相关联合检测对于结直肠癌的筛查、诊断、进展、预后评估等方面均有不错的临床应用价值，具有临床推广意义。