超高效液相色谱仪的应用及前景展望

毛琼丽 ，石豪 ，严玲 ，朱艳 ，陈彦和 ，李先芝 ，2

（1.劲牌有限公司，湖北大冶 435112； 2.中药保健食品质量与安全湖北省重点实验室，湖北大冶 435112）

超高效液相色谱仪于2004年由Waters公司最先在匹兹堡会议上发布［1］，它的诞生源于细粒径填料技术的发展，催生了耐高压输液系统、低死体积的压力辅助自动进样器及高速率检测器的出现，实现了新一代液相色谱技术的提高和超越。超高效液相色谱仪基于亚2 μm粒径的硅胶杂化颗粒填料色谱柱的使用，系统耐受压力可以达到140 MPa，柱效高达 100 000～300 000［2］，其分辨率、分离度以及灵敏度均得到大幅提高。超高效液相色谱仪分析速度较高效液相色谱（HPLC）仪提升了5～9倍［1］，流动相消耗量显著减少，均成为超高效液相色谱仪的优点，因此对于复杂样品的分离分析更具优势，极大地拓展了液相色谱的应用范围。目前，超高效液相色谱技术已广泛应用于食品安全、药品质量控制与研发、药物代谢及环境保护等领域［2-6］。

1 超高效液相色谱应用范围

由于超高效液相色谱（UPLC）法与传统高效液相色谱法相比在具备准确、可靠、重复性好等优点的同时，分析速度更快，检测灵敏度更高，并且大大减少了溶剂的消耗量，其应用范围也更广。

1.1 食品安全方面

1.1.1 农药残留检测

农药残留是当今食品安全控制的一大挑战，现代化种植中农作物的种植密度大，易滋生病虫害，为避免病虫害造成的农产品减产，农户在农作物生产过程中常常采用不同种类农药混配的方式［7-8］，这样会造成农产品中农药残留问题。各国政府对农产品中农药残留监管力度不断加强，农药管控范围不断扩大，食品中农药残留限量要求越来越严格［9-11］。传统的农药残留检测方法操作复杂，并且使用大量有害试剂，检测效率低［7］，建立高灵敏度和快捷的农药残留多组分高通量的定性、定量检测技术显得十分关键，超高效液相色谱以其良好的分离效果，在食品中农药检测工作中得到了良好的应用效果。沈慧慧等［12］利用超高效液相色谱-串联质谱法与QuECHERS 前处理方法相结合，建立了阿克苏红枣中29种农药多残留的检测方法，通过添加150 mg无水MgSO4、50 mg PSA和50 mg C18对样品进行净化，显著减少了干扰峰的影响，29种农药的平均回收率为74.6%～109.1%，浓度水平为10～100 μg／kg时，各化合物的精密度为1.6%～14.5%（n=6），29种农药的检出限范围为0.15～3.0 μg／kg。

李曦等［13］选用高灵敏度、高选择性的超高效液相色谱串联质谱法对柑橘中多菌灵等11种保鲜剂的含量进行比较分析，并采取基质匹配标准溶液校正的方法对基质效应进行补偿，该方法简便、灵敏度高，11种保鲜剂的平均回收率为75.1%～110.4%，浓度水平在1.0～10.0 μg／kg时，11种化合物的精密度为0.4%～9.8%（n=6），11种保鲜剂的方法检出限范围为 0.03～0.21 μg／kg。

崔淑华等［14］采用超高效液相色谱-串联质谱法测定蔬菜和水果中腈吡螨酯残留量，得出腈吡螨酯在黄瓜、苹果和洋葱混合基质中的检出限为0.013 μg／kg，定量下限为 0.043 μg／kg，取得了满意结果，在 0.05～2 000 μg／kg范围内，腈吡螨酯的回收率为81.1%～99.3%，测定结果的相对标准偏差为4.7%～9.3%（n=6）。而采用高效液相色谱-二极管阵列检测器（HPLC-DAD）法对腈吡螨酯进行检测时，存在抗干扰能力弱，准确定性差等缺点。

1.1.2 抗生素药物残留检测

除农产品中的农药残留外，近年来在禽畜养殖过程中不合理使用或滥用抗生素等药物的现象越来越严重，导致动物源性食品中残留了大量抗生素类兽药，并随食物链进入人体，在人体内蓄积，部分药物可能使人体产生耐药性，或引起急性、慢性中毒，部分药物还有潜在的致畸、致突变和致癌性，对人类健康造成威胁。兽药残留对食品安全带来的隐患也引起了越来越多的关注，超高效液相色谱仪的应用有效解决了食品中多药物残留分析的杂质干扰大、分离困难等问题，提高了检测效率［15-16］。

陆春胜等［17］以超高效液相色谱-串联质谱仪检测市售猪肉中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼，实验对比了样品提取时氨水的添加量对化合物的影响，该方法采用外标法定量，无需加入内标，节约时间和成本。该方法对三种氯霉素类兽药检测方法进行考察，检出限为0.1～0.5 μg／kg，当加标浓度水平在0.1～5.0 μg／kg时，回收率为90.8%～108.2%，测定结果的相对标准偏差为2.4%～9.8%（n=6）。

陆庆等［18］对蛋及蛋制品中18种磺胺类药物残留建立了超高效液相色谱串联飞行时间质谱的快筛确证方法，该方法建立了18种磺胺类药物的一级精确质量数据库与相应二级谱库，研究通过在不同基质提取液和纯试剂中加标，测定对比目标化合物的离子响应值来考察基质效应，结果发现基质效应不明显，这跟磺胺属于极性较弱的化合物有一定关系。其中磺胺吡啶等18种化合物在7种不同蛋及蛋制品基质中，方法的检出限为2～20 μg／kg，当浓度范围为 200～800 μg／kg时，回收率为68.7%～118.7%，精密度为0.8%～10.8%（n=6）。

1.1.3 食品添加剂检测

食品添加剂不仅作为食品口感、感官的改良剂，还有防腐保鲜的作用，在食品中应用比较广泛。食品添加剂在规定范围和规定用量内使用对人体是安全的，但如果长期、集中、频繁地大量食用含有添加剂的食物，将对健康造成损害［19］，屡屡爆出的食品添加剂隐患往往会让消费者对食品安全环境产生担忧。近年来，市场上出现了越来越多的多成分食用添加剂复合添加的情况，普通的高效液相色谱检测方法的通用性和有限的分离度，造成样品杂质干扰的假阳性现象时有发生，已不能满足市场监管的需要，因此分离度高、快捷、有效的检测手段亟待开发。

曹梅荣等［20］建立了超高效液相色谱法快速测定含乳饮料中12种常见的食品防腐剂、甜味剂和酸味剂的方法，该方法检测指标除包含山梨酸、糖精钠等的常见防腐剂和甜味剂外，还包括对新型酸味剂顺丁烯二酸和富马酸的检测，各化合物的检出限为0.030～0.15 mg／kg，定量限为 0.10～0.50 mg／kg，在1～50 mg／kg范围内回收率为80.2%～99.7%，测定结果的相对标准偏差小于4.7%（n=6）。

刘印平等［21］对饮料进行超声萃取并离心后，上清液直接进入超高效液相色谱-串联质谱仪分析，建立了饮料中22 种痕量添加剂的分析技术，包括尼泊金甲酯等6种防腐剂、阿斯巴甜等5种甜味剂、没食子酸丙酯等5种抗氧化剂和日落黄等6 种着色剂。22种化合物的定量限为0.05～0.4 μg／kg，在加标量为 0.1～2 mg／kg时，回收率为63.3%～107.9%，测定结果的相对标准偏差为7.0%～14.8%（n=6）。该方法为饮料安全监管和质量评定提供了更为简便快速、科学准确的检验方法。

1.1.4 非法添加物检测

2015年10月1日《中华人民共和国食品安全法》正式实施，对食品添加剂的使用范围和限量都进行了严格规定，不仅对食品生产企业生产规范性提出了更高要求，而且对检测分析技术提出了更高挑战，利用高效、可靠的分析检测技术对食品中的非法添加物或有害物质进行限量监测将成为新常态。

王敏娟等［22］以超高效液相色谱串联荧光检测器对辣椒油中罗丹明B进行测定，对比了超声提取法、固相萃取法和凝胶净化法三种前处理方法，方法检出限为0.5 μg／kg，在加标浓度为7.88～31.52 μg／kg时，不同方法提取的罗丹明B回收率为80%～110%，通过比较HLB固相萃取柱对辣椒油的净化效果差，WAX固相萃取柱和GPC凝胶净化法对辣椒油中罗丹明B的净化效果优且回收率高。

宋宁宁等［23］建立了超高效液相色谱-串联质谱法检测凉茶中马来酸氯苯那敏等12种非法添加的化学药物，同时该方法还结合了QuEChERS技术，对样品的提取溶剂、吸附剂使用量、除水剂使用量进行了考察，以标准溶液对质谱多反应监测模式下的各参数进行优化，该方法操作简便、灵敏度高，对凉茶基质净化效果好，可用于凉茶中多种非法添加化学药物的快速筛查和确证。12种非法添加化合物的检出限为0.1～2.1 μg／L，在4～400 μg／L质量浓度范围内，化合物回收率为62.7%～95.2%，测定结果的相对标准偏差为1.3%～10.8%（n=6）。

1.2 保健食品中非法添加物检测

随着大健康时代浪潮的来临，保健食品以其特有的保健功能受到了越来越多消费者的青睐，保健食品市场需求也快速增长，保健食品产业不断壮大，而不法分子利用消费者认知的缺乏以及急于求成的心态，向保健食品中非法添加化学药物甚至违禁药物，夸大宣传、欺骗消费者，导致消费者在不知情的情况下有可能与自身服用的药物相叠加，造成误服或过量，对消费者健康造成危害。目前市售保健食品中，常见的非法添加了化学药物的保健功能有辅助降脂类、辅助降糖类、辅助降压类、抗疲劳、提高免疫力、改善睡眠、改善皮肤、延缓衰老等几大类［24-25］。可以利用超高效液相与其它仪器联用的技术手段，实现对保健食品中非法添加化合物进行高分辨、高通量的快速检测。

胡青等［26］针对保健食品中降糖类28种非法添加化合物，建立了超高效液相色谱-质谱联用检测方法，结果表明二甲双胍等3 种化合物的定量限为500 μg／kg，妥拉磺脲等5种化合物的定量限为250 μg／kg，苯乙双胍等20种化合物的定量限为50 μg／kg。在定量限浓度的1～10倍加标浓度下，28种化合物的回收率为48.6%～134.4%，测定结果的相对标准偏差为0.1%～8.4%（n=6）。该方法提高了非法添加化合物的检测效率。

宫旭等［27］采用超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱仪，Waters BEH Shield RP18色谱柱，以15 mmol／L乙酸铵溶液（含0.1%乙酸）与甲醇进行梯度洗脱，对苯扎贝特、番泻苷A等37种减肥、降脂类非法添加化合物建立了测定条件，所建立的方法专属性强，灵敏度与准确度高，37种化合物的平均回收率范围为87.5%～109.5%，相对标准偏差均小于8%（n=6），方法的检出限为 0.01～5.12 ng／mL，实现了多组分同时、快速定量测定。

程燕等［28］建立了超高效液相色谱法测定功能性饮料和抗疲劳类保健食品中非法添加的11种那非类抗疲劳化学药物，实验表明pH对伐地那非在色谱柱上的保留行为影响较大，可能跟伐地那非的pKa有关，所以将流动相组成定为10 mmol／L乙酸铵溶液（乙酸调pH至3.5）-甲醇。实验还对比了Waters BEH C18色谱柱和Kinetex F5 柱对该11种化合物分离度和柱效的影响，实验结果Waters BEH C18柱的分离效果更好。在加标浓度为10～40 μg／mL范围内，11种化合物回收率为91.8%～104.6%，测定结果的相对标准偏差均小于5%（n=3），检出限为0.3～0.6 μg／mL。该方法的分离效果、分析时长、流动相组成等方面均明显优于目前国家食品药品监督管理局推荐的高效液相色谱标准方法。

1.3 药品质量控制与研发

液相色谱技术在药品的质量把控与研发中扮演了举足轻重的角色，传统HPLC检测通常用时较长，而超高效液相检测技术则可以大大弥补高效液相色谱仪的不足，缩短分析时间，提高分离效率，可以获得更多的药品内在质量信息，广泛应用于药物筛选、研发、质量控制以及药物代谢的研究中。

1.3.1 天然药物检测

天然动植物作为药物的发展历史可以追溯到人类的起源，天然药物成分研究是生命科学研究中的重要领域，超高效液相色谱仪的峰容量、分析效率、灵敏度和分辨率较常规高效液相色谱仪有了很大的提高，能大大缩短样品分析时间，提高了天然药物研究的速度和效率，在中药及其复方制剂的定量分析及指纹图谱中的应用屡见不鲜［29-30］。

刘翔等［31］通过超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术，结合PeakView软件Formula Finder等功能、数据库及二级碎片碎裂规律，在柔毛淫羊藿样品中找到49个化合物，可确认32个化合物结构，并对其中10种黄酮类化合物进行了定量检测，平均回收率为98.4%～104.5%，10种化合物的方法检出限为0.12～0.89 ng／mL，测定结果的相对标准偏差为1.4%～2.9%（n=5）。该方法快速、准确、灵敏度高。

何洁英等［32］采用UPLC法同时测定小儿热速清颗粒中黄芩苷、黄芩素、葛根素、大豆苷、绿原酸及连翘苷6种成分的含量，以ZOR BAX Eclipse Plus C18色谱柱分离，乙腈及0.05%磷酸水为流动相进行梯度洗脱，在0～5 min采用324 nm检测波长，5～9 min采用254 nm检测波长，9～18 min检测波长设定为280 nm对样品进行检测，得到黄芩苷、黄芩素、葛根素、大豆苷、绿原酸及连翘苷平均加样回收率分别为 99.41%、101.56%、98.66%、101.61%、98.64% 及101.71%，6种化合物检出限为0.08～0.20 ng，精密度为0.86%～1.70%（n=9），该方法提高了分析速度，为小儿热速清颗粒质量控制提供了多成分同时检测的高效方法。

黄盼盼等［33］利用超高效液相色谱法建立了绞股蓝皂苷类成分的指纹图谱，以乙腈和水为流动相梯度洗脱，流量为0.2 mL／min，检测波长为203 nm，柱温为30℃，进样体积为2 μL，对绞股蓝皂苷类成分进行分析，标定了9个共有峰。传统高效液相色谱法需要较长的分析时间（70～80 min）才能获得较理想的分离效果，该法分析时间仅需30 min且获得了较理想的分离效果，填补了UPLC建立绞股蓝药材指纹图谱的空白。

1.3.2 化学药物检测

化学合成药物的结构一般为可知物，需要用分辨率高、快速、简便的方法进行组分分析和结构确证，UPLC法是药物进行定量、定性重要的分析手段，特别是与质谱联用已成为物质分析及结构检定的主要方法，为药物的筛选、研发及评价等方面提供了极大的便利［34-39］。

纪宏等［40］利用超高效液相同时测定缬沙坦氢氯噻嗪片中的缬沙坦和氢氯噻嗪含量，该方法利用Phenomenex C18色谱柱分离，流动相以0.1%磷酸溶液-乙腈（95∶5）作为A相，0.1%磷酸溶液-乙腈（5∶95）作为B相进行梯度洗脱，流量为0.25 mL／min，检测波长为272 nm，各成分均能达到基线分离，分离度大于2.0。缬沙坦和氢氯噻嗪的检出限分别为0.06、0.01 ng，方法精密度为0.27%～0.29%（n=6），回收率为97.69%～100.60%，该方法操作简单、快速，结果准确。

章文星等［41］利用UPLC法进行利拉鲁肽原料药含量的测定，以NH4H2PO4与乙腈作为流动相，梯度洗脱，检测波长选择215 nm，并进行了高效液相色谱与UPLC法检测结果的对比，UPLC法检测时间减少了79%，并且UPLC法分离度更好，灵敏度高，速度快，方法的精密度为0.7%（n=6），平均回收率为99.5%。

李秀琴等［42］采用超高效液相色谱-高分辨飞行时间质谱（UPLC-HRTOF／MS）对四环素及其杂质进行定性分析，对四环素标准物质进行了定值以及均匀性和稳定性检验，并对标准值的不确定度进行评估。通过HRTOF／MS鉴定出4个主要杂质，分别是差向四环素、金霉素、差向脱水四环素和脱水四环素。

1.4 药物代谢检测

药物代谢主要研究药物在人体内代谢过程中发生的变化，药物代谢稳定性是药物的一个重要参数，可以为药物设计、合理用药提供实验和理论基础［43］。由于药物体内代谢产物以及机制复杂，高通量、高分辨的检测技术尤为重要，因此在药物代谢研究中常常以超高效液相色谱仪与其它仪器的联用技术进行药物分析。

潘志峰等［44］采用固相萃取-超高效液相串联质谱技术，以Oasis HLB固相萃取法进行供试品溶液制备，用0.1%甲酸水溶液与甲醇为流动相梯度洗脱，采取电喷雾离子源正负离子（ESI+／ESI-）切换的模式，建立了同时检测血清中6大族类18种抗生素浓度的方法并对其进行方法学评价。四环素等18种抗生素的平均回收率范围在98.91%～121.03%内，精密度为4.67%～13.16%（n=5），为监测血液样本中抗生素水平提供了灵敏稳定的测试方法。

张宏等［45］用UPLC-Q-TOF技术研究防风乌梅药对配伍后在健康大鼠血清中的化学变化，将含药血清样品以固相萃取小柱进行萃取，在0.1%甲酸溶液-乙腈流动相条件进行色谱分离，所采集的质谱数据通过PlantMedica检索、ChemSPIDE检索、MASSUNION检索，导入SIMCA-P11.5 进行主成分分析，结果表明防风乌梅药对入血成分有3种，均来自于防风，其中两种为升麻素和汉黄芩素。

1.5 环境监测

环境中的污染物最终都有可能沿着食物链传递、累积到达人体，对人体健康造成危害，因此我们需要建立环境介质中的危害物质监测体系，规范环境监测方法。由于超高效液相的高分离度、高灵敏度能力，可以实现对环境危害物质进行高通量快速筛查、定量检测的目的，为环境安全进行监测、预警和执法提供技术支持［46］。

陈溪等［47］对水样分别在酸性及碱性条件下提取、净化，采用超高效液相色谱-三重四极杆／静电场轨道阱高分辨质谱法法，建立了水中112种药品和个人护理用品类污染物（PPCPs）的快速筛查及定量分析方法，该方法采用高分辨质谱的Full MS／dd-MS2模式进行质谱数据采集，使得各化合物分辨率和分离度良好。在添加水平为0.2 μg／L时，平均回收率范围为60.7%～129.5%，测定结果的相对标准偏差为1.4%～17.8%（n=6）；在添加水平为0.4 μg／L时，平均回收率为60.1%～122.6%，RSD为1.3%～15.8%（n=6）；在添加水平为0.8 μg／L时的平均回收率范围为63.1%～120.1%，RSD为1.1%～10.7%（n=6）。

王军淋等［48］采用正负离子同时监测的模式，选择合适的固相萃取方法对水中40种不同类别的抗生素进行富集、净化，使用ACQUITY UPLCTM T3 色谱柱（150 mm ×2.1 mm，1.8 μm）及相应的流动相使磺胺类、β-类酰胺类、四环素类、氯霉素类40种抗生素达到基本分离，建立了超高效液相色谱-串联质谱分析法，并以超高效液相色谱-三重四级杆飞行时间质谱对方法进行确认，40种抗生素的检出限为1～5 ng／L，在 10～100 ng／L加标浓度下回收率在40.28%～120.50%范围内，RSD为1.25%～13.22%（n=6）。

2 联用技术

2.1 前端联用

超高效液相分离技术的应用大部分集中在多成分、低含量的研究领域，对于大部分的痕量分析甚至超痕量分析，通常需要对样品进行富集和净化，以期达到检测器的检测限度。因此固相微萃取技术与超高效液相技术的联用成为了低含量成分检测的优选方案。QuEChERS前处理方案近年来常常被在农残、兽残、非法添加中使用，它是美国人Anastassiades等2003年开发的一种预处理方法，具有快速、简便、廉价、高效、可靠的特性，目前该方法已经在国内痕量分析中推广［49］。在这种前处理方式下以普通色谱进行检测的回收率及重现性差，通过超高效液相与质谱进行联用可以有效改善基质对实验结果的干扰，提高回收率［50］。

郑佳等［51］通过对样品前处理方法的优化及UPLC-MS／MS条件的选择，建立了同时检测保健食品中红地那非、阿普唑仑等21种非法添加化学药物的方法，样品口服液、保健酒分别用乙腈和乙腈-水-甲酸按一定比例混合后振荡提取，以QuEChERS法进行净化，21种化学药物在1～100 μg／L范围内线性关系良好，相关系数r2≥ 0.992，检出限为 0.07～3.41 μg／kg，定量限为0.22～11.36 μg／kg，在 10～100 μg／kg加标浓度下，保健品口服液和保健酒中的平均回收率范围为61.4%～116.5%。

王建宇等［52］采用在线固相萃取联用超高效液相色谱法，以Waters OA系统的Online SPE模式自动进行水样前处理，建立了分析水体中15种多环芳烃的快速分析方法，方法检出限为0.4～1.5 ng／L，精密度小于6.4%（n=5），回收率为74%～106%，其中15种多环芳烃在地下水的加标回收率大于热矿水，该方法具有自动运行、低成本、重现性好、过程可控等特点。陆亮［53］以简单方便的操作及高效富集能力的在线固相萃取技术可使水样富集倍数达到500～1 500倍，以超高效液相色谱串联质谱系统对水中双酚A进行定性、定量分析，检测时间短、效率高，平均加标回收率达到81.1%～103%，相对标准偏差为5.4%～9.3%（n=6），检出限为1.97 ng／L。

2.2 后端联用

2.2.1 与质谱的联用

超高效液相色谱与质谱技术的联用，是最为广泛的仪器联用分析应用技术之一，它适应了复杂体系的分析需求，发挥了超高效液相色谱高效、快速的分离效能，有效降低了杂质成分对于目标化合物的竞争性电离抑制，且由于其运行流速低，减小了色谱峰的扩散，提高了峰容量，更有利于提高质谱电离源对物质的电离效率［54］。同时由于质谱的专一性强、高分辨率、高灵敏度和高通量的特点，对复杂化合物的解析能力更强。对于某些标准品获取困难、缺乏、价格昂贵的复杂样品进行分析时，传统的检测手段研究深入性不够，超高效液相与质谱联用的技术逐渐成为分析微量、痕量禁限用成分的首选方法，并可以发挥优势互补的高检测效率，实现高通量大规模的研究方案［55-57］。

宋伟等［58］采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱建立了喹诺酮等39种兽药残留的快速检测方法，实验结合石墨化多壁碳纳米管对样品提取液进行净化，以保留时间、一级母离子精确质量数、同位素丰度比及二级质谱特征碎片图谱作为各指标的检索标准，可有效避免假阳性结果的出现。

章豪等［59］采用超高效液相色谱串联质谱法对蜂产品中10种头孢类药物，采用了固相萃取小柱对蜂蜜、蜂王浆及蜂王浆冻干粉进行预处理，对10种头孢类药物进行检测，10种头孢类物质的检出限为0.15～1.5 μg／kg，回收率为 75%～89.0%，测定结果的相对标准偏差为0.15～1.5 μg／kg（n=5）。刘东升等［60］利用超高效液相-三重四级杆质谱建立了健脾丸中的展青霉素含量检测的方法，检出限达到0.010 1 μg／mL，回收率为87.52%～92.09%，精密度为2.20%（n=6），结果表明该方法具有灵敏度高、快速、准确、专属性强的特点。

杨惠成等［61］采用空白基质配制标准曲线能有效减少基质效应对目标化合物质谱信号的影响，开发出超高效液相色谱-串联质谱法同时测定保健食品中绿原酸、没食子酸等14 种功效成分的检测方法，方法检出限均小于100 μg／kg，加标回收率在83.42%～108.44%范围内，测定结果的相对标准偏差为0.76%～4.35%（n=6），该方法灵敏度高、准确性好，可用于保健食品中多种功效成分的快速测定。

李云飞等［62］以一种高灵敏度、高分辨率联用技术——超高效液相色谱-四极杆／静电场轨道阱高分辨质谱联用，建立了食品中甜蜜素等6种添加剂的检测技术，选择对极性较强化合物保留较好的AccucoreaQ色谱柱，改善了甜蜜素、安赛蜜分离情况，甜蜜素、糖精钠、安赛蜜、三氯蔗糖、阿斯巴甜、纽甜的检出限为 10～50 μg／kg，回收率为73.6%～108.7%，相对标准偏差为1.7%～3.7%（n=6），该方法前处理简单，同时简便快速、灵敏度高、准确性好。

由于质谱的特殊性质，一些离子对试剂等含盐量大的流动相无法直接与质谱相连进行分析，因此有研究者采用二维超高效液相色谱与质谱进行联用，通过二维色谱对一维色谱分离得到的化合物进行脱盐处理，然后再对分离后化合物进行质谱分析。陈红等［63］利用二维超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术对氯化琥珀胆碱原料药中的杂质成分进行了定性，将样品中目标杂质切入二维色谱后再进入质谱检测，避免了一维色谱的离子对试剂进入质谱，分别从氯化琥珀胆碱原料药中分离出氯化琥珀酰单胆碱、脱氢氯化琥珀酰单胆碱两种杂质。

2.2.2 其它联用技术

作为高效液相色谱仪的升级产品，超高效液相色谱的分离原理与传统高效液相色谱仪一致，但在硬件配置上更高效、更耐压，而且需要与其匹配的检测器检测速率更高。超高效液相色谱仪除与质谱仪联用外，有不少研究工作者还利用二极管阵列等常用检测器与其联用进行研究。

蒋孟圆等［64］利用超高效液相色谱仪与二极管阵列检测器联用，利用二极管阵列检测器提供的光谱扫描图和保留时间，对待测样品中糖精钠等5种甜味剂进行双重定性鉴别，在一定程度上克服了单纯以保留时间定性带来的假阳性，提高了样品定性的准确度，通过优化，糖精钠等5种甜味剂的检出限达到了0.050～5.9 μg／kg，回收率为93.06%～108.78%，精密度为0.10%～1.05%（n=7）。

仲伶俐等［65］采用超高效液相色谱－荧光检测（UPLC－FLD）法，结合QuEChERS净化技术，对水果中萘衍生物1-萘乙酰胺、1-萘乙酸和2-萘氧乙酸建立了检测方法，在激发波长Ex为280 nm，发射波长Em为330 nm下进行测定，用ACQUITY UPLC BEH phenyl 色谱柱，以0.1%甲酸-乙腈为流动相，流量为0.5 mL／min，等度洗脱，3种萘衍生物得到了良好的分离，在水果中的添加回收率为78.3%～95.3%，相对标准偏差为2.8%～9.5%（n=6），1-萘乙酰胺等三种萘衍生物的检出限均不大于0.003 mg／kg。该方法前处理操作简单、快速，选择性和灵敏度均优于HPLC-UV法。

3 结语与展望

由于超高效液相色谱仪有着分辨率高、分离效能高、溶剂消耗量低、分析时间短等较为突出的优点，在食品、保健品、药品、环境等安全体系的建设中已成为一种重要的分析工具。随着时代的发展，运用两台或两台以上的仪器进行联用的技术在分析领域已成为新的发展趋势，超高效液相色谱仪以其独特的优势将更易于与其它分析技术构成联用系统，在复杂化合物的分析工作中发挥更大的作用，未来其应用领域将得到进一步扩展，尤其在食品、保健品、药品及环境方面的分析工作中将发挥主导作用，为质量标准体系及安全管理体系工作的进一步深化奠定坚实的基础，为进一步的风险评估和政策制定提供可靠的科学依据。