血清AKR1B10和甲胎蛋白联合检测对肝细胞癌诊断的意义

王 月 许炜璐△ 柴晓哲

1.苏州第五人民医院感染科 (江苏 苏州， 215000) 2.苏州第五人民医院消化科

原发性肝癌是对人类健康构成严重威胁的疾病之一,是一种致命的恶性肿瘤,发病率和病死率约占世界的50%[1]。在中国男性人群中位居第2位。女性人群中位居第3位。从病理上讲，最常见的分型是肝细胞癌(HCC)。HCC通常发病隐匿，初期缺乏特异性临床表现，进展迅速，多数患者至疾病晚期因各类并发症就诊，失去了早期治疗机会，预后极差[2]。早期诊断对HCC患者治疗及预后有重大影响。甲胎蛋白(AFP)通常被认为是筛查HCC的血清学标志物，由于其较低的特异性和敏感性，漏诊率及误诊率仍较高。醛酮还原酶1家族B10成员(AKR1B10)是醛酮还原酶超家族的一员，近年来发现其在原发性肝癌表达中明显上升[3]。本研究旨在探讨血清AKR1B10和AFP联合检测在HCC诊断中意义。

1 资料与方法

1.1 研究对象 2015年3月至2018年6月苏州市第五人民医院收治160例HCC患者、160例肝硬化患者、120例慢性乙型肝炎患者、53例自身免疫性肝病患者，69例药物性肝损害患者，从门诊部选取同期健康体检者120例，作为健康对照组。各组患者及健康体检者的年龄和性别差异无统计学意义(P<0.05)。本研究方案经由苏州市第五人民医院委员会审批。所有参与者均签署纸质知情同意书。

1.2 诊断标准 HCC的诊断：先完善影像学检查；对于非典型影像学特征的占位性病变，参照AASLD指南，行肝脏穿刺取组织病理证实[4]。根据巴塞罗那临床肝癌分期系统(BCLC)，将HCC患者分为5期[5]。其中0(最早期)和A(早期)被定义为早期HCC，共76例。肝硬化的诊断：参照科技部重大专项课题指南[6]，以肝脏活组织检查作为金标准(弥漫性肝纤维化伴假小叶形成)。慢性乙型肝炎的诊断：参照慢性乙型肝炎防治指南(2018年更新版)[7]，乙型肝炎表面抗原和/或病毒DNA阳性6个月以上，且DNA拷贝数>103。自身免疫性肝炎的诊断：参照2015年中华医学会肝病学分会指南[8]。

健康对照人群需符合以下条件：①肝脏生化相关指标无异常；②既往无肝病病史；③无其他系统性疾病或恶性肿瘤。

1.3 实验室检测 所有患者治疗前和健康参与者晨起空腹收集静脉血。血生化检查采用Hitachi 7600 Auto-Analyzer。血清AFP 采用酶联免疫吸附分析方法测定(Abbott公司)。血清AKR1B10水平采用商业化ELISA试剂盒检测(编号CSB-EL001540HU；CUSABIO公司)。

2 结果

2.1 纳入患者及健康人群的一般资料 见表1。各组间的年龄、性别差异无统计学意义。HCC组患者的血清AFP和AKR1B10水平均明显高于其他人群，差异有统计学意义(P<0.01)。

表1 纳入患者及健康人群的一般资料比较

2.2.1 诊断HCC 如图1A所示，用ROC曲线对AFP(cut-off值取20 ng/ml，下同)和AKR1B10(基于约登指数，cut-off值选定903.0 pg/ml，下同)及预测概率进行诊断价值分析。单项检测时，AKR1B10诊断的AUC为0.891，95%CI0.862～0.920，同时其敏感性为93.8%，特异性为80.5%；AFP诊断的AUC为0.867，95%CI0.826～0.907，其敏感性为81.3%，特异性为90.6%。而两项指标联合检测的AUC为0.926，95%CI0.903～0.950，其敏感性为80.0%，特异性为92.5%。

图1 以AFP 和AKR1B10绘制诊断肝癌和早期肝癌的ROC 曲线A：肝癌组 B：早期肝癌组

2.2.2 诊断早期HCC 如图1B所示，单项检测时，AKR1B10诊断的AUC为0.893，95%CI0.854～0.933]，其敏感性为93.8%，特异性为81.0%；AFP诊断的AUC为0.851，95%CI0.791～0.911，其敏感性为80.2%，特异性为90.6%；而两项指标联合检测的AUC为0.916，95%CI0.880～0.952，敏感性为77.8%，特异性为92.5%。

3 讨论

我国作为一个肝炎大国，是肝癌高发地区，其发病数及死亡数约占全球的一半[2]。肝癌早期症状隐匿，诊断时多为中晚期，甚至出现远处转移，患者预后一般较差。因此，对于临床医生而言，HCC的早期诊断是临床工作的重点和难点。

肝穿刺活检虽然是金标准，但作为有创检查，操作中会给患者带来一定的风险，包括出血及感染等，同时也不利于动态观察。目前临床上，诊断HCC常用方法，主要由影像学检查，包括超声和CT，同时检测血清AFP来实现[4]。AFP虽然被广泛应用于HCC的诊断与评估预后中，但仍有1/3的HCC患者血清AFP并无显著升高，另外肝硬化等良性肝病患者的血清AFP也呈现不同程度的升高，因此单独AFP检测来判断HCC的敏感性、特异性无法令人满意[9]。

作为一种分泌蛋白，已有文献报道通过ELISA法检测人体血清中的AKR1B10水平[10]，但目前探讨血清AKR1B10水平与HCC的研究较少。AKR1B10通过清除羰基化合物，抑制细胞分化，从而促进肿瘤细胞增殖[11-13]。本研究中，我们发现HCC组患者血清AKR1B10的水平明显高于肝硬化、慢性乙型肝炎、自身免疫性肝病、药物性肝损伤及健康对照组。同时，判断HCC及早期HCC患者，AKR1B10的准确性和特异性也不逊于AFP。单独一项血清肿瘤标志物检测的准确性往往不能令人满意。本研究应用二分类变量Logistic回归模型，通过拟合最佳回归曲线，评估血清中AFP和AKR1B10联合检测对诊断HCC的意义。结果发现，联合检测在识别HCC或早期HCC中，明显优于单项指标检测。因此，血清AFP和AKR1B10联合检测有助于提高HCC诊断准确性，对HCC一级/二级预防工作有着重要的临床意义。

本研究作为一项单中心回顾性病例对照研究，样本量较小，需多中心前瞻性队列研究验证AKR1B10的临床价值，以确定AFP和AKR1B10联合检测在HCC诊治中的临床意义。