ICP-MS 法测定红花注射液中8 种元素的含量*

★ 彭文明 易徐航 张伦宁（萍乡市食品药品检验所 江西 萍乡 337000）

近年来，中药注射剂的安全性越来越受到关注，特别是重金属与有害元素的残留问题。要建立中药中重金属元素与有害元素的限量控制标准，首先要建立较为先进的各元素标准检测方法。目前重金属与有害元素残留测定方法主要有原子吸收法（AAS）、原子荧光法（AFS）、电感耦合等离子体发射光谱法（ICP-OES）、电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）等，其中ICP-MS 以其灵敏度高、专属性强，且一次能分析数十种元素而得到广泛应用［1-2］。电感耦合等离子体质谱（inductively coupled plasma mass spectrometry，ICP-MS）是一种新型的元素和同位素分析技术，具有检出限低、动态线性范围宽、干扰少、分析精密度高和分析速度快等优点，可同时完成多元素的测定，具有极高的检测效率，是痕量、超痕量元素分析领域中最先进的方法［3-4］。目前，《中国药典》（2015 年版第四部）对中药注射剂中铅、镉、砷、汞、铜制定了限度标准，但其他元素还没有法定限度标准。中药注射剂中重金属与有害元素污染来源很复杂，对重金属与有害元素超标的原因及对策的研究势在必行。为

评价红花注射剂中各元素情况，通过查阅文献，本文采用微波消解法对样品进行前处理，同时采用ICP-MS 法测定红花注射液中铬（52Cr）、铜（63Cu）、锌（66Zn）、钼（98Mo）、铅（208Pb）、钡（138Ba）、硼（11B）、铝（27Al）8 种元素的含量，以期为红花注射液的质量控制和临床用药安全提供科学依据。

1 仪器与试药

NexION350X 电感耦合等离子体质谱仪（PerkinElmer 股份有限公司），MARS6 微波消解仪(美国CEM 公司)。硝酸为优级纯（北京化学试剂厂），ME-204（万分之一天平，梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司），电子分析天平CP225D（十万分之一，赛多利斯科学仪器(北京)有限公司），酸度计（赛多利斯科学仪器(北京)有限公司）。铬（52Cr）、铜（63Cu）、锌（66Zn）、钼（98Mo）、铅（208Pb）、钡（138Ba）、硼（11B）、铝（27Al）、锗（74Ge）、铟（115In）、铋（209Bi）购于国家有色金属及电子材料；甲醇、乙腈（HPLC 级，购于北京百灵威科技有限公司）；其他试剂均为分析纯；水为I 级水。

2 方法与结果

2.1 ICP-MS 工作条件射频功率为1 400 kW，等离子体气：15.0 L/min；辅助气：0.25 L/min；载气：0.80 L/min；扫描方式为Full Quant，积分时间为100 ms，采集次数为3 次。

2.2 溶液的制备

2.2.1 供试品溶液的制备取待测样品2.0 mL 置微波消解罐中，加5 %硝酸3 mL，双氧水0.5 mL，按操作规程安装好装置，180 ℃、20 min 进行消解，消解结束后，缓缓放气，取出内罐，置加热板上，120 ℃加热约10 min，放冷，溶液转移置25 mL 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，同法制备试剂空白。

2.2.2 对照溶液的制备取11B、63Cu、66Zn、138Ba元素的单元素标准溶液（均为1 000 mg/L），用5 %硝酸稀释成11B、63Cu、66Zn、138Ba 分别为10、50、100、250、500 ng/mL 系列对照溶液；52Cr、208Pb 分别为1、5、10、25、50 ng/mL 系列对照溶液；98Mo为0.1、0.5、1、2.5、5 ng/mL 系列对照溶液；27Al为100、500、1 000、2 500、5 000 ng/mL 系列对照溶液。

2.2.3 内标溶液的制备取74Ge、115In、209Bi 单元素标准溶液（均为1 000 mg/L），用5 %硝酸溶液制成浓度为74Ge、115In、209Bi（均为50 ng/mL）的混合溶液作为内标溶液。

2.3 线性关系考察取“2.2.2”项下系列对照溶液，按“2.1”项下条件进行测定，仪器的内标进样管在仪器分析工作过程中始终插入混合内标溶液中，依次将各个浓度的混合标准溶液进行测定,得出各元素线性回归方程，见表1。

表1 8种元素线性范围及相关系数

2.4 回收试验精密吸取已知含量亚宝药业180911批号的红花注射液2 mL 置微波消解罐中，共9 份，分 别 精 密 加 入11B、63Cu、66Zn、138Ba 250 ng/mL；52Cr、208Pb 25 ng/mL；27Al 2 500 ng/mL、98Mo 2.5 ng/mL的混合标准溶液各1 mL（27Al 2 680.6 ng/mL、11B 231.5 ng/mL、138Ba 153.9 ng/mL、52Cr 2 041.89 ng/mL、63Cu 60.53 ng/mL、98Mo 1.11 ng/mL、208Pb 13.50 ng/mL、66Zn 249.79 ng/mL），按“2.2.1”项下步骤操作，按“2.1”项下条件进行测定，计算各元素的回收率及RSD 值，结果见表2。

表2 回收率试验结果（n=9）

2.5 精密度试验分别精密吸取11B、63Cu、66Zn、138Ba 250 ng/mL；52Cr、208Pb 25 ng/mL；27Al 2 500 ng/mL、98Mo 2.5 ng/mL 的混合对照溶液，摇匀。分别于1 d 内和5d 内用ICP-MS 测定，代入标准曲线计算，其RSD值均<5 %，说明此方法精密度较好。

2.6 重复性试验精密吸取亚宝药业180911 批号的红花注射液2mL 置微波消解罐中（共6 份），按“2.2.1”项下步骤制备供试品溶液，按“2.1”项下条件，用标准曲线法测定上述8 种元素，样品中所含铬（52Cr）、铜（63Cu）、锌（66Zn）、钼（98Mo）、铅（208Pb）、钡（138Ba）、硼（11B）、铝（27Al）含量见表3。

表3 重复性试验结果

2.7 方法检出限取试剂空白连续测定20 次，所得的标准偏差的3 倍对应的浓度，计算铬（52Cr）、铜（63Cu）、锌（66Zn）、钼（98Mo）、铅（208Pb）、钡（138Ba）、硼（11B）、铝（27Al）各元素的检出限，依次为0.016、2.265、0.333、0.794、0.635、0.056、5.548、15.039 ng/mL。

2.8 样品的测定精密量取红花注射液2 mL，按“2.2.1”项下步骤制备供试品溶液，按“2.1”项下条件，用标准曲线法测定上述8 种元素，样品中所含铬（52Cr）、铜（63Cu）、锌（66Zn）、钼（98Mo）、铅（208Pb）、钡（138Ba）、硼（11B）、铝（27Al）含量见表4。

表4 红花注射液中8种元素测定结果

3 小结

微波消解技术具有溶样快速和处理彻底等优点，其结合电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）测定重金属元素日益得到广泛应用［5-6］，故本文采用微波消解法对样品进行前处理，电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）测定，可有效去除基质干扰，结果准确，重现性好。本文比较了外标法和内标法2种测定方法，结果显示内标法具有更高的精密度和准确性。内标元素选择的原则主要包括：电离电位、质量数、沸点相近。综合考虑，最终采用74Ge、115In、4Bi 为内标元素进行校正。目前国内外对注射液的重金属及有害元素限量规定较少，而国际上对中药制剂仅规定的为口服剂型的限量要求，对中药注射剂并无明确规定［7］。本实验采用ICP-MS 法，建立了红花注射液中8 种元素的测定法，操作简便快速，结果准确可靠，为中药注射剂的质量评价提供了新的思路。