sRAGE、BMP-15在多囊卵巢综合征患者血清和卵泡液中表达及与炎症反应和胰岛素抵抗关系

王德刚 刘 芳 刘 蓉

湖北省利川市人民医院(445400)

多囊卵巢综合征(PCOS)以生殖功能障碍、内分泌和糖脂代谢紊乱为特征的临床综合征，临床发病率为15%～20%[1]，随着病情进展可诱发心脑血管疾病、2型糖尿病、子宫内膜癌等不良后果[2-3]。胰岛素抵抗、慢性炎症反应在PCOS发病和进展中发挥重要作用。可溶性糖基化终产物受体(sRAGE)可与晚期糖基化终产物竞争性结合配体，阻止糖尿病胰岛素抵抗和动脉粥样硬化进展[4]。骨形态发生蛋白-15(BMP-15)是转化生长因子β家族成员，在卵母细胞有丰富表达，在早期卵泡生长发育、维持卵泡生殖和内分泌功能等具有重要作用[5]。本研究探讨PCOS患者血清、卵泡液中sRAGE、BMP-15表达特点，分析其与PCOS炎症反应和胰岛素抵抗的相关性。

1 资料与方法

1.1 临床资料

纳入标准：①符合PCOS诊断标准[6]；②年龄18～39岁；③自愿参加本研究均签署同意书。排除标准：①合并其它内分泌紊乱性疾病；②合并急慢性感染、严重心、肾、肺等器官功能障碍；③近期服用激素类药物治疗。选择2018年2月—2019年6月本院收治的PCOS患者为PCOS组，同期本院体检正常育龄女性为对照组。本研究获得本院伦理委员会批准。

1.2 检测方法及观察指标

分别于月经第2～4d取空腹静脉血抗凝，离心取上清， -80℃保存待检；于取卵日阴道超声引导下经阴道穿刺抽吸卵泡液，收集卵泡直径>15 mm、淡黄色、无血、近透明的卵泡液，离心取上清，-80℃保存待检。采用酶联免疫吸附试验检测血清、卵泡液中sRAGE、BMP-15水平，试剂盒购自Chemikine公司。①炎性反应指标：酶联免疫吸附法检测白介素-6(IL-6)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、降钙素原(PCT)、白介素-10(IL-10)水平(意大利BIOBASE2000全自动酶免分析仪)。② 胰岛素抵抗指标：葡萄糖氧化酶已糖激酶法检测空腹血糖(FPG)，放射免疫时间分辨免疫分析法测定空腹胰岛素(FINS)，试剂盒购自上海酶联生物华美工程公司，根据FPG、FINS计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)= FPG×FINS/22.5。

1.3 统计学分析

2 结果

2.1 一般情况

PCOS组92例，年龄(32.2±4.4)岁(26～42岁)，病程(5.3±3.1)年(2～10年)，体质指数(BMI)(25.1±2.0)kg/m2(23.1～28.2 kg/m2)；对照组100例，月经周期规律、性激素水平正常，无卵巢多囊性病变，年龄(32.0±4.2)岁(24～39岁)，BMI(26.1±2.0)kg/m2(23.5～29.2 kg/m2)。两组年龄、BMI比较无差异(P>0.05)。

2.2 血清、卵泡液中sRAGE、BMP-15水平

PCOS组血清、卵泡液中sRAGE高于对照组，BMP-15低于对照组(P<0.05)，见表1。PCOS组sRAGE、BMP-15水平血清低于卵泡液(t=7.659、5.124，P<0.05)。

表1 两组血清、卵泡液检测指标水平比较

2.3 血清IL-6、hs-CRP、PCT、IL-10水平

PCOS组血清IL-6、hs-CRP、PCT、IL-10水平均高于对照组(P<0.05)，见表2。

表2 两组血清炎症因子水平比较

2.4 血糖水平及胰岛素抵抗指数比较

PCOS组PFG(8.15±3.62 mmol/L)、FINS(11.05±3.03 U/ml)、HOMA-IR(12.15±4.02)水平均高于对照组(3.07±3.45 mmol/L、6.15±3.91 U/ml、4.30±1.04)(t=6.351、7.591、12.256， 均P=0.000)。

2.5 血清、卵泡液sRAGE、BMP-15与炎性因子、胰岛素抵抗相关性

血清、卵泡液中 sRAGE均与IL-6、hs-CRP、PCT、IL-10、PFG、FINS、HOMA-IR呈正相关(P<0.05), BMP-15均与IL-6、hs-CRP、PCT、IL-10、PFG、FINS、HOMA-IR呈负相关(P<0.05)。IL-6、hs-CRP、PCT、IL-10与HOMA-IR呈正相关(r=0.315、0.402、0.375、0.393，P<0.05)，与PFG、FINS 无明显相关性(r=0.123、0.105、0.168、0.036；0.157、0.142、0.138、0.152，P>0.05)；sRAGE与BMP-15呈负相关(r=-0.403，P<0.05)。见表3。

表3 血清、卵泡液sRAGE、BMP-15与炎性因子、胰岛素抵抗相关性(r)

aP<0.05

3 讨论

PCOS是生殖系统内分泌、代谢异常综合征，研究发现胰岛素抵抗是PCOS发病的始动因素，胰岛素抵抗是糖脂代谢紊乱、2型糖尿病和心血管疾病的主要病因[7]。本研究PCOS组PFG、FINS、HOMA-IR水平高于对照组，说明PCOS存在糖代谢紊乱、胰岛素功能下降和抵抗现象。胰岛素抵抗是引起PCOS代偿性高胰岛素血症和高雄激素血症的病理生理改变基础，高胰岛素血症和高雄激素血症可引起卵泡发育障碍，导致不孕。炎性反应是PCOS胰岛素抵抗的始动因素，胰岛素抵抗作为一种慢性低度炎性反应，炎性因子在其形成和进展中发挥重要作用。梁燕[8]观察了PCOS患者血清TNF-α、CRP 、IL-6、IL-17水平较正常女性明显升高，且与血糖、血脂水平相关，提示炎性反应是PCOS患者糖脂代谢异常的关键因素。本研究PCOS患者血清IL-6、hs-CRP、PCT、IL-10水平均高于对照组，验证了PCOS患者存在慢性炎症反应；相关性分析，IL-6、hs-CRP、PCT、IL-10均与HOMA-IR呈正相关，证实炎性反应水平与PCOS胰岛素抵抗程度存在关系。

Sragek 可参与炎症反应、动脉粥样硬化、肿瘤等多种疾病[9]。Diamanti等[10]研究发现:PCOS患者血清sRAGE显著升高，且高于健康女性；Norata研究[11]同样发现sRAGE在慢性炎症期川崎病患者明显升高。本研究PCOS组患者血清、卵泡液中sRAGE水平均明显升高，分析原因与卵泡液高水平sRAGE可刺激卵泡产生大量炎性细胞因子，促使sRAGE分泌；血清中含量低于卵泡液，说明sRAGE主要来源于卵泡细胞；血清、卵泡液sRAGE水平均与IL-6、hs-CRP、PCT、IL-10、PFG、FINS、HOMA-IR呈正相关，提示sRAGE可能与PCOS炎性反应和胰岛素抵抗有关，但sRAGE在PCOS胰岛素抵抗机制中发挥何种作用尚不清楚，推测可能通过介导和扩大炎性反应促使胰岛素的抵抗进程。

BMP-15对卵子发生、发育、卵泡内环境稳定和生殖功能维持具有重要作用[12-13]。相关研究显示窦前卵泡及窦状卵泡早期可检测到BMP-15高水平表达，窦状卵泡晚期BMP-15表达水平明显降低[14]。BMP-15异常与卵巢早衰、卵巢功能缺陷、PCOS等均存在密切关系[15]。本研究PCOS组血清BMP-15水平低于对照组，提示PCOS患者卵巢功能明显降低；血清BMP-15水平低于卵泡液，说明卵泡BMP-15表达异常导致在血清中下降，通过检测血清BMP-15水平可反映PCOS患者卵巢功能；血清、卵泡液中BMP-15水平与IL-6、hs-CRP、PCT、IL-10、PFG、FINS、HOMA-IR、sRAGE呈负相关，提示BMP-15异常可能与PCOS炎性反应和胰岛素抵抗存在反馈抑制机制，但具体机制尚不清楚，可能是BMP-15表达缺失导致卵泡母细胞发育异常，sRAGE反馈性分泌增多诱导炎性因子释放，参与了胰岛素抵抗过程。

综上，PCOS患者血清、卵泡液中sRAGE水平升高，BMP-15水平降低，二者与PCOS患者胰岛素抵抗和炎性反应存在一定关系，临床可监测PCOS患者的血清、卵巢液中sRAGE、BMP-15水平，以评估PCOS病情程度。