Let-7a调控自身免疫性甲状腺炎发生发展及其机制研究

王 丽，张 静，张洪宇，于 婧，曾 薇，骆海涛，何 宁，张优明

（1.齐齐哈尔市中医医院检验科，黑龙江 齐齐哈尔 161005；2.齐齐哈尔和平医院检验科，黑龙江 齐齐哈尔 161005）

近些年来，随着生活节奏的加快和饮食结构的改变，自身免疫性甲状腺炎在人群中的发病率逐年在增加。自身免疫性甲状腺炎又称桥本甲状腺炎或称慢性淋巴细胞性甲状腺炎，是一种具有明显遗传倾向的器官特异性自身免疫性疾病，其发病率约为0.3～1.5/1000人/年，约占甲状腺疾病的20%左右[1]。自身免疫性甲状腺炎多发于30～50岁女性。患者大多有甲状腺肿，半数甲状腺功能正常，约1/4有甲亢，甲减仅占1/7。这种疾病若得不到及时有效的治疗，则会引发甲亢危象及甲亢性心脏病等并发症，从而威胁到患者的生命安全。因此本研究选取2018年8月～2019年8月期间我收治的的100例患有自身免疫性甲状腺炎（AITD）的患者作为研究对象，从而探讨Let-7a调控自身免疫性甲状腺炎发生发展及其机制，具体报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019年4月～2019年8月期间我收治的的100例患有自身免疫性甲状腺炎（AITD）的患者作为研究对象，收集齐清晨空腹静脉血，并将其设为实验组；收集同一时期在我院进行体检的100名人员的空腹静脉血样本，并将其设为对照组。

1.2 方法

本研究采取的方法如下：①收集临床血清：用不含抗凝剂的普通采血管（红帽）收集患者的外周静脉血（一般为5 ml），然后提取血清；②构建自身免疫性甲状腺炎大鼠模型：将60只SPF级SD雌性大鼠适应性喂养1周后开始造模，并随机分为正常对照组和自身免疫性甲状腺炎大鼠模型组，每组各30只；其中模型组按照体重给予高碘水（500 g/L），对照组给予蒸馏水，8周后收集两组大鼠血清样本进行qRT-PCR实验；③RNA的提取和转录：利用TRIzol、二甲基亚砜（DMSO）、异丙醇及无水乙醇等有机试剂进行RNA的提取；④Real time qPCR反应→TUNEL染色→细胞转染→流式细胞术→Western blot实验。

1.3 统计分析

所有数据均采用Graph Pad Prism 5软件进行统计学分析，计数资料应用数值和百分数表示，计量资料数据用±s表示，采用两组独立样本的t检验，概率值P＜0.05表示差异有显著性统计学意义。

2 前期结果

在前期实验中，通过收集10例正常人和10例自身免疫性甲状腺炎患者的血清样本来检测miRNAs的表达情况，qRT-PCR结果显示，①let-7a、miR-125、miR-1792在实验组患者的血清中明显升高，而miR-142和miR-155在实验组患者血清中没有明显的变化；②与治疗前相比，治疗过程中let-7a、miR-125、miR-1792在实验组患者的血清中均降低；③与对照组相比，let-7a、miR-125、miR-1792在模型组大鼠血清中均有所升高，其中let-7a升高最明显。

3 讨 论

在本研究中，通过上述方法，let-7a、miR-125、miR-1792在实验组患者的血清中明显升高，而miR-142和miR-155在实验组患者血清中没有明显的变化；与治疗前相比，治疗过程中let-7a、miR-125、miR-1792在实验组患者的血清中均降低；与对照组相比，let-7a、miR-125、miR-1792在模型组大鼠血清中均有所升高，其中let-7a升高最明显，差异明显，具有统计学意义（P＜0.05）。因此，我们可认为，let-7a可能与自身免疫性甲状腺炎的发生和发展有着一定的联系。