慢性乙型肝炎患者HBV-DNA载量、肝功能指标与免疫学标志物的相关性研究

张 玲，郑 荣,何三军,魏少军,唐寒秋,冯仕川△

陕西省汉中市中心医院：1.检验科；2.全科医学科，陕西汉中 723000

慢性乙型肝炎(以下简称“乙肝”)是一种由乙型肝炎病毒(HBV)感染所导致的慢性肝病，乙肝患者及HBV携带者都是该疾病的重要传染源。据统计，在我国约有1.2亿HBV隐性感染者，并且每年可能有30万人死于乙肝相关疾病，乙肝发病率一直居高不下[1]。研究指出，慢性乙肝患者不仅会有肝区疼痛、肝脾肿大等临床症状，其相关肝功能指标也会随之发生变化，使肝功能受损[2]。乙肝免疫学标志物(HBV-M)可反映机体对于HBV的免疫反应，HBV脱氧核苷酸(HBV-DNA)可反映HBV的复制水平，而肝功能指标则可以反映HBV对于肝细胞的损害程度[3]。本研究将探讨慢性乙肝患者的HBV-DNA水平、肝功能与免疫学标志物(HBV-M)三者间的关系。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取于2017年3月至2019年3月在本院治疗的慢性乙肝患者124例，男78例、女46例，年龄28～65岁，平均(48.58±12.47)岁，轻度乙肝38例，中度46例，重度40例。入选标准：(1)符合慢性乙肝的相关诊断[4]；(2)此前未经任何疾病相关的治疗；(3)配合度较高。排除标准：(1)重要脏器功能不全；(2)合并其他类型感染；(3)认知、精神障碍。本研究已由医院伦理委员会审核批准。

1.2方法

1.2.1标本采集 均抽取患者晨起空腹静脉血5 mL，室温下静置2 h后行离心处理。

1.2.2HBV-DNA的检测 采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)进行检测，仪器为德国罗氏公司的PCR仪，试剂盒来自深圳匹基生物工程技术股份有限公司，操作均按照说明书进行。HBV-DNA正常(阴性)参考值为<500 IU/mL。

1.2.3肝功能指标的检测 采用日立全自动生化分析仪对患者的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及前清蛋白(PA)进行检测。

1.2.4免疫学指标 采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙肝表面抗原(HBsAg)、表面抗体(HBsAb)、e抗原(HBeAg)、e抗体(HBeAb)，以及乙肝核心抗体(HBcAb)。

2 结 果

2.1HBV-M不同模式与HBV-DNA水平对比 124例患者共检出9种HBV-M阳性模式，其中大三阳(HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性)38例，小三阳(HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性)50例，HBsAg、HBcAb阳性14例，共计102例，占82.26%。模式Ⅰ的HBV-DNA阳性率及水平均高于其他模式(P<0.05)。见表1。

表1 不同HBV-M感染模式与HBV-DNA水平结果对比

2.2HBV-DNA水平与HBV-M的关系 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb及HBcAb 5项免疫学指标中，仅HBeAg与HBV-DNA水平相关。124例患者中，HBeAg阳性42例，HBV-DNA阳性39例，阳性率为92.86%(39/42)；HBeAg阴性82例，HBV-DNA阳性31例，阳性率为37.80%(31/82)。HBeAg阳性患者的HBV-DNA阳性率高于HBeAg阴性患者(χ2=32.038，P<0.001)。另将HBV-DNA与HBeAg水平分都分为4个等级，行Spearman相关分析，HBV-DNA与HBeAg水平呈正相关(r=0.652，P<0.05)。见表2。

表2 HBV-DNA与HBeAg水平的相关性分析[n(%)]

2.3HBV-M与肝功能的关系 124例慢性乙肝患者中，HBeAg阳性42例，HBeAg阴性82例。HBeAg阳性患者的AST、ALT水平均高于HBeAg阴性患者，其PA水平低于HBeAg阴性患者(P<0.05)。另外，乙肝患者血清HBV-DNA水平与AST、ALT水平均呈正相关(r=0.433、0.367，P<0.05)，与PA不具有相关性(r=0.042，P>0.05)。见表3。

表3 HBV-M与肝功能相关指标对比分析

3 讨 论

乙型肝炎患者相关临床症状、表现较为繁杂，其HBV-DNA、HBV-M，以及肝功能指标水平只能片面地反映患者感染HBV的不同时期与机体免疫系统反应的结果，血清中有无HBV的复制，以及肝脏损伤的严重程度。既往的临床诊断中多将血清HBV-DNA的检测水平用于衡量病毒复制情况，随着对疾病的研究逐渐深入，大多学者提出血清HBeAg转阴并不意味着HBV停止复制，部分HBeAg阴性患者同样也会存在HBV的复制和传播现象[5]。

当前，血清学指标在乙肝疾病的临床诊断中较为常见，可反映患者机体内病毒的转变过程，但对于HBV在机体内的复制情况及患者有无传染性的判定存在局限性[6]。HBV-DNA是反映HBV感染最直接的指标，通过对其进行检测可对HBV复制情况进行判断，HBV-DNA水平越高，提示HBV的复制越活跃，其传染性就越强[7]。HBeAg作为HBV核心基因的一部分，是HBV复制的重要指标，HBeAg阳性表明HBV复制的活动性，意味着传染性较大，容易转为慢性。本研究中，HBeAg阳性组的HBV-DNA阳性率高于HBeAg阴性组，且其HBV-DNA水平也较高，提示HBeAg阳性与HBV-DNA水平相关，与邹红霞等[8]的观点一致。随着HBeAg水平的增加，血清中HBV-DNA水平也相应增加，即HBeAg水平反映HBV-DNA水平，与HBV的复制水平有关。有研究报道，相较于单一的HBeAg阳性或者HBV-DNA阳性，乙肝患者HBeAg与HBV-DNA同时阳性，其ALT、AST水平会更高，肝损伤程度与HBeAg和HBV-DNA水平呈正相关[9]。本研究通过对124例慢性乙肝患者进行相关的检测，共检出9种HBV-M阳性模式，以大三阳和小三阳这两种模式多见，且大三阳模式的HBV-DNA阳性率及水平均高于其他模式，提示HBV-DNA水平与HBeAg水平呈正相关。HBeAg阳性患者的AST、ALT均明显高于HBeAg阴性患者，其PA水平低于HBeAg阴性患者，且血清HBV-DNA的水平与其AST、ALT水平均呈正相关，提示HBV-DNA、HBV-M及肝功能3者之间存在密切的联系。

综上所述，慢性乙肝患者HBV-DNA、肝功能指标、HBV-M水平密切相关，加强对HBV-DNA、HBV-M水平的检测，有利于提高慢性乙肝的筛查率，对患者发生严重肝功能损害具有重要的预防作用。