肺癌患者胸水中sST2、Fascin含量以及癌细胞 恶性增殖、侵袭基因表达水平的检测分析

常蓓 刘广雅 刘利敏

河南省兰考东方医院检验科，开封市 475300

肺癌晚期患者常伴有恶性胸水，是由于胸膜受癌细胞侵袭后导致胸腔积液吸收减少及局部淋巴回流受阻所导致[1]。早期鉴别出胸水的良恶性有助于患者的早期治疗，延长肺癌患者生存期[2]。目前临床常用的胸水脱落细胞学检查，诊断胸水良恶性的敏感度较低，临床使用价值不高[3]。近年来，一些研究结果[4-6]显示，可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)和肌动蛋白交联蛋白(Fascin)在恶性胸水内呈高表达，两者可能与恶性胸水的发生发展具有一定的联系，可协助判断胸水性质，明确诊断，为治疗提供参考。为探讨肺癌患者胸水中sST2、Fascin含量与癌细胞恶性增殖、侵袭的关系，本研究选取肺癌合并恶性胸水患者50例以及低蛋白血症合并胸水或心力衰竭合并胸水患者30例作为研究对象，对两组患者胸水的sST2、Fascin含量等进行了比较分析，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017年1月至2019年2月在我院治疗的肺癌合并恶性胸水患者50例为研究组。纳入标准：(1)符合《早期肺癌围术期治疗专家共识》[7]中肺癌相关诊断标准；患者出现胸水；(2)临床资料完整。排除标准：(1)合并严重的自身免疫性疾病；(2)合并全身感染性疾病。选取同期在我院治疗的低蛋白血症合并胸水或心力衰竭合并胸水患者30例为对照组。纳入标准：患者符合低蛋白血症(血浆总蛋白质<60 g/L或血浆白蛋白<35 g/L)或心力衰竭(进行B型利钠肽和N末端B型利钠肽原检查)的诊断标准、出现胸水，临床资料完整。研究组患者男29例，女21例；年龄34～64岁，平均(46.42±3.35)岁；身体质量指数19.2～24.3 kg/m2，平均(21.42±0.75)kg/m2。对照组患者男17例，女13例；年龄32～66岁，平均(46.55±3.24)岁；身体质量指数19.0～24.5 kg/m2，平均(21.39±0.81)kg/m2。两组患者的性别、年龄、身体质量指数比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 方法 对肺癌合并恶性胸水患者50例及蛋白血症合并胸水或心力衰竭合并胸水患者30例的临床及实验室检测资料进行比较分析。患者胸水标本的sST2、Fascin含量采用酶联免疫吸附法检测，胸水癌细胞恶性增殖基因(LKB1、MTS1、BCL2、KI-67)及恶性侵袭基因(MMP9、N-cadherin、E-cadherin、TMSG-1、Bin-1)的表达水平采用荧光定量PCR反应检测。

1.3 统计学处理 采用SPSS 23.0统计学软件进行数据分析，计量资料以x±s表示，两组间均数比较采用t检验；对肺癌患者胸水中sST2、Fascin的含量与癌细胞恶性增殖基因、侵袭基因表达水平的关系进行Pearson相关性分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组患者胸水中sST2、Fascin含量的比较 研究组患者的sST2、Fascin含量显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组患者胸水中sST2、Fascin含量的比较 (n，x±s)

2.2 两组患者的胸水癌细胞恶性增殖基因表达水平比较 研究组患者胸水癌细胞的恶性增殖基因BCL2、KI-67的表达水平显著高于对照组，LKB1、MTS1的表达水平显著低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.3 两组患者的胸水癌细胞恶性侵袭基因表达水平 研究组患者胸水癌细胞恶性侵袭基因MMP9、N-cadherin的表达水平显著高于对照组，E-cadherin、TMSG-1及Bin-1的表达水平显著低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 两组患者的胸水癌细胞恶性侵袭基因表达水平比较 (n，x±s)

2.4 研究组患者胸水中sST2、Fascin含量与其癌细胞中恶性增殖、侵袭基因表达水平的相关性分析 Pearson相关性分析结果显示，研究组患者胸水中的sST2、Fascin含量与其癌细胞中恶性增殖基因LKB1、MTS1及恶性侵袭基因E-cadherin、TMSG-1、Bin-1的表达水平呈负相关，与恶性增殖基因BCL2、KI-67及恶性侵袭基因MMP9、N-cadherin的表达水平呈正相关。见表4。

表4 研究组患者胸水中sST2、Fascin含量与其癌细胞中恶性增殖、侵袭基因表达水平的相关性分析

3 讨 论

恶性胸水是肺癌晚期患者的常见并发症，早期判定胸水性质、明确诊断对制定治疗方案等具有重要的意义[8]。目前，临床常用的胸膜活检、胸水内脱落细胞等检查敏感度较低，临床诊断价值有限[9-10]。

近年来研究[5-6]发现，sST2、Fascin蛋白在恶性胸水中高表达，可作为判断胸水性质及患者病情的一种方法。sST2是由ST2蛋白脱落进入胸水形成的可溶性物质，可与ST2结合，拮抗IL-33，抑制CD8+T细胞的肿瘤杀伤功能[11-12]。Fascin是一种表达于人体上皮细胞的细胞骨架蛋白，能与肌动蛋白结合，促进细胞表面伪足与微棘的生成，诱导细胞的运动、侵袭、迁移[13-14]。

癌细胞的增殖在癌症的发生发展过程中受到多种增殖基因的调控，包括促增殖基因与抑增殖基因[15]。BCL2、KI-67属促增殖基因，BCL2能通过抑制线粒体凋亡途径，阻滞下游caspase的级联凋亡，对细胞的增殖具有促进作用；KI-67参与细胞核内DNA复制，对细胞的增殖发挥促进作用[16-18]。LKB1、MTS1属于抑增殖基因，LKB1是一种丝苏氨酸蛋白激酶，在PTEN、p53等辅助下抑制细胞增殖；MTS1对CDK4具有激活作用，能有效抑制细胞增殖；sST2、Fascin含量与癌细胞的恶性增殖呈正相关[19-21]。促侵袭基因和侵袭抑制基因在癌症发展过程中对肿瘤组织的浸润具有调控作用，在肺癌患者中，促侵袭基因MMP9、N-cadherin呈高表达；上皮间质转化调控分子Bin-1抑制MYC分子活性，阻滞肿瘤侵袭性生长的重要环节上皮间质转化，导致E-cadherin增多；TMSG-1抑制MMP9等的表达，对肿瘤细胞侵袭具有阻碍作用[22-24]。

本研究结果显示，研究组患者的sST2、Fascin含量显著高于对照组；研究组患者胸水中癌细胞的恶性增殖基因BCL2、KI-67及恶性侵袭基因MMP9、N-cadherin的表达水平显著高于对照组；研究组患者胸水中的sST2、Fascin含量与其癌细胞中恶性增殖基因LKB1、MTS1及恶性侵袭基因E-cadherin、TMSG-1、Bin-1的表达水平呈负相关，与恶性增殖基因BCL2、KI-67及恶性侵袭基因MMP9、N-cadherin的表达水平呈正相关。结果提示，患者胸水中的sST2、Fascin含量、恶性增殖基因BCL2、KI-67及恶性侵袭基因MMP9、N-cadherin的表达水平与患者胸水的性质密切相关，这对明确胸水性质并对患者进行正确诊断和治疗具有重要的参考价值。