骨肉瘤相关长链非编码RNA调控肿瘤上皮间质转化的研究进展

何思思（通讯作者） 张大权 贺旭 王彦哲

（1遵义医科大学附属医院肿瘤科 贵州 遵义 563003）

（2遵义医科大学第二附属医院肿瘤科 贵州 遵义 563003）

（3遵义医科大学第二附属医院放疗中心 贵州 遵义 563003）

骨肉瘤是儿童及青少年中最常见肿瘤之一。在骨肉瘤疾病发展过程中，上皮间充质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）发挥重要作用。长链非编码RNA(Long non-coding RNA,LncRNA)在肿瘤中存在异常表达。近年来很多报道通过进一步探究骨肉瘤发生EMT的分子机制为有效治疗提供新的证据。本文就LncRNA调控肿瘤上皮间充质转化研究进展进行综述。

1.EMT与lncRNA概述

非编码RNA（non-coding RNA,lncRNA）作为保守的非蛋白质编码RNA，总长度超过200个核苷酸。lncRNA参与了肿瘤细胞的重要生物学行为和病理过程，包括细胞发育、凋亡、增殖，侵袭转移及表观遗传调控。上皮-间充质过程伴随上皮细胞标记分子的丢失和黏附连接蛋白的表达增强。EMT也被证实与更高的肿瘤复发率、预后差、生存率减低密切相关。近来大量研究提示骨肉瘤发生EMT的过程中lncRNA扮演重要角色。

2.与骨肉瘤EMT过程相关的lncRNA

2.1 FTX

长非编码RNA Ftx是一个新发现的与癌症的生长和转移相关的基因，定位于chrXq13。该基因高表达与骨肉瘤淋巴血管浸润和临床分期有关[1]。Bo Li等发现通过转染lncRNA Ftx观察到人骨肉瘤细胞株Saos2和HOS迁移和侵袭能力增强。经蛋白印迹发证实高表达lncRNA Ftx组上皮标志物E-cadherin和N-cadherin明显下调。笔者认为该研究更强调临床预后的意义，并未进一步展开动物实验及治疗模型。

2.2 AFAP1-AS1

肌动蛋白丝相关蛋白1-反义RNA 1（AFAP1-AS1）被证实在多癌种包括鼻咽癌、肠癌及胆管癌中均呈现高表达状态。该基因诱导骨肉瘤EMT依赖于激活miR-4695-5p/TCF4-βcatenin信号通路[2]。虽然该研究提示AFAP1-AS1可作为骨肉瘤EMT的正向调控因素，但目前该基因调控骨肉瘤EMT过程的文献尚少，需待进一步研究。

2.3 CRNDE

CRNDE位于16号染色体上，被鉴定为大肠腺瘤和腺癌中高表达的新基因。转移性骨肉瘤患者CRNDE明显高表达。CRNDE耗竭抑制了肿瘤的生长，抑制Notch1信号通路传导进而降低EMT过程[3]。由此可见lncRNA CRNDE调控骨肉瘤EMT过程中Notch信号通路发挥了至关重要的作用。

2.4 PCAT1

一项纳入30例骨肉瘤病例的研究表明，与正常骨组织相比，PCAT1在骨肉瘤组织中表达明显上调[4]。PCAT1可作为骨肉瘤患者的总体生存期预测因素。MG-63细胞中PCAT1的过表达增强了细胞增殖、侵袭、迁移能力及EMT相关分子标志物改变，明显促进了EMT过程，而敲低U2OS细胞中的PCAT1发挥了相反的作用。由此笔者推测PCAT1可能成为骨肉瘤治疗的重要靶点。

2.5 DANCR

是一种在肿瘤中被发现的高表达的长链非编码RNA。DANCR上游启动子存在STAT3和NF-κB的转录结合位点。NianJiang等人的研究中证实lncRNA DANCR的过表达增加了骨肉瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT过程，并在体内促进了肺转移[5]，此项研究中更证实了DANCR的过表达增加了肿瘤细胞干性，这也进一步证实了DANCR作为骨肉瘤EMT过程的正向调节作用。

2.6 miR210HG

作为miR210宿主基因，近来研究报道该基因在骨肉瘤中也发挥了重要作用。Jiang Li报道了miR210HG表达异常显著增加患者预后不良，使生存率降低[17]。体外实验中通过敲低miR210HG明显抑制骨肉瘤细胞的增殖，侵袭以及上皮-间质转化相关标志物（N-钙黏着蛋白和波形蛋白）的表达。该项研究表明，miR210HG可能是调控骨肉瘤EMT的关键指标之一。

2.7 SPRY4

SPRY4内含子转录本1（SPRY4-IT1）在几种癌症中促进细胞生长。近来研究提示SPRY4-IT1促进骨肉瘤中的细胞增殖、迁移和侵袭，诱导骨肉瘤细胞上皮-间充质转化表型[7]。该研究提示SPRY4-IT1/Snail1/E-钙粘蛋白途径可能在促进骨肉瘤转移中起关键作用。

2.8 HOTAIR

HOX反义基因间RNA（HOTAIR）是第一个首先被发现具有反式转录调控作用的长链非编码RNA，被正式与肿瘤转移有关。大连医科大学附属医院的研究通过选取2002年—2009年期间共40例骨肉瘤病理组织，检测结果表明HOTAIR的过表达与晚期肿瘤组织学分级密切相关[8]。该研究指出HOTAIR可以通过激活MMP2和MMP9促进肿瘤EMT过程。

2.9 SNHG家族相关成员

小核RNA宿主基因（SNHG）是一种新鉴定的LncRNA。Yiqi Deng最近报道了骨肉瘤中SNHG7水平与OS患者的高Enneking期，远处转移和较短的总生存时间有关[9]。骨肉瘤肿瘤细胞中的SNHG7减低会显着影响EMT过程。这些研究说明SNHG家族参与骨肉瘤EMT调控，仍尚需更加深入细致的实验。

2.10 NBR2

作为非蛋白质编码基因，与肿瘤抑制基因BRCA1.12,13相邻。一项纳入株洲市附属医院62例骨肉瘤的研究表明NBR2表达下调的骨肉瘤表现出较短的总体生存时间[10]。研究者发现NBR2过表达抑制骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移和EMT过程。裸鼠实验中进一步验证了过表达NBR2调控N-钙黏着蛋白、E-钙黏着蛋白及波形蛋白水平。因此他们推测NBR2可能成为临床骨肉瘤治疗的重要切入点。

2.11 GAS5

生长停滞特异性5基因（GAS5）定位于染色体1q25，是多个癌肿的肿瘤抑制因子。Kaishan Ye等人报道了GAS5的过表达抑制了骨肉瘤细胞的增殖，迁移和上皮间质转化（EMT）[11]。该项研究的机制明确了lncRNA GAS5调控EMT过程中miR-221的参与。这一机制的阐明对骨肉瘤的治疗方案提供了另一条新思路。

3.小结与展望

EMT是肿瘤发生侵袭转移的重要机制，与预后密切相关。骨肉瘤的治疗效果目前未有明显改善。lncRNA已成为医药相关领域的研究热点，其具有特殊的生物复杂性。本文从lncRNA调控骨肉瘤EMT这一角度出发，阐述了近年来lncRNA参与调控骨肉瘤EMT的相关研究。当前的研究揭示促进或抑制骨肉瘤EMT过程的相关lncRNA,为骨肉瘤的精准治疗提供了更多的研究数据。虽然关于lncRNA调控EMT的研究依然有限，但我们相信随着医学技术的蓬勃发展，其机制将会被阐明，骨肉瘤的疗效会得到极大的改善。