淋巴细胞参数在筛查外周血浆细胞中的应用价值*

姜连生，吴萍，张森森，樊笑霞，李畅，周琳(海军军医大学附属长征医院实验诊断科,上海 200003)

外周血中浆细胞极少见，当患有某些浆细胞病，如华氏巨球蛋白血症、多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)、浆细胞白血病(plasma cell leukemia，PCL)等，外周血中浆细胞可见增多，某些感染性疾病偶见增多。在患者初诊时，及时发现外周血中存在浆细胞对患者确诊及后续治疗具有重要意义。

某些血细胞分析仪除能提供常规的白细胞分类结果外，针对淋巴细胞还能提供侧向散射光强度(LY-X)、侧向荧光强度(LY-Y)、前向散射光强度(LY-Z)、侧向散射光分布宽度(LY-WX)、侧向荧光分布宽度(LY-WY)、前向散射光分布宽度(LY-WZ)等参数[1]。本研究试图通过分析上述参数，总结含浆细胞的外周血淋巴细胞参数特征，为日常工作中及时发现血液中的浆细胞提供帮助。

1 对象和方法

1.1研究对象 2019年5月至2020年4月上海长征医院外周血标本镜检发现浆细胞的患者作为浆细胞组，共28例，其中男11例，女17例。选择同期外周血标本镜检发现异常淋巴细胞(淋巴瘤15例，白血病11例，失访2例)的患者作为异常淋巴细胞组，共27例，其中男14例，女13例；镜检发现异型淋巴细胞的患者作为异型淋巴细胞组，共87例，其中男43例，女44例；体检结果正常者作为健康人对照组，共140例，其中男62例，女78例。

1.2主要仪器与试剂 XN-9000全自动血液分析仪及其配套试剂、定标品、质控品，SP-10推片仪(日本Sysmex公司)。所有仪器定期校准，室内质量控制数据均在控。

1.3标本采集与检测 采集研究对象静脉血2 mL，EDTA-K2抗凝，4 h内完成检测。根据《ICSH 外周血细胞形态特征的命名和分级标准化建议》[2]对异常标本镜检，镜检过程由2位有2年以上镜检经验的检验医生共同完成。

1.4统计学分析 用SPSS 21.0统计软件分析数据，用GraphPad Prism8绘图。用K-S检验分析正态性。6个淋巴细胞参数经 K-S检验均为偏态分布，以M(P25,P75)表示，多样本间差异比较用Kruskal WallisH检验，各组间两两比较采用Nemenyi检验。对组间比较差异有统计学意义的淋巴细胞参数，用ROC曲线评价其在识别浆细胞中的效能，并计算曲线下面积(area under curve，AUCROC)、可疑值范围、敏感性及特异性。淋巴细胞参数与镜检浆细胞比例的相关性用Pearson相关分析。以P<0.05表示有统计学意义。

2 结果

表1 淋巴细胞参数精密度分析结果

2.2淋巴细胞参数结果 浆细胞组与其他各组淋巴细胞参数结果见表2。浆细胞组6项淋巴细胞参数均大于健康人对照组；浆细胞组与异型淋巴细胞组、异常淋巴细胞组比较，仅LY-WZ差异有统计学意义。

表2 淋巴细胞参数在4组样本中的表达情况

2.3淋巴细胞参数识别浆细胞的效能 见表3。ROC 曲线显示，以健康人对照组为对照，LY-X、LY-WY和LY-WZ在识别浆细胞中具有重要价值。以异型淋巴细胞、异常淋巴细胞为对照，LY-WZ识别浆细胞的效能中等。

表3 淋巴细胞参数在识别浆细胞中的效能

2.4淋巴细胞参数与浆细胞百分比的相关性分析 通过Pearson相关分析，淋巴细胞参数LY-Z与外周血浆细胞百分比具有相关性，Person相关系数为0.591(n=28，P<0.01)，见图1。其他淋巴细胞参数与浆细胞百分比无相关性。

图1 LY-Z与浆细胞百分比的相关性分析结果

3 讨论

随着检测方法的更新，越来越多的新技术开始应用于血细胞的分析，可提供更多的参数来敏感、准确地反映血细胞形态、大小及核酸含量[3]。Sysmex-9000血细胞分析仪淋巴细胞参数LY-X、LY-Y、LY-Z分别反映淋巴细胞内容物复杂程度、核酸含量和细胞体积大小[4]。LY-WX、LY-WY和LY-WZ反映上述3个指标的不均一性[5]。各种因素引起淋巴细胞大小、核酸含量和内部结构改变，这些参数也会发生相应变化[6]。

本研究发现，浆细胞组LY-X、LY-Y和LY-Z高于健康人对照组，而徐卫益等[7]研究发现MM患者LY-X高于健康人对照组。本研究还发现，浆细胞组LY-WX、LY-WY和LY-WZ增高，说明浆细胞内部结构复杂程度、核酸含量、细胞体积差异程度均高于正常淋巴细胞。LY-X和LY-WZ对从健康者标本中筛查出浆细胞价值最高，其特异性分别可达78.6%、92.9%，而敏感性分别为92.9%、91.4%。与病例对照组相比，仅LY-WZ可用于浆细胞与异型淋巴细胞、异常淋巴细胞的区分，LY-WZ用于浆细胞与异型淋巴细胞的AUCROC为0.712，当cut-off值取580时，敏感性可达92.9%，但特异性较低，仅有44.8%。LY-WZ区分浆细胞与异常淋巴细胞AUCROC为0.785，当cut-off值取582.5时，其敏感性为89.3%，特异性为66.7%，这提示存在浆细胞的血液淋巴细胞大小差异较其他淋巴系统良性或恶性疾病更大。本研究发现淋巴细胞参数LY-Z与患者外周血浆细胞百分比呈正相关，相关系数0.591。淋巴细胞参数与外周血浆细胞百分比的相关性尚未见相关文献报道。

本研究虽发现淋巴细胞参数在识别外周血浆细胞中有一定价值，但由于存在研究样本量较小等缺点，尚不能直接应用于临床。另外，淋巴细胞参数产生明显差异时，尚需镜检排除其他异常细胞的存在，并明确外周血中浆细胞的确切比例。