食品安全免疫层析检测技术研究进展

李姣

湖南华中宏泰检测评价有限公司 湖南长沙 410000

常见的食品安全快速检测方法主要包括化学比色法、酶联免疫吸附法、免疫层析技术（immuno chromatogr aphyassay，ICA）、电化学分析法和生物发光等。其中免疫层析技术在1984年首次投入商业使用，用于简单的基于尿液的家庭妊娠测试。与一般常规方法相比，不仅具有简单快速、灵敏度高、特异性强等特点，而且在检测时间、检测成本、仪器设备、人员要求、测试成本、安全性等方面存在诸多优势，使得ICA 被广泛应用于食品安全、环境监控和医疗诊断领域，特别适合生产者和监管人员筛查使用。在食品安全检测领域，竞争法和双抗夹心法是免疫层析技术的标准检测模式，现已被广泛应用于大分子蛋白质、食源性致病菌、真菌毒素、农兽药残留、非法添加物等的检测。本文旨在总结当前ICA 在食品安全检测中的应用进展，归纳分析我国的免疫层析相关方法标准，并讨论目前ICA 的不足以及在未来应用中的发展方向，以期为生产者、实验室及相关监管部门提供切实可行的技术参考，进一步推动ICA 在我国的应用和发展[1]。

1 食品安全快速检测概述

食品安全快速检测通常认为是包括样品制备在内、能够在短时间内得到较准确结果的检测技术。按照应用场合和检测时间的不同，食品安全快速检测方法可分为实验室快速检测方法和现场快速检测方法。实验室快速检验方法是指包括样品制备在内，能够在2h 以内得到检验结果的检测方法，或相比传统检验方法缩短1/2 或1/3检验时间的微生物检验方法；现场快速检验是指可用于现场并且在30min 内可得到检验结果的检测方法，如果能够在十几分钟甚至几分钟内得到检测结果，可将其视为比较理想的现场快速检测方法。

2 食品安全免疫层析检测技术研究进展

2.1 高通量检测

单重免疫层析试纸条一般含有一条检测线和一条质控线，可以用来检测单一的分子，目前，这种检测模式正朝着“多靶标”高通量的检测方向发展。一方面，企业通过将多个单一试纸条组装在一个卡壳里，制备多联卡，以实现对多种药物的同时检测，例如克伦特罗-莱克多巴胺-沙丁胺醇三联检测卡就是这种类型，可以实现对β-激动剂克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇3 种药物进行同时检测。此外，研发人员通过制备具有“类”识别性的抗体，来实现多靶标检测的目的。通过分析磺胺类抗生素药物的结构，设计出含有磺胺母核结构的半抗原，在此基础上筛选获得了可以同时识别27 种磺胺抗生素药物的单克隆抗体，对应的免疫层析试纸条可对27 种磺胺类抗生素药物进行高通量检测。另外一种形式的多重检测试纸条是在单一检测线试纸条的基础上发展起来的、具有多条检测线的免疫层析试纸条，目前也受到了很大的关注。该技术扩大了检测区的范围，在原来的检测区喷涂多条检测线，针对不同的靶标，将多种抗体的标记物混合固相化。通过在硝酸纤维素膜喷点了三条检测线和一条质控线，成功建立了多重免疫层析试纸条方法，实现了对三类17 种激素药物的同时检测，灵敏度可以达到0.005ng·mL-1。

2.2 致病菌检测

在各类食源性致病菌，沙门氏菌、大肠杆菌等病菌均是常见的病菌。邵晨东等以条带状将抗沙门氏菌O9 抗原的特异性单克隆抗体4-7-7、羊抗鼠IgG，分别包被于硝酸纤维膜的检测带以及质控带上，采用胶体金对另一株单抗3-47-0 进行标记，并将之吸附于结合垫上以制备成沙门氏菌O9 抗原试纸条。对沙门氏菌O9 抗原而言，这一试纸条的检测限为4×105CFU。目前，对于食品中存在的引发疾病的病菌，往往会在进行增菌的基础上，进行分离、培养、生化鉴定进而对病菌进行检测，这一方法不但会花费较长时间，操作复杂、流程繁琐，并且极易受到主观以及环境因素的影响而使检测结果的精准性大打折扣，而GICA 技术则能有效解决操作流程繁琐、特异性以及灵敏度均较低的问题[2]。

2.3 近红外光谱技术

近红外光谱技术具有制样简单、非破坏性、可实现快速无损和绿色环保远程分析检测等优势，在食品质量监控领域中发挥越来越重要的作用。Wang 等以蒙牛、伊利、万达山奶粉为检测样本通过添加试验模拟实际掺假样品，利用近红外光谱分析检测奶粉中掺假淀粉的情况。然而，由于物质通常在近红外区的吸收系数小，因此不适用一些痕量物质的分析。未来近红外光谱技术仍需不断完善才能发挥更大作用，如将其与化学计量法相结合，提高光谱图分析与试验结果的可重复性；此外，红外光谱检测仪也需要由大型研究级向小型便携式转换，同时建立更加全面广泛的全球性数据库，进一步促进该技术的应用和发展。

3 结语

食品安全问题直接关系着人们的生命安全和生活质量，影响着民众对社会、对政府的信任，保证食品安全的第一步就是对食品进行安全检测，快速检测技术在食品安全监督中的应用可以有效提高食品安全的监督效率和科学性。免疫学检测技术具有灵敏度高、特异性强、方便、快速和经济性等优点，在食品安全快速检测中充当着至关重要的作用，将免疫原理结合现代分析技术和手段探索开发新型食品安全快速检测新技术的研究正在逐步进行，利用免疫学技术研发的快速检测试纸条及试剂盒产品具有广阔的市场前景，在食物过敏原快速检测领域及转基因食品的快速检测领域还可以得到更广泛的应用，免疫学快速检测方法在食品安全检测中的应用优势会日渐明显。