传统药Shimshin-6的代谢组学研究

包英才，Daariimaa Khurelbat，Davaadagva Damdinjav

(1.内蒙古民族大学，内蒙古 通辽 028000；2.蒙古国立医科大学，蒙古 乌兰巴托市 000000)

传统蒙药秘方shimshin-6是蒙医传统临床用药，蒙医结合了蒙古民族的游牧文化和生活经验，是蒙古族伟大智慧结晶[1-4]。

1 实验材料和方法

1.1 实验材料

药物：传统秘方Shimshin-6粉由蒙古国国立医科大学提供。仪器及试剂：高效液相色谱仪。动物：成年雄性 SPF 级 SD 大鼠(200±20 g)，购于常春实验动物技术有限公司。实验期间动物保持自由饮水和进食，实验前适应性饲养 1 周。动物实验获得蒙古国国立医科大学论理委员会批准。

1.2 方法

分组、造模及给药。将大鼠随机分为3组，每组15只大鼠。对照组(CG)、模型组(MG)和给药组(AG)。对所有的大鼠皮下注射氢化克的松，以引发闭经模型。分别以大、中、小剂量浓度对Shimshin-6皮下给予AG 21 d。分别给CG和MG动物0.5%的羧甲基纤维素钠溶液。在第22 d，通过腹膜内注射10%水合氯乙酸，使来自CG、MG和AG的所有大鼠安乐死。从腹主动脉中采集血样，分离血清并保存在-80℃温度下。

代谢组学方法：将所有样品在4℃的冰上融化，然后取100 μL的每个样品并置于Eppendorf(EP)管中，然后与400 μL的萃取液(甲醇∶乙腈=1∶1)涡旋30 s，然后超声处理5 min。将样品在4℃下以12 000 rpm离心15 min，将上清液转移到EP管中。使用真空浓缩器干燥样品。加100 μL乙腈和水，将样品涡旋30 s，在4℃水浴中超声10 min。将EP在12 000 rpm下离心15 min，最后上清液转移至2 mL LC/MS玻璃小瓶中。

2 实验结果

获得了10个闭经模型大鼠的两组血液样品的总离子色谱图。分析并选择了血液水平显著变化的代谢物，结果如图1和表1。

图1 A组与F组的层次聚类分析热图Fig.1 Heatmap of hierarchical clustering analysis for group A vs F

表1 simxing-6的模型大鼠和未服用S-6的模型大鼠之间的血清代谢谱差异列表Table.1 List of differential serum metabolic profiles between model rats admin simxing-6 and model rats without S-6.

3 结果与讨论

通过对潜在生物标志物进行生化和通路分析，结果表明，主要与丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢，色氨酸代谢，苯丙氨酸，酪氨酸和色氨酸生物合成有关。综上，simixing-6对大鼠闭经有明显的改善作用，起效机制涉及能量代谢、肠道稳态、氧化应激和免疫功能[5-6]。