酶联免疫在洗衣机除尘螨过敏原中的浅析

罗寨洪

（威凯检测技术有限公司 广州 510663）

引言

随着新冠疫情的发生，市场对于健康类产品的需求会进一步提高。而洗衣机作为人们家庭中常用的家用电器，在我国的普及率极高，从波轮、双缸洗衣机，到滚筒洗衣机，再从全自动洗衣机到智能洗衣机。随着科技制造工艺的不断发展，众多洗衣机制造商纷纷推出了具有除过敏原功能的洗衣机，来满足消费者对于健康类洗衣机的需求。

当机体接触过敏原一定时间后，机体致敏。致敏期的时间可长可短，这段时间内没有临床症状，当再次接触过敏原后，方可发生过敏反应。生活中吸入式过敏原无处不在，花粉、柳絮、粉尘、螨虫、动物皮屑、油烟、油漆、汽车尾气、煤气、香烟等都属于吸入式过敏原。目前全球有22 %的人群患有过敏性鼻炎、哮喘、湿疹等过敏性疾病，并以每10年23倍的速度增加，其中高达53 %的过敏性疾病都与螨虫有着紧密的联系，其中人们生活中最常见的螨虫便是尘螨。控制过敏原是预防过敏性疾病的关键途径之一，目前，市场有部分宣称具有除过敏功能的洗衣机，通过对衣物上过敏原物质残留的去除，来减少各种过敏原对人们的危害。对此，我们采用酶联免疫分析方法对部分宣称具有除过敏功能的洗衣机进行尘螨过敏原去除率的试验探索。

1 尘螨与尘螨过敏原

尘螨，属节肢动物门、蜘蛛纲、真螨目、蜱螨科，截止到目前已有5 000多种尘螨被发现。尘螨广泛存在于家庭环境中，包括地毯、床单、被单、窗帘等都有活螨的存在。尘螨以人体脱落物为主要食物来源，其螨虫虫体及代谢产物、排泄废物等均具有较强的过敏原性，可引起超敏反应性疾病，如过敏性哮喘、过敏性荨麻疹、特应性皮炎等[1]。全世界有将近10～20 %的人对于尘螨过敏，且尘螨引起超过50 %的Ⅰ型变态反应性疾病患者。

根据一项调查统计的结果显示，在能够引起过敏性疾病的众多过敏原当中，尘螨的比例占得最多，几乎是占到了一半以上，对人的危害性非常的巨大[2]。尘螨是属于吸入性过敏原的一种，长得有一点像小型的蜘蛛。在我们的居家环境中，尘螨可以谈得上是无孔不入。尤其是潮湿的环境里很容易滋生尘螨。尘螨的排泄物可以被分解成为极其细微的粉尘，它们可以依附在厚重的窗帘上，毛织的地毯上，枕头上或者是床单上，是人们非常容易接触到的一种过敏原。尘螨一旦被呼吸到鼻腔里面，就很有可能会引发鼻炎，如果是被呼吸入肺部的话，则非常容易会诱发哮喘疾病的发作[3,4]。

2 检测原理与方法

酶联免疫（ELISA）是以抗原与抗体的特异性反应作为基础，加上酶与底物之间的特异性反应，使反应之间灵敏度放大的技术。ELISA是根据酶反应底物显色的深浅进行定性或定量分析，由于酶促反应的放大作用能够使免疫反应的灵敏度大大提高。随着蛋白质分离纯化技术和单克隆抗体制备技术的不断完善和迅速发展，各种高纯度抗体、单克隆抗体的全面应用，使得ELISA在特异性、灵敏度等许多方面都有了大幅度的提高，ELISA同时具有精确的定量分析能力，随着其使用范围的不断扩大，ELISA逐步成为各种复杂体系中痕量物质分析定量的主要技术手段[5]。ELISA具有选择性好、灵敏度高、结果判断客观准确、实用性强等众多优点，同时可以弥补统计学分析方法和其它仪器测试手段的不足。

3 实验与分析

3.1 实验器材

微孔板分光光度计（酶标仪），洗板机（PW-812），移液器，震荡摇床。

3.2 实验材料与试剂

负载中平布（经纱22，纬纱22），屋尘螨变应原（Der P1），酶联免疫试剂盒（Der P1 ELISA KIT）。

3.3 试验步骤

3.3.1 器具准备

实验前将待测洗衣机空载运行两个除过敏程序。

3.3.2 试验负载与试验样块制备

试验负载规格：33 cm×33 cm。

试验样块规格：2.5 cm×7.5 cm。

121 ℃灭菌20 min，60 ℃烘干，至室温后使用。

3.3.3 进行除过敏程序

将涂覆屋尘螨过敏原的试验样块固定到试验负载上，装载进被测样机内，启动除过敏原程序。试验使用负载为洗衣机额定容量的30 %，采用Der P1 ELISA KIT试剂盒进行检测。

阳性对照：将涂覆过敏原的载体在室温下放置与试验组相同的时间。采用与试验组相同的方式回收并检测过敏原。

阴性对照：取未加过敏原的试验样块3 块，按照与试验组相同的方法同步装载、洗涤，作为阴性对照一组，取未加过敏原也不作洗涤的试验样块作为阴性对照二组。按照与试验组相同的方式回收并检测过敏原。阴性对照的过敏原浓度不得高于试验的最低检出限。

3.4 计算公式

式中：

Kg—过敏原去除率，单位为（%）；

G0—对照组过敏原浓度，单位为（μg/m3）；

G1—试验组过敏原浓度，单位为（μg/m3）。

3.5 结果分析

通过选择10 台商家宣传具有除过敏原效果的洗衣机，采用屋尘螨变应原（Der P1），通过酶联免疫分析方法进行过敏原去除率试验探究所得结果。

表1所示的是第一台洗衣机在采用酶联免疫分析方法，采用屋尘螨过敏原时，屋尘螨过敏原标准物浓度所对应的吸光度值（OD），根据其得出两者之间的线性关系，如图1。

表2是洗衣机在除过敏程序下，对照组、试验组的吸光度值和所对应的过敏原浓度，所测得该洗衣机在除过敏程序下的屋尘螨过敏原去除率达到95.19 %。

表1 洗衣机屋尘螨过敏原标准物浓度与吸光度值（OD）

图1 洗衣机屋尘螨过敏原吸光度（OD）值与标准物浓度标准曲线

表2 洗衣机屋尘螨过敏原去除率试验结果

表3 通过酶联免疫分析方法对10 台洗衣机不同程序进行过敏原去除率试验结果

通过一系列的试验探索，这10 台洗衣机在不同工作原理的程序作用下，对屋尘螨的过敏原的去除作用效果差别也非常大。第一台到第十台的洗衣机采用的测试程序分别为除过敏、蒸汽消毒洗、蒸汽洗、标准洗、银离子、空气洗、强力洗、高温洗、防过敏、标准洗，表3中，所选10 台洗衣机程序的工作原理包括高温漂洗、银离子、巴氏低温、臭氧等等。这10台洗衣机对应程序所测得的屋尘螨过敏原去除率分别为95.19 %、98.86 %、98.74 %、82.34 %、92.10 %、90.61 %、79.64 %、97.77 %、96.41 %、77.28 %。其中，过敏原去除率达到90 %的洗衣机有6 台，另外4 台洗衣机的过敏原去除率相对较低。由此可见，目前市场上宣传的具有除过敏原功能的洗衣机，除过敏原的作用效果参差不齐，体现出目前市场上所推出的除过敏原洗衣机所运用的技术原理还未成熟。

其中对居家尘螨过敏原去除率效果较好的洗衣机中，主要工作原理为高温漂洗，在高温的作用下，可以有效的去除生活中所存在和残留的过敏原，有效的减少衣物上所残留的多种过敏原，从而降低许多过敏原对我们身体的危害。但高温漂洗的同时会对许多衣物或其他纺织品带来不同程度的损伤，影响人们日后的使用。

4 结语

目前市场上具有除过敏原的洗衣机还相对较少，但是随着科技的不断发展，会有越来越多的能有效去除各种过敏原的洗衣机出现。如何在原有作用和功能的基础上，让洗衣机能够更加有效的去除尘螨以及其他多种过敏原，同时减少高温对衣物和其他纺织品所带来的损害，也是未来洗衣机行业发展的一个技术难点；检测机构和监管部门也应该制定出除过敏原的有关标准，完善对具有除过敏原作用的检验检测，更快更全面的提升企业产品质量，进一步的提高消费者的健康生活水平。