铁皮石斛液体口香糖的研制

陆倩倩 杨薇 何靖 林冰 周英

摘 要：以铁皮石斛、青钱柳和玫瑰茄为原料，研制液体口香糖。 通过感官评价、正交试验得出最佳配比为铁皮石斛汁34 %，青钱柳汁12 %，玫瑰茄汁23 %，菊花汁31 %，薄荷脑0.58 %，吐温-80 0.23 %，苯甲酸钠0.02 %。并对液体口香糖的抑菌效果进行了评价，结果表明：研制的铁皮石斛液体口香糖外观呈红色液体，均匀一致，具有青钱柳、玫瑰茄、菊花的复合气味，口感酸甜清爽，无异味;并对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有一定抑制作用。

关键词：铁皮石斛;青钱柳;玫瑰茄;液体口香糖;抑菌

中图分类号：R78文献标识码：A

文章编号：1008-0457（2020）04-0082-06 国际DOI编码：10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2020.04.012

Abstract： This study prepared the liquid gum of Dendrobium officinale through using D.officinale，Cyclocarya paliurus，  and Hibiscus sabdariffa According to the sensory evaluation and orthogonal test of liquid gum， we found the best ratio for preparing liquid gum was as follows： 34%juice of D.officinale ， 12%juice of C.paliurus， 23%juice of H.sabdariffa， 31% juice of D.morifolium， 0.58% menthol， 0.23%tween-80， and 002%sodium benzoate. This study also investigated the antibacterial effect of liquid gum of D.officinale. The result showed that liquid gum was red liquid and uniform in appearance， and had compound smell of D.officinale， C.paliurus and H.sabdariffa. The taste was sweet and sour， and had no peculiar smell. It also had a certain inhibitory effect on Staphylococcus aureus and Escherichia coli.

Keywords： Dendrobium officinale; Cyclocarya paliurus;Hibiscus sabdariffa; liquid gum; bacteriostatic effect

铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）为兰科（Orchidaceae）石斛属（Dendrobium）多年生草本植物，是我国及亚太地区一种传统的名贵中药材，为我国传统药用植物，在日常保健和临床治疗中应用悠久，受到国内外学者广泛关注。研究表明铁皮石斛具有抗氧化[1-4]、抗肿瘤[5-8]、调节免疫力[9-11]、緩解疲劳[12]、治疗糖尿病[13]及抑菌[14]等作用。如Wei等[15]在研究500mg/kg铁皮石斛提取物对BALB/c小鼠的抗疲劳作用中，以红景天提取物为阳性对照，采用负重游泳测试进行评价，发现两者在一定程度上均对各项疲劳指标有抑制作用，但铁皮石斛提取物表现出更强的抗疲劳活性。

青钱柳（Cyclocarya paliurus）系胡桃科（Juglandaceae）青钱柳属（Cyclocarya）植物，具有明显的降血糖、降血压、降血脂、抗氧化、抗肿瘤和增强机体免疫功能[16-22]等作用。如王小江等[23]发现青钱柳叶多糖能显著抑制α-葡萄糖苷酶活性，半数抑制浓度（IC50）为3.3μg/mL，远小于抗2型糖尿病药物阿卡波糖（193.6μg/mL）。

玫瑰茄（Hibiscus sabdariffa L .）为锦葵科（Malvaceae Juss）木槿属（Hibiscus Linn.）一年生草本植物，有抗氧化、抗糖尿病、抗肿瘤、降血压、调血脂、抗动脉粥样硬化[24-27]等医疗用途。如Afolabi等[28]研究几种植物的甲醇和水提取物对口腔龋易感性突变链球菌的作用发现，玫瑰茄提取物显示直接抗菌活性， 最小抑制浓度 （MIC） 为 2.5mg/mL。

随着生活水平的提高，人们日益关心自身健康问题，对口腔健康的关注度亦越来越高。细菌及病毒感染，空气污染，用声过度，烟酒及辛辣燥热刺激食物等因素易导致口腔问题和咽喉炎症，如果失治、误治、错治，易演变成牙周炎、慢性咽喉炎等。张晓静[29]发现革兰氏阳性球菌、铜绿假单胞菌和革兰氏阴性短杆菌等细菌是口腔疾病的主要致病菌，涵盖常见的大肠杆菌、肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌等多种类型。2018年1月，国家卫生计生委食品安全标志与监测评估司下发了《国家卫生计生委食品司关于就党参等9种物质作为按照传统既是食品又是中药材物质开展试生产征求意见的函》，拟将铁皮石斛、党参等9种物质列入按照传统既是食品又是中药材的名单，并将浙江和云南省两省作为铁皮石斛试生产的首批省份。因此，先期对铁皮石斛的综合利用开发进行研究，为铁皮石斛的应用打下基础，具有重要的意义。本研究以铁皮石斛为主要原料，辅以青钱柳、玫瑰茄、茉莉、百合、陈皮、菊花等多种中药材，研制了一种气味清新，色泽均一，口感酸甜清爽、无异味，易于携带和使用的液体口香糖，并对其抑菌效果进行了评价，为铁皮石斛等中药材的开发利用提供了理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

药材：铁皮石斛、青钱柳、玫瑰茄、菊花均为市售。经贵州中医药大学魏升华教授鉴定分别为：铁皮石斛为兰科植物铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）的茎;青钱柳为胡桃科植物青钱柳（Cyclocarya paliurus）的叶;玫瑰茄为锦葵科植物玫瑰茄（Hibiscus sabdariffa L.）的花;菊花为菊科植物菊（Dendranthema morifolium（Ramat.） Tzvel.）的花。

菌株：大肠杆菌（Esche-richia Coli）（ATCC 25922）、铜绿假单胞杆菌（Pseudomonas aeruginosa）（CMCC 10104）、金黄色葡萄球菌（Staphylo-coccus aureus）（BNCC 186335）、普通變形菌在上海鲁微科技有限公司采购。

试剂：营养琼脂及营养肉汤（上海博微生物科技有限公司），MH琼脂培养基（杭州百思生物技术有限公司），MH肉汤培养基（杭州百思生物技术有限公司），抗生素药敏纸片（杭州微生物试剂有限公司）。薄荷脑（河南万邦实业有限公司），吐温-80（广州穗欣化工有限公司），苯甲酸钠（河南永顺化工有限公司），水（娃哈哈纯净水，蒸馏水为实验室自制）。

仪器：电热恒温水浴锅（DK-98-Ⅱ，天津市泰斯特仪器有限公司）;电子天平（13D101-1000，上海良平仪器仪表有限公司）;冰箱（BCD-225WDGK，青岛海尔股份有限公司）。

1.2 试验方法

1.2.1 提取液的制备

挑选干燥、色泽均一的铁皮石斛、青钱柳、玫瑰茄、菊花药材，分别按一定比例加入蒸馏水，在90℃下浸提60min，过滤，滤液4℃保存。

1.2.2 液体口香糖感官评价的测定

参照QBT 2945-2012口腔清洁护理液产品的感官理化指标，对液体口香糖的感官进行评分，包括色泽（满分30分），口感和气味（满分30分），组织状态（满分40分），满分以100分计。评价小组由10名有感官评品经验的技术人员组成，结果取平均值，评分标准见表1。

1.2.3 单因素试验

为确定液体口香糖的配方，先进行单因素试验确定铁皮石斛汁、青钱柳汁、玫瑰茄汁、菊花汁、薄荷、吐温-80加入的量。试验时固定其他条件，一次改变其中一个条件，以便于分析各因素对液体口香糖的影响。固定铁皮石斛汁为15g、青钱柳汁5g、玫瑰茄汁10g、菊花汁13g、薄荷0.25g、吐温-80 0.15g，分别以铁皮石斛汁（13、14、15、16及17g）、青钱柳汁（4、5、6、7及8g）、玫瑰茄汁（8、9、10、11及12g）、菊花汁（10、11、12、13及14g）、薄荷（0.15、0.2、0.25、0.3及035g）、吐温-80（0.05、0.1、0.15、0.2及0.25g）进行单因素试验，从色泽、口感气味、组织状态3个方面进行感官评价，得分去掉一个最低分，去掉一个最高分，剩下的作为正交试验的较优区间。

1.2.4 正交试验

根据单因素试验所确定的铁皮石斛汁、青钱柳汁、玫瑰茄汁、菊花汁、薄荷、吐温-80加入的量，进行L18（37）正交试验，通过感官评价分析确定液体口香糖的最佳配方。正交设计试验见表2。

1.2.5 灌装、杀菌装瓶后及时灭菌。

1.2.6 抑菌圈实验采用滤纸片扩散法

将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、普通变形菌、铜绿单胞菌采用牛肉膏蛋白胨培养基活化并扩大培养，采用平板牛津杯法进行体外抑菌活性的测定。将以上几种菌液稀释至106cfu/mL，取100μL均匀涂于凝固的培养基平板表面。将灭菌好的滤纸片置于待测液中浸泡，30min后取出，沥干多余药液后，均匀放在固体培养基上，恒温箱中培养、观察，测定其抑菌圈大小。取链霉素溶液 10μL 滴加于灭菌滤纸片上作为阳性对照。抑菌圈的直径大于 6.00mm 者，则判有抑菌作用;抑菌圈直径越大，抑菌能力越强。

1.3 液体口香糖指标测定

1.3.1  感官理化指标

参照QBT 2945-2012口腔清洁护理液产品的感官理化指标。

1.3.2 微生物指标

参照QBT 2945-2012检测，应符合表3要求。

1.3.3 防腐剂

液体口香糖为多剂量液体制剂，应加入适当防腐剂，GB 2760-2014规定苯甲酸限量为0.2g/kg，故而本试验选取0.02 %苯甲酸钠作为防腐剂。

2 结果与分析

2.1 料液比的确定

料液比的不同，直接影响到产品的口感，从表4可见，不同药材最佳液料比为：铁皮石斛1：10（g/mL），青钱柳1：100（g/mL），玫瑰茄1：50（g/mL），菊花1：100（g/mL）。

2.2 单因素试验

2.2.1 铁皮石斛汁、青钱柳汁、玫瑰茄汁、菊花汁的单因素试验由图1可知，铁皮石斛汁、青钱柳汁、玫瑰茄汁、菊花汁加入的量分别为15、6、10、14g时感官评分最高。

2.2.2 薄荷、吐温-80的单因素试验

由图2可知，当薄荷、吐温-80加入的量分别为0.25 g、0.1 g时感官评分最高。

图2 薄荷、吐温-80加入的量对感官评价的影响Fig2 The effect of the amount of menthol and Tween-80on sensory evaluation

2.3 正交试验

在单因素试验的基础上，进一步优化液体口香糖的配比，设计L18（37）正交试验，试验因素水平表见表2，正交试验结果见表5。

由表5可知，对液体口香糖影响的主次关系为铁皮石斛汁>薄荷脑>菊花汁>玫瑰茄汁>青钱柳汁>吐温-80;最佳配比组合为A2B1C2D2E2F1，即铁皮石斛汁15g、青钱柳汁5g、玫瑰茄汁10g，菊花汁13g，薄荷脑0.25g，吐温-80 0.1g 。此时风味最佳，其汁液芳香甘甜，入口清爽，有酸甜清凉感。

2.4 指标测定结果

2.4.1 感官评定结果

色泽：呈红色液体，均匀一致。

口感和气味：具有青钱柳、玫瑰茄、菊花的气味，甜度适中、酸甜清爽，有薄荷清凉口感，无异味。

组织状态：透明液体，无沉淀，无肉眼可见的外来杂质。久置有絮状天然提取物，属正常现象。

2.4.2 微生物测定结果

根据1.3.2项下测定，符合QBT 2945-2012要求。

2.5 抑菌作用

液体口香糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、普通变形杆菌、铜绿假单胞菌的抑菌作用见表6及图3。从表6抑菌圈直径大小可以看出，液体口香糖对铜绿假单胞菌、普通变形菌的抑制作用不明显;对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有抑制作用。

3 结论与讨论

通过正交试验，确定液体口香糖的最佳配比为：铁皮石斛汁34%，青钱柳汁12%，玫瑰茄汁23%，菊花汁31%，薄荷脑0.58%，吐温-80 0.23 %，苯甲酸钠0.02%。制备出的液体口香糖外观呈红色液体，均匀一致，具有青钱柳、玫瑰茄、菊花的复合气味，甜度适中、酸甜清爽，具有薄荷清凉口感，无异味。抑菌试验表明，本产品对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有一定的抑菌作用，为今后其在口腔护理品中的应用提供了很好的试验研究依据。

随着人们生活水平的不断提高和保健意识的增强，药食两用产品将会越来越受欢迎。目前已有学者开展了相关铁皮石斛保健食品的研究，如石斛饮料[30]、酸奶[31]、发酵酒[32]等，并取得了一定的研究成果。基于此，本研究将铁皮石斛作为原料制成液体口香糖（此类研究目前尚未见相关报道），为石斛产品的多样化提供思路，促进石斛产业的发展，激发和带动我国石斛产业的健康可持续发展。

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