甘蔗新品种桂柳05136组培快繁试验

韦海球，罗晟昇，唐利球，江清梅

（广西南亚热带农业科学研究所/农业部龙州热带作物科学观测综合实验站，广西 崇左 532415）

选育和推广甘蔗新品种是提高我国甘蔗产量、降低蔗糖生产成本的重要手段［1-2］。目前，我国甘蔗旱坡地栽种面积已占植蔗面积的80%以上。迫切需要推广种植强宿根抗旱甘蔗新品种，以提高我国甘蔗单产，保证蔗糖产业的稳定可持续发展。甘蔗新品种桂柳05136由桂柳县甘蔗研究中心选育，品种来源是以CP81-1254为母本，新台糖22号为父本的杂交后代，2014年4月通过国家作物品种审定委员会（甘蔗）鉴定。2014年6月通过广西区农作物品种审定会的审定，经试验和生产表证示范该品种具有强生长势、早熟、高产、高糖、宿根好、适应性强的优良农艺性状［3］。

1 材料和方法

1.1 材料

以广西南亚热带农业科学研究所种植的甘蔗品种桂柳05136为试验材料，取甘蔗茎顶部长约60 cm，带回实验室后剥去部分老叶梢，即获得外植体。

1.2 外植体的处理和愈伤诱导

取甘蔗外植体，用75%酒精轻轻擦拭表面，放入超净工作台中。剥去外叶梢至甘蔗幼嫩叶片，置于已灭菌消毒的盘子内切成1 mm薄片，接种于瓶内，每瓶接种10片，放置于28℃的恒温培养室内进行暗培养。培养基配方为改良MS+（0.5、1、1.5、2、2.5 mg/L）2,4-D+30 g/L糖+8 g/L卡拉胶。观察记录愈伤组织的情况。

1．3 分化诱导与增殖培养

将生长良好的愈伤组织随机接种于分化诱导培养基中，分化培养基以改良MS为基本培养基，设置5个处理，即改良MS+（0.25、0.5、1、2、3 mg/L）6-BA+30 g/L糖+8 g/L卡拉胶，每个处理接种15瓶，每瓶接种10个。光照培养20～25 d，光照14 h，光照度为1500～2000 lx，温度为28℃，观察并记录芽分化的情况。将分化培养获得的小苗转接到增殖培养基中，增殖培养基以改良MS为基本培养基，设置5个处理，即改良MS+（0.5、1、2、3、4 mg/L）6-BA+30 g/L糖。将分化出来的甘蔗苗切小至后5～6株一丛，每个组合接种15瓶。光照培养20～25 d后换1次培养基，增殖培养5次，光照14 h。光照度为1500～2000 lx，温度为28℃，观察并记录组培苗增殖的情况。

1．4 生根培养

增殖获得的甘蔗小苗转接到生根培养基中，生根培养基以改良MS为基本培养基，设置5个处理，即MS+（3、4、5、6、7 mg/L）NAA+70 g/L糖，将比较大丛的甘蔗组培苗自然分离成较小的丛苗，每个组合中接种14瓶，每瓶接种10株。光照培养20～25 d，光照14 h，光照度为1500～2000 lx，温度为28 ℃，观察并记录生根情况。

2 结果与分析

2.1 2,4-D浓度对愈伤的影响

2,4-D浓度对甘蔗愈伤的生长影响很大，当浓度较低时，愈伤的生长较慢，质地也比较硬；当浓度较高时，愈伤的长势好，但是愈伤的质量较差，活性不好，难以分化，分化后容易出现变异。由表1可以看出当2,4-D浓度为2 mg/L时愈伤组织长势好，呈淡黄色，而且质量最好。因此，最适宜桂柳05136愈伤生长的培养基为MS+2 mg/L 2,4-D。

表1 2,4-D浓度对桂柳05136甘蔗愈伤诱导的影响

2.2 6-BA浓度对愈伤组织分化的影响

从表2可以看出，随着6-BA浓度不断提高，分化出苗率也随之提高，当其浓度达到2 mg/L时，出苗率最高，达到75%，随后出苗率降低；当6-BA浓度为3 mg/L时，出苗率为58.3%，苗的长势一般。随着6-BA浓度不断增加，长势也越好，芽亦粗壮，当6-BA浓度为2 mg/L时，苗长势最好，叶片浓绿，芽粗壮。由此可以看出，最适宜桂柳05136甘蔗愈伤组织分化出苗的培养基为改良MS+2 mg/L 6-BA。

表2 6-BA浓度对愈伤组织分化的影响

2.3 6-BA浓度对甘蔗增殖系数的影响

从表3可以看出，随着6-BA浓度升高，甘蔗增值率不断升高，叶色逐渐变深，在6-BA低浓度时，还有根长出。当6-BA浓度为3 mg/L时，增殖系数为3.5，苗最粗壮，叶色深绿。由此可以看出：最适宜桂柳05136增殖的培养基为改良MS+3 mg/L 6-BA，在该培养基中增殖获得的甘蔗小苗长势好，叶浓绿，增殖率最高。

表3 6-BA浓度对甘蔗增殖率的影响

2.4 NAA浓度对甘蔗组培苗生根的影响

从表4可以看出，NAA是影响生根的重要因素。处理中都可以生根，NAA的浓度对根的生长速度影响较大，随着NAA浓度的升高，根的长度会随之变化，当NAA的浓度在5 mg/L时根的诱导最快、根长最长，也最为粗壮，植株生长健壮。由此可以看出，最适宜桂柳05136的生根培养基为改良MS+5 mg/L NAA。

表4 NAA浓度对甘蔗组培苗生根的影响

3 结论

甘蔗的组织培养有一定的特性，不同品种之间存在一定的差异，特别是在愈伤诱导方面。有些品种需要较高的2,4-D浓度，而有些品种愈伤在较低浓度时生长良好。2,4-D低浓度时愈伤生长慢，长势不好，质量不好；而浓度高时，愈伤的生长过快，活性不好，容易变异。因此，愈伤诱导时2,4-D的浓度一定要控制好。试验结果表明：桂柳05136在2,4-D浓度为2 mg/L时，最适宜愈伤组织诱导。6-BA浓度会影响愈伤组织分化，浓度太高或太低都会抑制分化出苗，只有在适宜的浓度下，才会比较好的分化出苗，最适宜桂柳05136分化的培养基为改良MS+2 mg/L 6-BA。6-BA的浓度也影响着甘蔗增殖率，浓度太低，增殖率不理想，过高容易出现变异，最适宜桂柳05136的培养基为改良MS+3 mg/L 6-BA，在该培养基中增殖获得的甘蔗小苗长势好，叶浓绿，增殖率最高。NAA是影响甘蔗组培苗生根的重要因素，当NAA的浓度在5 mg/L时根的诱导最快、根长最长，也最为粗壮，植株生长健壮。