水产养殖动物病害检测和药敏试验分析

2019 年笔者通过全市病害测报点进行水产养殖病害检测及上报工作，针对发病样品进行采样检测、病原菌株分离和鉴定，并将鉴定出的部分菌株用常用抗菌药物开展了药物敏感性试验，旨在及时准确发现、预防水产养殖病害，通过科学实验数据分析为科学合理药物使用提供指导依据，确保养殖水产品质量安全。

一、病害检测总体情况

2019 年常熟市池塘养殖面积共计9.68 万亩，其中河蟹、青虾养殖面积8.62万亩，占比89%，常规鱼养殖面积0.46 万亩，占比5.3%，其他还包括南美白对虾、澳洲淡水龙虾、鳜鱼等养殖品种。全市共设立10 个水生动物病害测报点，总测报面积4 744亩，检测品种包括河蟹、青虾、青鱼、鳙鱼、草鱼、鲫鱼、鳜鱼、鲈鱼、小龙虾等，共检测样本58 个，其中寄生虫病样2 个、细菌性病害病样36 个，由真菌、肝胆综合征、水质恶化等其他原因引起的病害样本12个(其中多原因并发症病样6个)，具体情况见表1。

二、细菌性病原分离鉴定及药敏试验

1.试验材料

(1)菌株来源：对全市10个病害测报点发病样品进行致病菌分离，鱼类分离部位为血液、心脏、肾脏、肝脏，虾蟹类分离部位为心脏、肝脏、鳃丝、肠道，共计检测发病样品50 个，分离纯化菌株42株。

(2)试验药品：营养琼脂购于北京陆桥技术股份有限公司，肠杆菌和其他非苛养革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒(英文名API 20E)、非苛养非肠道革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒(英文名API 20NE)购于梅里埃诊断产品(上海嘉合)有限公司。动物用药敏分析试剂板购于南京菲恩医疗科技有限公司。

2.试验方法

细菌分离鉴定和药物敏感性试验在市水产站病害检测无菌室进行，实验操作遵循梅里埃API-20E和API-20NE试剂条鉴定及南京菲恩动物用药敏分析试剂板操作规程。将试验菌株先进行细菌浓度配比，再按照产品说明书进行操作和结果判定。

3.试验结果

(1)细菌鉴定结果：42 株菌株共计鉴定菌株13 种，虾蟹分离出的病原微生物主要有嗜水气单胞菌、杀鲑气单胞菌、浅黄假单胞菌、美洲爱文菌、阴沟肠杆菌，鱼类分离出的病原微生物主要有嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、溶藻弧菌等。

(2)药敏试验结果：对已鉴定的10株病原微生物用8 个品种的药物进行敏感性试验，8 种药物分别是恩诺沙星、硫酸新霉素、甲砜霉素、氟苯尼考、盐酸多西环素、氟甲喹、磺胺间甲氧嘧啶钠、磺胺甲噁唑＋甲氧苄啶，得出8种药物对不同致病菌的最低抑制浓度(MIC)，具体结果见表2。

三、讨论与分析

2019 年试验分离到的细菌菌株共计42 株，13 种，其中温和气单胞菌和嗜水气单胞菌占比最高，分别为37.8%和16.2%。温和气单胞菌和嗜水气单胞菌是水生动物常见致病菌，在鱼类中最为常见。3月在草鱼、鲫鱼、鳙鱼等发病鱼体内检出比例较高，6月开始在病虾、病蟹体内检出，导致水生动物外部感染出现肿胀、腐烂，内部引起肠炎、细菌性败血症，造成较多死亡。

表1 水产养殖动物病害检测情况汇总

表2 水产养殖动物细菌性药物敏感性检测结果统计

药敏试验结果表明，目前本地区抑菌效果最好的药物是恩诺沙星，对所有试验菌株均具有较好的抑制效果，硫酸新霉素也具有广泛的抑制效果，盐酸多西环素、氟苯尼考粉、甲砜霉素、磺胺间甲氧嘧啶钠、磺胺甲噁唑＋甲氧苄啶对大部分细菌抑制效果较好，氟甲喹抑制效果较差。

病害防控要坚持“以防为主、防治结合”，在养殖前期应做好干塘清淤清塘工作，养殖过程中及时进行杀虫消毒，定期调水改底，减少有害病原微生物的生长；同时注意投喂高质量饵料，定期拌服复合维生素等增强体质，减少病害发生。对于出现患病的养殖池塘不可盲目滥用药物，建议在有条件的地方从患病水产品体中分离致病菌，在完成药物敏感性检测的基础上选择合适的药物，定量拌饲料投喂，与此同时进行池塘消毒。有条件的地区应着力建立正确的合理用药机制，指导养殖户合理选择抗菌药物的种类和适宜的使用浓度，从而减少养殖用药、降低生产损失，确保养殖水产品的质量安全。