研究不同梅毒血清学检验法联合运用价值

529200台山市中医院，广东江门

现阶段，梅毒检验方式主要有两种，梅毒甲苯胺红不加热血清试验(Trust)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)，而不同方式在临床应用过程中会存在程度不一的假阴性或假阳性，延误患者治疗时机[1]。本文分别以Trust、TPPA对血清标本进行检测，并联合应用两种方式，对比梅毒检出准确率，现报告如下。

资料与方法

2016年2月-2018年1月收治梅毒患者53 例，男31 例，女22 例；年龄21～70 岁，平均(45.5±2.5)岁；潜伏期5 例，Ⅰ期13 例，Ⅱ期27 例，Ⅲ期8 例，血液标本离心处理之后去血清置于-70℃环境中保存。

仪器及试剂：试剂盒：Trust 试剂盒--上海荣盛生物药业有限公司生产；TPPA 试剂盒--富士瑞必欧株式会社生产；振荡器：XK968 型振荡器；酶标仪： MK3 型酶标仪；洗板机：KHBsT96W洗板机。

方法：对患者血清标本分别行Trust、TPPA 检测。①TPPA：取血清稀释液，通过微量滴管将其置入微量反应板的第1个孔内，滴入4滴即可，容量控制在100 μL左右，然后选择微量反应板第2 个孔至第4 个孔，每个孔内滴入1 血清稀释液，容量控制在25 μL 左右。通过微量移液管取25 μL 左右的样品，置入微量反应板的第1 个孔内，借助微量加样器遵从2 n 法，由第一个孔开始稀释，直至4 个孔全部完成稀释。通过滴管取1滴未致敏粒子，容量控制在25 μL左右，将其滴入第3个孔内，再取1滴致敏粒子，容量控制在25 μL 左右，将其滴入第4 个孔内。以平板混合器进行混合，混合周期约为30 s，静置于室温环境中，持续周期为2 h。②Trust：取生理盐水对血清稀释，促使其由原始比例的1:2 转变为1:64，然后取微量反应板，将适量心磷脂抗原滴加在各个孔内，取振荡器对其进行水平震荡，震荡强度控制在100 次/min 左右，震荡周期控制在8 min左右。

表1 两种检测方式梅毒检出率比较[n(%)]

表2 两种方式与联合检验的价值对比[n(%)]

观察指标：比较两种检查方式梅毒检出率及联合应用的检出率。

统计学处理：数据应用SPSS 17.0 软件处理；计数资料以[n(%)]表示，采用χ2检验；P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

两种检测方式梅毒检出率比较：TPPA检测法在潜伏期梅毒方面检测率更为显著；Trust 在Ⅰ期、Ⅱ期梅毒方面检出率偏高，且二者在Ⅲ期梅毒方面的检出率均为100%。见表1。

两种检测方式与联合检验价值比较：联合应用Trust、TPPA检测方法对梅毒敏感性和检出率均显著高于两种方法单独使用，可见联合法可以在极大程度上提高梅毒敏感性，从而改善检出率，见表2。

讨 论

本次试验结果显示，两种检测方法在潜伏期、Ⅰ期、Ⅱ期以及Ⅲ期梅毒方面均具有较好检出率，但相对来说，TPPA检测法在潜伏期梅毒方面检测率更为显著；Trust 在Ⅰ期、Ⅱ期梅毒方面检出率偏高，且二者在Ⅲ期梅毒方面检出率均为100%。而联合应用两种检测方法，可以在极大程度上提高梅毒敏感性，从而改善检出率。

由于生活方式的改变，现阶段每年梅毒暴发率均呈现不断攀升态势，且其中所占比较高的为潜伏期梅毒携带者[2]，如果仅仅通过Trust法对血液中的梅毒进行筛查，会带来很大漏诊可能，导致一些潜伏期梅毒携带者的病毒传播途径无法得到及时有效的切断，不仅会影响潜伏期梅毒患者生理健康、心理健康，还会威胁患者家人生理健康。除此之外，因为Trust法归属于非特异性行列，在临床应用过程中，受到干扰可能性较大，这种干扰可以是两方面的：①传染性疾病；②自身免疫性疾病。本次试验过程中，以TPPA 为初筛法，然后以Trust 及其滴度进行检验，所以在很大程度上减少了Trust 检测结果的假阳性。TPPA 检测法通过梅毒螺旋抗体致敏明胶颗粒的应用[3]，在血清抗体、抗原发生特异性反应时会有凝集反应出现，由此可见该种检测方法敏感度更高，特异性更强，对梅毒检验效果更好。但是该种检验方式同样存在一定不足之处，即TPPA检测法操作步骤较多、流程繁琐、周期长，需要操作者具有较高检测操作水平和技能，标本保存难度大，并且其与RPR 一样需要以肉眼观察对检验结果进行判定[4-5]。

综上所述，两种检测方法联合应用对梅毒诊断效果最佳，但在实际临床中为保证工作效率，可通过TPPA 初筛样本，对疑似梅毒样本进行Trust及其滴度检测，以保证诊断率。