不同产地加工方法对白术总多糖含量的影响*

周雅雪，魏升华，李 玮，严福林，郑 滔

(贵州中医药大学 药学院，贵州 贵阳 550000)

白术(AtractylodesmacrocephalaKoidz.)系源于菊科植物白术的干燥根茎[1-2]，为我国传统常用中药。别名山蓟、杨梓、山精、术、山连、冬术、砖术等[3]，味苦、甘，性温，归脾、胃经。白术中主要含有多糖、苍术酮、苍术醇、白术内酯、含氧香豆素类、氨基酸及树脂等成分[4-9]，具有健脾益气、燥湿利水、止汗安胎等功效，在中医临床作用上非常广泛，俗有“十方九术”“北参南术”之说，主要应用于脾虚食少、腹胀腹泻、痰饮眩悸、水肿、自汗、胎动不安[1]等。

如今，产地加工的白术主要有晒术及烘术，而温度及湿度对白术有效成分的影响是其研究较多的方向，并且注重在产地[11]加工对白术挥发油成分的影响研究上，而关于不同加工方法对白术多糖含量影响的研究鲜有报道[11-16]。本研究选取贵州白术，就白术多糖不同加工方法对白术总多糖含量的影响进行研究。通过烘干发汗法和阴干法对新鲜白术进行加工，考察产地加工对总多糖含量的影响，以期对白术药材的加工方法进行优选并为其质量控制提供依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器

TU-1810 型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)；HH-2 型数显恒温水浴锅(常州澳华仪器有限公司)；HS10260D 型超声波清洗机(天津恒奥科技发展有限公司)；JA2003 型电子天平(上海舜宇恒平科学仪器有限公司)；ME204E 型电子天平(上海梅特勒-托利多仪器有限公司)；AUW220D 型十万分之一电子分析天平(苏州岛津仪器有限公司)；CS101-1C 型鼓风干燥箱(重庆四达实验仪器厂)；YHW-102 型远红外干燥箱(长沙仪器表厂)。

1.2 材料

甲醇(分析纯，国药集团化学试剂有限公司)；蒽酮(分析纯，广东光华化学厂有限公司)；浓硫酸(分析纯，国药集团化学试剂有限公司)；苯酚(分析纯，成都金山化学试剂有限公司)；D(+)-无水葡萄糖对照品(批号：GZD-D-0114，购自贵州迪大生物科技有限责任公司，含量≥99%)；娃哈哈纯净水。白术药材分别采用不同加工方法炮制，经贵州中医药大学魏升华教授鉴定为菊科白术AtractylodesmacrocephalaKoidz.的根茎。

2 方法与结果

2.1 样品制备

将新鲜采挖的白术洗净泥土，冲洗干净，按表1中的加工方法进行加工。

表1 不同加工方法的白术样品

2.2 供试品溶液的制备

精密称取干燥至恒重的白术药材粉末约0.2 g，置100 mL锥形瓶中，加85%乙醇60 mL，置水浴中加热回流1.5 h，趁热过滤，残渣用10 mL的85%乙醇洗涤两次，将残渣及滤纸置50 mL锥形瓶中，加蒸馏水25 mL，置沸水浴中加热回流1 h，趁热过滤，吸取滤液2 mL于150 mL定容瓶中，加水至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

2.3 对照品溶液的制备

精密称取经105 ℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品5.01 mg，置50 mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为0.1002 mg·mL-1的无水葡萄糖对照品溶液。

2.4 方法学考察

2.4.1 线性关系考察

取“2.3”项下无水葡萄糖对照品溶液，置于10 mL容量瓶中，定容至10 mL，即得浓度为0.05001 mg·mL-1的对照品溶液。

精密吸取稀释后的无水葡萄糖对照品溶液0.7 mL、0.9 mL、1.1 mL、1.3 mL、1.5 mL、1.7 mL、1.9 mL，置10 mL具塞干燥刻度试管中，各加水至2.0 mL，精密加入5%苯酚溶液1 mL，再精密加入硫酸5 mL，摇匀后置于沸水中水浴10 min，再放置在冰水中冷却7 min，以蒸馏水为空白对照，在490 nm处测定吸光度。以吸光度为纵坐标(Y)，无水葡萄糖对照品含量(mg)为横坐标(X)进行线性回归，得白术总多糖回归方程为：Y=7.6235X+0.0204，R2=0.9992；结果表明无水葡萄糖含量在0.035007～0.095019 mg范围内线性关系良好。结果见表2。

表2 无水葡萄糖标准曲线绘制数据(n=7)

图1 无水葡萄糖标准曲线

2.4.2 精密度试验

精密吸取稀释后的无水葡萄糖对照品溶液1.0 mL，置10 mL 具塞干燥刻度试管中，平行6份，按照“2.4.1”项依法操作，在490 nm处测定吸光度，无水葡萄糖吸光度的RSD 值为1.042%，结果表明该仪器的精密度良好。

2.4.3 重复性试验

按“2.2”项下供试品溶液的制备方法提取样品6份，分别精密量取2 mL供试品溶液，置10 mL具塞干燥刻度试管中，按照“2.4.1”项依法操作，在490 nm处测定吸光度，总多糖含量的RSD 值为1.79%，结果表明该种提取方法重复性良好。

2.4.4 稳定性试验

精密量取样品溶液1 mL，置10 mL具塞干燥刻度试管中，按照“2.4.1”项依法操作，分别于0 h、0.5 h、1 h、2 h、4 h、6 h在490 nm处测定吸光度，总多糖吸光度的RSD值为1.90%，表明该样品溶液在6 h内稳定。

2.4.5 加样回收率试验

精密称取同一批干燥至恒重的样品约0.1 g，平行6份，分别精密加入无水葡萄糖对照品如表3所示的量，按“2.2”项下供试品溶液的制备方法制备供试液，按“2.4.1”项依法操作，在490 nm 波长处测定吸光度，计算回收率，结果白术药材样品中总多糖含量的平均加样回收率为99.29%，RSD为0.67%，表明该方法可行。

表3 加样回收率实验结果(n=6)

2.5 样品测定

精密称取加工后的白术样品，按“2.2”项下方法制备供试品溶液，精密量取2 mL供试品溶液，置10 mL具塞干燥刻度试管中，按照“2.4.1”项依法操作，在490 nm处测定吸光度，通过标准曲线计算样品中无水葡萄糖的含量，每个加工方法重复测定3次，取其平均值作为最终结果，结果见表4。

表4 不同加工方法白术总多糖含量测定结果表(n=3)

2.6 结果与分析

如表4、图2所示，样品F1-F12为60 ℃烘干减重后发汗加工的白术样品，其中样品F10(60 ℃烘干减重至45%，发汗7 d，60 ℃烘干)总多糖含量最高，而样品F6(60 ℃烘干减重至45%，发汗3 d，100 ℃烘干)总多糖含量最少。经80 ℃烘干减重发汗加工的白术样品(F13-F24)中，样品F22(80 ℃减重至45%，发汗7 d，60 ℃烘干)总多糖含量最高，F19(80 ℃烘干减重至45%，发汗5 d，60 ℃烘干)次之，白术总多糖含量最少的是F24(80 ℃减重至45%，发汗7 d，100 ℃烘干)。经100 ℃减重发汗加工的白术样品(F25-F36)中，总多糖含量最高的是样品F31(100 ℃烘减重至45%，发汗5 d，60 ℃烘干)，其次为F27(100 ℃烘减重至45%，发汗1 d，100 ℃烘干)，总多糖含量最少的为F36(100 ℃减重至45%，发汗7 d，100 ℃烘干)。样品Y1为直接阴干的白术药材(Y1)，由表4及图2可知，与不同温度烘干减重后，发汗加工的样品相比，阴干白术样品中总多糖含量明显降低。由此可见，白术总多糖成分受加工影响较大，不经过加工而直接阴干的白术因较难将白术中的总多糖成分提取出来，所以总多糖含量很低。减重发汗法中，最佳的减重发汗加工方法是80 ℃烘干减重至45%，发汗7 d，60 ℃烘干。

图2 不同产地加工方法白术总多糖含量测定结果

3 讨论

由上述数据分析显示，以白术总多糖含量为评价指标，以直接阴干作为对比，对白术新鲜药材进行烘干减重后发汗加工，对提高白术总多糖含量具有促进作用。比较发汗时间对总多糖的影响，发汗时间越长，总多糖含量相对较高。就烘干温度而言，低温烘干对白术中总多糖含量影响较小，而较高温度烘干对总多糖含量影响较大，烘干温度过高，会致使多糖成分糊化，从而降低了白术中的总多糖，另外是否在加工过程中成分之间发生了相互转化或发生了生物化学反应，待进一步研究。由此可见，在白术药材加工过程中，不宜将白术置于过高温度下烘干，若要得到较高含量的总多糖，控制白术药材于适宜的条件下进行加工，才能得到含较多总多糖成分的白术药材。