基于腹泻模型药效学试验的白术饮片等级研究*

杜洪志，郑 英，陈志琳，王建科，张 敏，刘亚琴，李 玮▲

(1贵州中医药大学，贵州 贵阳 550025；2国药集团同济堂(贵州)制药有限公司，贵州 贵阳 550000)

白术为菊科植物白术(AtractylodesmacrocephalaKoidz.)的干燥根茎，其性温、味甘，入脾、胃二经，具有健脾益气、燥湿利水、固表止汗、安胎之功效[1]。为临床常用的大宗传统药材，因其药性平和，又有补益作用，《神农本草经》中将其列为上品。白术中主要含有内酯类、苷类、多糖类、挥发油以及氨基酸等成分[2-5]，具有免疫调节、利水、降血脂、降血糖、安胎等药理作用[6-10]。

中药饮片质量的优劣，传统以外观性状为主要判断依据，即是“辨状论质”评价中药质量[11]。白术为常用的大宗传统特色药材，临床运用广泛，市场交易量较大，有文献报道，白术商品药材市场上多按个头大小进行分等，在1984年版卫生部颁布的《七十六种药材商品规格标准》中[12]，白术药材以大小为主要划分依据分为四等，但有研究报道该商品规格划分不符合市场情况，并提出相关分级依据[13]。但是，分级依据多为外观性状和内在质控指标进行综合分析，由于中药饮片最终的目的是用于实际临床，质量的好坏不仅注重内在和外在质量，更要结合临床疗效进行评价，建立药效学评价模式，进一步完善中药饮片“按质论价”“按质应用”，从而保证临床用药的安全有效，而目前，结合药效学试验结果进行白术饮片等级划分的相关研究未见报道。

基于此，本文以白术饮片为研究对象，根据传统外观性状的主要评价指标进行等级划分，采用番泻叶“苦寒泻下”法，建立小鼠腹泻模型，研究白术不同等级饮片对小鼠腹泻的改善作用。研究结果为进一步完善白术饮片等级评价模式和指导临床用药提供科学依据，同时，也为其他饮片的等级质量评价提供新的研究思路。

1 材料

1.1 动物

KM小鼠，SPF级，体重18～22 g，由长沙市天勤生物技术有限公司提供，试验动物合格证号：SCXK(湘)2014-0011，分开笼子饲养，自由进食饮水，室温20～25 ℃，相对湿度40%～60%，12 h明暗交替。

1.2 试药

盐酸洛哌丁胺胶囊(批号：170417811，西安杨森制药有限公司)，生理盐水(批号：178040726，辰新药业股份有限公司)。白术饮片采集或采购于四川保新、浙江杭州、河北唐山、安徽亳州、贵州遵义共5批，经贵州中医药大学魏升华教授鉴定为菊科植物白术AtractylodesmacrocephalaKoidz.的干燥根茎。

2 方法和结果

2.1 白术饮片传统等级划分要点及方法

通过文献资料的查阅及2015版《中国药典》对白术外观性状的描述，将收集的白术生品饮片进行等级初步划分，每个批次拟分成三个等级进行研究，白术生品饮片不同等级划分指标及样品图见表1和图1。

表1 白术生品饮片不同等级划分指标

图1 白术生品饮片不同等级样品图

2.2 动物分组

取体重为18～22 g的健康KM小鼠180只，适应环境5 d后，随机分为18组，每组10只，雌雄各半。即正常对照组、模型组、阳性对照组、四川保新一级饮片组、四川保新二级饮片组、四川保新三级饮片组、浙江杭州一级饮片组、浙江杭州二级饮片组、浙江杭州三级饮片组、河北唐山一级饮片组、河北唐山二级饮片组、河北唐山三级饮片组、安徽亳州一级饮片组、安徽亳州二级饮片组、安徽亳州三级饮片组、贵州遵义一级饮片组、贵州遵义二级饮片组、贵州遵义三级饮片组。

2.3 模型建立

除空白对照组正常喂养，其他组每天给药9%番泻叶，给药量为0.3 mL/10g，连续灌胃10 d，建立小鼠腹泻模型。

2.4 给药方法

阳性对照组灌胃盐酸洛哌丁胺药液，空白对照及模型组灌胃生理盐水10 mL/kg，给药量以生药量计算20 g/kg，给药容量为0.2 mL/10g。持续给药7 d，于末次给药后1 h，将已禁食(不禁水)24 h的小鼠灌胃给予墨汁，每只0.2 mL/10g，20 min后脱颈椎处死小鼠，开腹，取出小肠及脾脏将小肠拉成直线，测量小肠的全长及幽门至黑色前沿的距离。以幽门至黑色前沿的距离占小肠全长的百分率为小肠推进率。

墨汁推进率=墨汁在肠内推进距离(cm)/小肠全长(cm)×100%

2.5 药效试验结果

观察记录各组小鼠体重、墨汁推进率和脾脏重量，采用SPSS20.0软件进行统计学处理，研究白术不同等级饮片对小鼠的健脾作用的影响，结果见表2。

表2 白术不同等级样品对小鼠肠推进、体质量、以及脾脏指数测定结果(n=10)

对小鼠肠推进率的影响：模型组与空白组比较具有极显著性差异(P<0.01)，结果表明腹泻病理模型基本建立；与模型组比较，阳性对照组和白术不同等级饮片给药组均有极显著性差异(P<0.01)，表明阳性药组与白术不同等级饮片给药组均均有良好的改善小鼠腹泻的作用。同时，白术一级饮片的改善效果均高于二级、三级饮片(P<0.05)，二级饮片与三级饮片之间无显著性差异(P>0.05)。

对小鼠体质量的影响：模型组与空白组比较具有显著性差异(P<0.05)，结果表明腹泻病理模型对小鼠体质量有显著影响；与模型组比较，阳性对照组和不同产地白术一级饮片组均有显著性差异(P<0.05)，二级饮片与三级饮片组无显著性差异(P>0.05)，但体质量大部分高于模型组，表明白术饮片能增加小鼠体重，改善腹泻模型小鼠的体质量。

对小鼠脾脏指数的影响：模型组与空白组比较具有显著性差异(P<0.05)，结果表明腹泻病理模型对小鼠脾脏指数有显著影响；与模型组比较，阳性对照组和不同等级给药组均有显著性差异(P<0.05)，且白术一级饮片的脾脏指数均高于二级、三级饮片，二级饮片与三级饮片组无显著性差异(P>0.05)，说明白术一级饮片对小鼠脾脏指数改善作用优于二级、三级饮片。

3 结论与讨论

通过白术不同等级饮片对小鼠腹泻模型的改善作用，与模型组比较，不同等级给药组对小鼠肠推进率、体质量、脾脏指数的影响均具有显著性差异(P<0.05)，表明白术不同等级给药组均有改善小鼠腹泻作用。同时，一级饮片对小鼠腹泻模型的改善作用优于二级、三级饮片(P<0.05)，且二级、三级饮片的药效作用无显著性差异(P>0.05)，结果表明根据传统外观性状进行白术等级划分的结果中，可将二级和三级饮片合并为一个等级，即白术饮片分为两个等级，一级饮片：长度(直径)3～9 cm，厚度2～4 cm，断面深红棕色或深褐色，具有多且密集的油室，蜂窝状，有裂隙，具有较明显的“菊花纹理”，质地较坚硬，不易折断，香气浓烈；二级饮片：长度(直径)2～8 cm，厚度2～4 cm，断面红褐色、红棕色或黄白色，油室较少且稀疏，或无油室，蜂窝状较少或无蜂窝状，少有裂隙或无裂隙，部分具有“菊花纹理”，质地坚硬，易折断，有香气或香气较淡。

目前，直接用于临床的白术饮片，在中药饮片市场和企业都以统货形式进行销售，导致前期药材的等级划分不能有效应用于实际临床，未能“按质应用”，从而不能保证临床用药的安全有效。通过文献资料查阅，已有相关白术商品药材等级质量评价的研究报道[13]，但均以外观性状和部分质控指标为主要划分依据，然中药饮片属于特殊商品，其主要目的和价值在于治病救人，若没有相关的药效作支撑，中药饮片等级划分的结果将与作为药品的特殊价值和意义不相符。因此，在传统等级划分的基础上，结合相关的药效学试验进行考证，找到其中的共性规律，研究的结果更接近于实际临床，使中药饮片等级划分的依据更具有科学性和合理性。

中药材及中药饮片的等级划分多采用传统方法与现代科学方法相结合的分级方法，既可以为传统分级方法提供科学的现代科技支撑，也能满足分级方法简便、实用的行业需求。本实验将外观性状和药效学试验结果的有机结合起来，进行评价分析，从药效学角度对白术不同等级饮片进行研究，该方法为白术生品饮片的等级划分提供一定参考。同时，也为其他饮片的“按质论价”提供新的思路。由于收集样品数量有限，未来仍需进行更多批次的样品研究，以进一步丰富和完善白术生品饮片等级质量评价体系。