血清α-羟丁酸脱氢酶联合糖类抗原125检测在卵巢癌诊断中的应用价值△

李娇，樊冬梅，黄彦霞

郑州大学第三附属医院妇产科，郑州 450052

卵巢癌是发生于女性卵巢组织的恶性肿瘤，早期卵巢癌患者因缺乏特异性临床症状，起病较隐匿而难以及时确诊和治疗，超过50%的患者确诊时已发展为晚期卵巢癌，且伴有远处脏器转移，预后较差，5年生存率低[1-2]。因此，对卵巢癌进行早期诊断和及时干预至关重要。糖类抗原125（carbohydrate antigen 125，CA125）是目前临床上用于辅助诊断卵巢癌的血清肿瘤学标志物。研究显示，CA125单独检测诊断卵巢癌的特异度为81%～88%，但灵敏度较低，不足70%[3]。α-羟丁酸脱氢酶是乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）的同工酶，可反映机体血清中LDH1、LDH2的总体水平[5]。研究发现，白血病、肝癌、淋巴瘤患者血清中的α-羟丁酸脱氢酶水平明显升高，且在一定程度上可反映患者的预后情况[5-7]。目前关于α-羟丁酸脱氢酶在卵巢癌患者血清中的表达情况的报道较少，本研究对血清α-羟丁酸脱氢酶联合CA125检测在卵巢癌诊断中的应用价值进行探讨，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年6月至2019年6月于郑州大学第三附属医院就诊的卵巢癌患者为卵巢癌组。所有卵巢癌患者均经术后组织病理学确诊为上皮性卵巢癌，病理基本信息完整，患者术前均未采取放化疗等治疗措施，未合并心、肝、肾等急慢性疾病。共纳入40例卵巢癌患者，年龄27～64岁，平均（49.15±7.8）岁；国际妇产科联盟（International Federation of Gynecology and Obstetrics，FIGO）分期：Ⅰ～Ⅱ期19例，Ⅲ～Ⅳ期21例；分化程度：低分化9例，中分化11例，高分化20例；发生淋巴结转移15例，未发生淋巴结转移25例。选取35例卵巢良性病变患者为卵巢良性病变组，年龄27～61岁，平均（47.82±8.5）岁。选取40例同期进行体检的健康者为健康对照组，经体检均无卵巢类相关疾病，年龄27～67岁，平均（50.05±8.3）岁。3组研究对象的年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 检测方法

抽取全部研究对象的清晨空腹外周静脉血5 ml于抗凝管中，常温下离心，收集上层血清，置于-80℃冰箱中保存备用。采用酶联免疫吸附（enzyme-linked immunoreaction，ELISA）法检测血清α-羟丁酸脱氢酶和CA125水平。所有研究对象进行血清CA125和α-羟丁酸脱氢酶水平测定时，均设置3个复孔，最终数值取3个复孔的平均值。血清CA125水平检测试剂盒由北京博迈斯科技发展有限公司提供，血清α-羟丁酸脱氢酶水平检测试剂盒由北京九强生物技术股份有限公司提供。所有操作均严格按照ELISA试剂盒说明书中的步骤进行，血清肿瘤标志物水平的检测均于本院检验科完成。

1.3 统计学方法

采用SPSS 22.0软件对数据进行统计学分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，两组间比较采用独立样本t检验；计数资料以例数和率（%）表示，组间比较采用χ2检验；采用受试者工作特征（receiver operator characteristic，ROC）曲线和曲线下面积评价血清CA125、α-羟丁酸脱氢酶单独及联合检测在卵巢癌中的诊断效能。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清CA125、α-羟丁酸脱氢酶水平的比较

卵巢癌组、卵巢良性病变组和健康对照组患者的血清CA125水平分别为（60.27±16.71）、（46.97±11.82）、（30.55±14.81）U/ml。卵巢癌组和卵巢良性病变组患者的血清CA125水平均高于健康对照组受试者，差异均有统计学意义（t=8.099、5.126，P＜0.05）；卵巢癌组患者的血清CA125水平高于卵巢良性病变组患者，差异有统计学意义（t=3.925，P＜0.05）。卵巢癌组患者、卵巢良性病变组患者和健康对照组受试者的血清α-羟丁酸脱氢酶水平分别为（147.12±37.76）、（115.62±19.22）、（95.62±31.45）U/L。与对照组相比，卵巢癌组和卵巢良性病变组患者的血清α-羟丁酸脱氢酶水平均高于对照组受试者，差异均有统计学意义（t=6.364、3.210，P＜0.05）；卵巢癌组患者的血清α-羟丁酸脱氢酶水平高于卵巢良性病变组患者，差异有统计学意义（t=4.453，P＜0.05）。

2.2 血清α-羟丁酸脱氢酶水平与卵巢癌患者病理特征的关系

不同分化程度、FIGO分期和淋巴结转移情况的卵巢癌患者的血清α-羟丁酸脱氢酶水平比较，差异均有统计学意义（P＜0.01）。分化程度低、FIGO分期高、有淋巴结转移的卵巢癌患者的血清α-羟丁酸脱氢酶水平较高。（表1）

表1 卵巢癌患者血清α-羟丁酸脱氢酶水平与病理特征的关系（n=40）

2.3 血清α-羟丁酸脱氢酶联合CA125检测对卵巢癌的诊断效能

ROC曲线分析结果显示，血清α-羟丁酸脱氢酶联合CA125鉴别诊断卵巢癌与卵巢良性病变的ROC曲线下面积为0.834（95%CI：0.743～0.924），灵敏度和特异度分别为85.46%和90.02%（图1）。血清α-羟丁酸脱氢酶联合CA125检测鉴别诊断卵巢癌与健康者的ROC曲线下面积为0.958（95%CI：0.919～0.997），灵敏度和特异度分别为89.47%和95.83%（图2）。

图1 血清α-羟丁酸脱氢酶联合CA125检测诊断卵巢癌和卵巢良性病变的ROC曲线

图2 血清α-羟丁酸脱氢酶和CA125单独及联合检测诊断卵巢癌和健康者的ROC曲线

3 讨论

LDH是无氧糖酵解和糖异生中的关键酶，在多种恶性肿瘤患者的血清中呈高表达[9-10]。α-羟丁酸脱氢酶作为反映机体血清中LDH1和LDH2总体水平的LDH同工酶，在心肌组织中的含量较高，既往研究多认为其与如急性心肌梗死、慢性心力衰竭等多种心脏性疾病的发病机制密切相关[11-12]。近年来，研究发现，α-羟丁酸脱氢酶在其他恶性肿瘤的发病机制中发挥着重要作用[6-8]，但目前国内关于α-羟丁酸脱氢酶与卵巢癌的相关性的研究报道较少。为了排除心脏性疾病对本研究结果的影响，本研究所纳入的3组研究对象均无心脏疾病，通过对所有研究对象的血清α-羟丁酸脱氢酶水平进行检测发现，卵巢癌患者血清α-羟丁酸脱氢酶水平高，提示高水平的α-羟丁酸脱氢酶与卵巢癌有一定关系，主要原因是肿瘤细胞在局部组织中的代谢速度加快，发生增生和破坏的速度均较正常细胞快，因此，卵巢癌一旦发生，肿瘤细胞内的酶迅速释放至血液，引起血清α-羟丁酸脱氢酶水平升高。通过分析卵巢癌患者的血清α-羟丁酸脱氢酶水平与病理特征的关系发现，肿瘤细胞分化程度越低、临床分期越高和有淋巴结转移时，卵巢癌患者的血清α-羟丁酸脱氢酶水平均升高，而肿瘤细胞分化程度、临床分期及有无淋巴结转移均是卵巢癌患者术后不良预后的重要影响因素[13-15]，因此，α-羟丁酸脱氢酶水平也可反映卵巢癌的病情严重程度，为卵巢癌的病情评估提供依据。

早期（Ⅰ～Ⅱ期）卵巢癌患者的5年生存率可达70%～90%[16-17]，尽早确诊和及时治疗对延长卵巢癌患者的中位生存时间具有重要意义。CA125是广泛用于诊断卵巢癌的血清肿瘤标志物，特异度可，但灵敏度有时不理想，尤其在早期卵巢癌及临床症状不典型时的灵敏度较低。Duffy等[17]发现，因早期卵巢癌的病灶较为完整或肿瘤脱落的抗原相对较少，早期卵巢癌患者的血清CA125水平相对于晚期卵巢癌患者较低，血清CA125水平在早期卵巢癌患者中的检出率较低，诊断Ⅰ期卵巢癌的灵敏度仅为50%左右。因此，临床上亟需一种灵敏度和特异度均较高的用于诊断卵巢癌的血清肿瘤标志物。本研究结果显示，卵巢癌患者的血清α-羟丁酸脱氢酶水平较高，而高水平的α-羟丁酸脱氢酶是其作为卵巢癌血清肿瘤学分子标志物的基础；ROC曲线分析发现，在卵巢癌、卵巢良性病变、健康者的鉴别诊断方面，α-羟丁酸脱氢酶单独检测的曲线下面积、灵敏度和特异度均高于CA125，但差异无统计学意义（P＞0.05）；然而，与CA125单独诊断卵巢癌相比，α-羟丁酸脱氢酶联合CA125检测诊断卵巢癌的曲线下面积、灵敏度和特异度则更高。

综上所述，血清α-羟丁酸脱氢酶高表达可能参与了卵巢癌的发病机制，且可反映卵巢癌患者的病情严重程度，α-羟丁酸脱氢酶联合CA125检测在卵巢癌中的诊断效能较高，尤其对早期卵巢癌的鉴别诊断效能明显高于CA125单独检测，为卵巢癌的筛查提供理论依据。本研究存在的不足之处是纳入样本量较少，且为横断面研究，今后仍需扩大样本量对此结论进行验证，进一步开展大型队列研究探讨α-羟丁酸脱氢酶高表达与卵巢癌预后的关系。