妊娠晚期B族链球菌感染孕妇阴道微生物菌群分析

张萍萍 孙素玉 沈旭娜

1.浙江省温州市第六人民医院(325000)2.浙江省温州市中心医院

健康女性的阴道和直肠中包含乳酸杆菌、大肠埃希菌、B族链球菌(GBS)等多种细菌，而且随着女性年龄的增长，微生物种群会出现变化和接替[1]。GBS常寄生于人体的下消化道及泌尿生殖道，属于条件致病菌[2]。在20世纪70年代，是围产期母婴感染的主要致病菌之一[3],也是婴幼儿败血症和脑膜炎最常见的致病菌。本研究以妊娠晚期孕妇GBS感染为例，探求阴道微生物与之关系及可能影响。

1 资料与方法

1.1 研究对象及分组

收集2014年8月-2018年5月本院就诊妊娠晚期孕妇80例作为研究对象，根据阴道分泌物检验结果将GBS感染阳性孕妇设为观察组(24例)，阴性孕妇设为对照组(56例)。纳入标准：妊娠晚期；心肺功能健全，无全身性疾病；知情并同意进行带菌状况检查；标本采集前一周未使用抗生素。排除标准：多胎，合并其他生殖道感染者；合并慢性肾炎，高血压，糖尿病史者；急性感染。本研究经本院伦理委员会审批。

1.2 研究方法

采集研究对象孕36～37周阴道分泌物，检查阴道微生态及GBS感染。依据曾志铭等提出的通过优势菌菌群密集度和多样性分布≥Ⅱ级、优势菌为革兰氏阳性杆菌、病原微生物阴性评价阴道菌群的微生态，各指标中有一项异常则为微生态失调[4]，阴道PH>4.5为异常。阴道分泌物采集及细菌培养：将1根无菌阴道棉拭子放置于阴道下1/3处旋转一周后，再将其放置于肛门周围再旋转一周。将棉拭子置于Amies无碳运送培养基，室温下放入微生物室进行肉汤培养基增殖，培养18h后将其接种到大豆酪蛋白琼脂(TSA)Ⅱ5%SB培养基中培养与细菌鉴定。阴道清洁度检测：用无菌棉拭子采集分泌物涂片并进行革兰染色，在高倍显微镜下寻找检查白假丝酵母菌、滴虫、加德纳菌等，清洁度判断严格遵守《全国临床检验规范》[5]。细菌性阴道病(BV)检测采用唾液酸酶法。对过氧化氢(H2O2)、白细胞酯酶(LE)、唾液酸苷酶(SnaSe)、脯氨酸氨基肽酶(PIP)、乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)阳性率分别采用阴道分泌物六联检试剂盒检测[6-7]。

1.3 统计分析

2 结果

2.1 一般资料比较

两组年龄、孕周、孕次、体重、产次等比较无差异(P>0.05)。见表1。

表1 两组一般资料比较

2.2 两组阴道PH值和清洁度比较

观察组阴道pH值异常率(91.7%)高于对照组(46.2%)(P<0.05)，两组阴道清洁度Ⅰ～Ⅱ(79.2%、44.6%)，Ⅲ～Ⅳ(20.8%、1.9%)无差异(P>0.05)。

2.3 妊娠晚期GBS感染与生殖道其它病原体感染的相关性

真菌阳性和细菌性阴道病者中GBS检出率高于阴性者(P<0.05)；滴虫阳性和阴性孕妇GBS检出率比较无差异(P>0.05)。见表2。

表2 妊娠晚期GBS感染与其他微生物检出相关性分析

2.4 两组阴道分泌物成分的比较

H2O2、LE、PIP、SnaSe、NAG阳性率对照组均高于观察组(P<0.05)，见表3。

表3 两组阴道分泌物检测阳性比较[例(%)]

3 讨论

一般情况下，阴道中其他微生物与阴道乳酸杆菌并存，处于一种动态平衡状态；但当阴道中乳酸杆菌减少时，导致阴道微生态平衡被打乱，出现条件致病菌感染。GBS为条件致病菌，易发生机会感染[8]。当阴道微生态失衡时，GBS在阴道内大量繁殖，导致生殖道感染、羊膜炎、早产和胎儿死亡等一系列不良妊娠结局发生。既往报道显示，欧美等发达国家妊娠晚期孕妇发生GBS感染率为5.00%～35.00%[9]。尽管美国和很多欧洲国家采用了适当的预防措施，GBS仍然是发达国家婴儿肺炎和死亡的主要原因。我国孕妇GBS阳性率为5.00%～30.00%[10]。既往研究证实，妊娠晚期孕妇易发生GBS感染，可能与以下几个方面有关：①阴道乳酸浓度增加、上皮细胞的糖原含量增加，有益于耐酸微生物菌群的生长繁殖，进而使阴道内环境微生态失衡；②阴道黏膜通透性增加、充血、甚至水肿，易引起阴道黏膜损伤，利于病原菌入侵；③机体免疫功能下降，增加了阴道感染的发生；④GBS能够通过细菌蛋白水解酶及炎症细胞吞噬作用直接侵袭机体[11-13]。如母体感染GBS可通过垂直传播对新生儿造成影响，有研究表明GBS感染孕妇中2/3新生儿携带GBS[14-16]。

GBS被认为是微生物群的一个组成部分和机会微生物，而不是典型的病原体，因为它不会扭曲女性生殖道正常菌群的组成[17-20]。当前限制新生儿感染最有效的方法是对所有孕妇进行GBS携带筛查，实施有针对性的围产期抗生素预防。

本研究结果显示，阴道PH值对GBS感染有一定影响。真菌阳性和细菌阳性孕妇GBS检出率均高于阴性孕妇；滴虫阳性与阴性组GBS检出率未见差异。对照组中H2O2、LE、PIP、SnaSe、NAG阳性率均高于观察组。近年来发现阴道内乳酸杆菌能直接产生酸性物质，例如酸素和乳酸素B可抑制其他细菌生长并调节自身生长，乳酸杆菌可以合成过氧化氢进而抑制其它细菌。乳酸杆菌在维持阴道微生态平衡上起着至关重要的作用。GBS通过抑制乳酸杆菌生长使阴道PH值增高促进阴道假丝酵母菌繁殖。

综上所述，阴道内各微生物之间存在着相互制约并存的关系，阴道微生物对晚期妊娠妇女GBS感染的影响会一直持续，阴道乳杆菌对阴道正常菌群的调节有重要意义。本研究的局限性在于样本数据过少，代表性相对较低。作为初步研究，也为阴道微生物对GBS感染影响深入研究提供参考。