呼吸窘迫综合征早产儿血清NT-proBNP BMP-7及TGF-β1水平变化的临床研究

戚昌丽，张雅琴，李 敏，王文慧

(1.海南省琼海市人民医院儿科，海南 琼海 571400 2.海南省妇幼保健院儿科，海南 海口 570311)

早产儿呼吸窘迫综合征(Respiratory Distress Syndrome，RDS)是由于肺泡表面活性物质缺乏或失活引起的肺泡进行性萎陷，是早产儿最常见的呼吸障碍性疾病之一[1]。RDS早产儿出生后4～12h内即出现进行性呼吸困难、呻吟、发绀、吸气三凹征，严重者发生呼吸衰竭甚至死亡[2]。临床研究表明，多种细胞因子均参与了肺泡局部上皮组织的氧化应激代偿障碍、炎症损伤等，推进RDS的发生发展[3]。血浆氨基末端脑钠肽前体(Amino-terminal Pro-brain natriuretic peptide，NT-proBNP)是由B型利钠肽前体(Pro-brain natriuretic peptide，proBNP)裂解所产生的无活性产物，体内较为稳定，可以敏感且特异地反映左心室功能变化[4]。骨形态发生蛋白-7(Bone morphogenetic protein-7，BMP-7)与转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1，TGF-β1)均属于TGF-β超家族的重要成员，可以激活下游多种炎症因子的表达，参与多种疾病的发生发展[5]。临床研究表明，RDS早产儿血浆NT-proBNP、BMP-7和TGF-β1水平偏高，且与病情发展密切相关。本研究分析了RDS患者血清中NT-proBNP、BMP-7和TGF-β1的水平变化与疾病发展之间的关系，旨在明确其在RDS治疗和预后中的应用价值。

1 资料与方法

1.1一般资料：选择2016年4月到2018年4月在本院确诊的106例RDS早产儿，男55例，女51例，胎龄28～35周，体重1000～2230g，顺产58例、剖宫产48例。纳入标准：均符合《实用新生儿学》第4版早产儿RDS诊断标准[6]：①胎龄28～35周；②出生12h内即出现呼吸急促、呼气性呻吟、吸气三凹征和发绀，且症状进行性加重；③胸片表现为两肺野透亮度普遍降低、出现磨玻璃样b病变和支气管充气征等RDS特征性改变，均获得患者及其家属知情同意，本研究经医院医学伦理委员会审核。排除标准：母亲有吸烟史者；合并肺部感染或其它影响肺功能的呼吸系统疾病者；合并明显肝肾功能不全、心、脑血管疾病者；父母或兄弟姐妹有哮喘或特应性鼻炎家族史者。根据胸片疾病严重程度将患儿分为4级：Ⅰ级19例，Ⅱ级41例，Ⅲ级35例，Ⅳ级11例。选择同期住院、同性别且胎龄相近的非RDS早产儿53例为对照组，男27例，女26例，胎龄28～35周，体重875～2240g，顺产58例、剖宫产48例，两组胎龄、性别、体重、分娩方式等一般资料无显著差异(P>0.05)，具有可比性。

1.2试剂与仪器：TGF-β1酶联免疫吸附(ELISA)检测试剂盒，购自上海富众生物科技发展有限公司；BMP-7 ELISA检测试剂盒，购自上海研晶科技有限公司；罗氏e602电化学发光分析系统及相应配套试剂、定标品购自罗氏公司；多功能酶标检测仪，由Bio-Rad公司提供；高速离心机，由Beckman Coulter公司提供。

1.3检测指标：早产儿出生后1d内，用加有分离胶的真空采血管采集静脉血2～3mL，离心(3000r/min，5min)，取血清于-80℃冰箱保存。采用ELISA检测所有血清样品中BMP-7和TGF-β1的水平，采用罗氏e602电化学发光分析系统测定NT-proBNP的水平，严格参照试剂盒说明操作。

2 结 果

2.1RDS早产儿血清中NT-proBNP、BMP-7及TGF-β1表达水平：与对照组相比，RDS早产儿血清中BMP-7、NT-proBNP和TGF-β1的表达水平明显升高，差异具有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 RDS早产儿血清中NT-proBNP BMP-7和TGF-β1表达水平

2.2不同病情程度RDS早产儿血清中NT-proBNP、BMP-7和TGF-β1的表达：与病理分级为Ⅰ～Ⅱ级RDS早产儿相比，Ⅲ～Ⅳ级RDS早产儿血清BMP-7、NT-proBNP和TGF-β1的表达水平明显升高，差异具有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 不同病情程度RDS早产儿血清中NT-proBNP BMP-7和TGF-β1的表达

2.3NT-proBNP、BMP-7和TGF-β1水平与RDS早产儿病情程度的相关性分析：相关性分析结果显示，NT-proBNP、BMP-7和TGF-β1均与RDS早产儿病情严重程度为正相关关系(r=0.402，P=0.000；r=0.311，P=0.018；r=0.313，P=0.015)，相关性具有统计学意义(P<0.05)。

2.4NT-proBNP、BMP-7和TGF-β1水平对RDS早产儿诊断价值：NT-proBNP诊断RDS早产儿的截点值为3655.92ng/L，灵敏度为88.7%，特异度为3.8%，AUC为0.985；BMP-7诊断的截点值为44.85ng/L，灵敏度为63.2%，特异度为11.3%，AUC为0.829；TGF-β1诊断的截点值为36.73g/L，灵敏度为81.1%，特异度为17.0%，AUC为0.829；BMP-7联合TGF-β1诊断的灵敏度为89.6%，特异度为15.1%，AUC为0.934，见图1、表3。

图1 NT-proBNP、BMP-7和TGF-β1水平对RDS患儿诊断价值

表3 NT-proBNP BMP-7和TGF-β1水平诊断RDS的ROC特征

3 讨 论

RDS是由于早产儿肺发育尚未成熟、各系统功能均不完善、肺表面活性物质缺乏或失活所导致的呼吸障碍性疾病，其长期存在，还可以并发心力衰竭等严重并发症，临床远期预后较差。目前，RDS最常用且有效的治疗措施是呼吸机通气和PS替代治疗，但这些治疗措施易导致肺损伤，影响患儿肺功能结局。研究RDS发病机制，进行早期诊断和正确干预是提高早产儿RDS治愈率，改善肺功能结局的关键。本研究中，NT-proBNP对RDS具有较高的诊断价值，提示NT-proBNP参与了RDS发生发展，临床可作为其诊断标识物。NT-proBNP是由心脏分泌的肽类激素，当机体容量及压力负荷异常增加时，心肌细胞会分泌proBNP再裂解产生BNP及NT-proBNP，BNP是一组有生物学活性的天然激素，具有较强的排钠、利尿、舒张血管等功能；NT-proBNP无生物学活性，具有更长的半衰期，体内较稳定，临床常用于心力衰竭的诊断及预后评估。本研究发现NT-proBNP在RDS患者中表达水平明显升高，且其水平升高与疾病严重程度呈正相关。陆俊秀等[7]的研究发现，RDS早产儿血清中的NT-proBNP水平明显高于正常早产儿，且其水平会随着病情的严重程度而增加，本研究结果与其一致，进一步证实NT-proBNP参与了RDS的发生发展，提示RDS早产儿可能伴随心功能下降，且随着RDS病情发展，心功能下降越明显，存在并发心力衰竭的风险，临床应及早进行干预治疗，保护心功能损伤。

本研究中，BMP-7联合TGF-β1对RDS具有较高的诊断价值，临床可同时检测BMP-7和TGF-β1作为诊断RDS早产儿的依据。BMP-7与TGF-β1均为TGF-β超家族的成员，可以促进下游细胞炎症因子白介素-6或C反应蛋白的激活，引起局部肺泡上皮间质的炎症性损伤。本研究发现，BMP-7和TGF-β1在RDS患者中表达水平明显升高，且其表达量与RDS患者疾病严重程度呈正相关。TGF-β1是一组多功能的细胞因子，可以调节细胞生长和分化，参与调控肺炎发生和肺纤维化过程。赵文飚等[8]的研究发现，TGF-β1参与调控急性RDS后的肺纤维化，与RDS发生发展密切相关，与本研究结果一致，TGF-β1可诱导产生大量炎症因子促进成纤维细胞增生，还可以上调α-平滑肌肌动蛋白以及胶原蛋白等的表达，进一步导致肺纤维化病变，提示RDS早产儿伴随肺纤维化病变，临床可根据TGF-β1水平，评估肺纤维化损伤程度，及时调整治疗方案。BMP-7是重要的细胞间质因子，可以调控动物或人体间充质细胞增殖分化为神经组织、骨、软骨、肌腱等，还可以参与肺泡组织纤维化等病理过程。临床研究表明[9]，在肺过敏性炎症反应中，BMP-7可以有效拮抗TGF-β1的致纤维化的作用，达到保护肺纤维化损伤的作用。李小琴等[10]的研究发现，在RDS早期，BMP-7会随着TGF-β1增加而代谢性增加，在RDS后期，BMP-7随着TGF-β1水平升高呈降低趋势，本研究结果与其一致，提示在RDS早产儿的治疗中可以补给外源性的BMP-7拮抗TGF-β1引起的纤维化病变，有望成为RDS早产儿治疗的新靶点。

综上所述，RDS患者血清中NT-proBNP、BMP-7和TGF-β1表达量显著增加，对RDS具有较高的诊断价值，且其表达量与疾病发展严重程度呈显著正相关，其水平越高，疾病越严重，临床可作为其诊断和预后的标识物。本研究不足之处为样本量较少，但本研究为临床RDS的诊断和预后提供了一定的理论依据。