吡蚜酮、丁醚脲QuECheRs 方法的优化分析

吴琳

梧州市食品药品检验所 广西梧州 543000

经查文献，吡蚜酮的分子结构的平面化程度比较高（含有环状平面结构），净化过程中具有平面层状结构的GCB 对平面化合物具有吸附作用，净化剂中含有GCB 对吡蚜酮有吸附作用，进而造成加标回收不理想，因此设计实验方案时，应做净化剂是否含GCB 的比对；丁醚脲易水解、见光易分解，会生成丁醚脲-酰胺、丁醚脲- 脲和丁醚脲-甲酰胺3 种分解产物，在预实验中加入丁醚脲的降解产物丁醚脲- 脲和丁醚脲-甲酰胺离子进行监测，在ADD 中都发现丁醚脲- 脲和丁醚脲-甲酰胺的存在；因此实验过程中应避光，尽可能简化实验步骤[1]。

1 实验过程

1.1 实验设计

设置了①2．5g NaCl、②2．5g MgSO、③2．5g MgSO4+0.5g NaCl3 种提取盐包，A（150mg MgSO4+50mgPSA）、B（150mg MgSO4+50mgPSA+50mg GCB）2 种净化剂；然后分别对盐包加净化剂进行了六组实验。

1.2 实验步骤

1．00g 茶叶样品→+5mL 超纯水+10mL 乙腈→旋涡振荡3min →加入提取盐包→旋涡2min，9500r/min 离心5min →取上清液1．00mL 到净化管中→旋涡振荡1min，15000r/min 离心4min →移取上清液0．50mL+0．50mL 水，混合均匀，过滤，上机。

对照S 用空白样品按以上步骤提取所得基质配制，上机浓度为100ng/mL；加标回收实验，将配制好的丁醚脲、吡蚜酮储备液加入到空白样品中，同样按照上述步骤进行操作[2]。

1.3 实验结果

（1）加入GCB 吸附剂效果图如下，茶叶中的色素基本上被吸附了。

（2）未加GCB 吸附剂的效果图，叶绿色未被吸附

（3）回收率实验结果如下：

项目 加标回收率结果/%①+A ②+A ③+A ①+B ②+B ③+B吡蚜酮 10.38 66.63 24.47 0.83 4.04 2.09 10.26 68.31 24.26 1.08 4.11 2.03丁醚脲 69.99 72.78 97.64 97.05 75.20 67.72 67.52 74.63 98.14 96.47 76.25 65.93

1.4 结果讨论

通 过 以 上 结 果 可 看 出， 净 化 剂B（150mg MgSO4+50mgPSA+50mg GCB）中含有GCB，吡蚜酮的回收率为0．95%-4．07%，回收率非常低，说明GCB 对具有平面结构的吡蚜酮确实有吸附作用，净化剂A（150mg MgSO4+50mgPSA）中未含GCB，回收率有较大提升，其中②+A（以2．5g MgSO4 提取，用150mg MgSO4+50mgPSA 净化）回收率：67．47%较为理想；

丁 醚脲在这6 种提取 方法的回收 率：66．83%-97．89%，其 中 ③+A（ 以2．5g MgSO4+0．5g NaCl 提 取， 用150mg MgSO4+50mgPSA 净 化）、 ①+B（ 以2．5g NaCl 提 取， 用150mg MgSO4+50mgPSA+50mgGCB 净化）的提取方法较为理想，均有95%以上。

2 吡蚜酮实验再优化

2.1 优化过程

根据以上实验，GCB 吸附剂对吡蚜酮有吸附作用，那在净化剂中加入C18 是否会对吡蚜酮的加标回收率有影响，以及实验最后一步净化液与水1：1 稀释是否存在基质效应对实验结果有影响[3]。在前面优化好的提取条件（以2．5g MgS04 盐包提取）基础上，加入C18 对吡蚜酮回收率进行考察，同时最后一步分别以净化液与水（1:1）、（1:4）稀释，混合均匀，上机，考察方案如下：

A：1 5 0 m g M g S O 4+5 0 m g P S A；B 1 5 0 m g MgSO4+50mgPSA+50mg C18

最后一步取净化液+水稀释比例：

（1）（1:1）取上清液500μL+500μL 水混合均匀；

（2）（1:4）取上清液200μL+800μL 水混合均匀。

2.2 考察结果

项目 加标回收率结果/%A（1:1） B（1:1） A（1:4） B（1:4）吡蚜酮 50.03 66.67 67.89 81.12 51.20 69.12 65.70 80.36

2.3 结果讨论

根 据 以 上 实 验 结 果， 净 化 剂B（150mg MgSO4+50mgPSA+50mg C18）组的回收率更优于净化剂组A（150mg MgSO4+50mg PSA），加 入C18 对 吡 蚜 酮 的 回 收率有所提升；最后一步的稀释（1:4）较（1:1）的稀释比例更优，即B（1:4）方 案（以2．5g MgS04 盐 包 提 取，用150mg MgSO4+50mgPSA+50mg C18 净化，取净化液200μL+800μL水混合均匀，上机）回收率达到80．7%。

3 结语

吡蚜酮实验，GCB 吸附剂会对平面结构物质有吸附作用，所以在净化剂中不能加入GCB 吸附剂，最后一步稀释过程选择用（1：4）取上清液200μL+800μL 水混合均匀，上机，尽可能减少基质效应。