92例新冠肺炎病毒感染患者早期外周血白细胞形态分析

朱传新，周玉平，何 艳，周 琴（咸宁市第一人民医院，湖北咸宁437000）

严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)感染引起的COVID-19 疫情发展迅速，4月13日全球累计确诊184 万，严重威胁到了人民的生命安全与身心健康[1]。COVID-19 是目前全球面临的一种新发传染病，其来源、病理机制、治疗策略等诸多方面尚未完全明了，在疾病的发生发展和治疗过程中，白细胞检查对于监测患者的疾病变化及治疗效果的评价非常重要，多个诊治方案均要求定期对患者进行白细胞检查。全自动血细胞分析仪的广泛使用极大地提高了白细胞计数的工作效率，由于方法学的局限性和白细胞形态的多样性, 仍需配合血涂片白细胞形态学检验, 以提高血液检查的准确性[2]。本研究通过对比COVID-19 组、非COVID-19 组的外周血白细胞分类和形态特征，为临床早期诊断及治疗新冠肺炎提供依据。

1 材料与方法

1.1 研究对象 回顾性收集2020年1月26日～2月26日我院发热门诊收入院的所有疑似COVID-19的病毒性肺炎患者351 例。收集患者一般临床资料，所有患者进行血液分析、外周血细胞形态、胸部CT、呼吸道咽拭子甲型流行性感冒（流感）和乙型、副流感病毒抗原筛查，单纯疱疹病毒、呼吸道合胞病毒等病毒抗体IgM 检测。患者均采鼻咽拭子送咸宁市疾病控制中心进行新型冠状病毒（SARSCoV-2）核酸检测各2 次。依据《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案（试行第六版）》[3]最终351 例中92 例确诊为COVID-19 患者（COVID-19 组）及259 例为非COVID-19 的病毒性肺炎患者（非COVID-19 组）。经对比，两组间发病天数无差异的情况下男女所占比例、发病年龄和胸部CT 结果均有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组患者一般情况比较

1.2 仪器和试剂 血细胞分析仪为深圳迈瑞生物医疗电子服份有限公司生产的全自动血液细胞分析仪，试剂为其配套试剂。血细胞形态的显微镜为南京康是福科技实业有限公司生产的Olympus BX41TF 型，染色液为珠海贝索生物技术有限公司生产的瑞氏染色液。

1.3 方法 收集351 例患者的年龄、性别、胸部CT 病毒性肺炎表现情况，采静脉EDTA-K2抗凝血查血细胞分析，检测白细胞计数（WBC）、中性粒细胞比率（NEU%）、嗜酸性粒细胞比率（EOS%)、嗜碱性粒细胞比率（BAS%）、淋巴细胞比率（LYM%）和单核细胞比率（MONO%），推片染色镜下观察血细胞形态，计算异常淋巴细胞比率（异淋%）、中性粒细胞杆核比率（Nst%）、中性粒细胞杆核与分叶核之比（Nst/Nsg）。

1.4 统计学分析 采用SPSS 20.0 软件进行统计分析。连续性变量行方差齐性检验，组间比较采用独立样本t检验；非正态分布资料以M(P25,P75)表示，采用秩和检验。分类变量用n（%）表示，组间比较采用χ2检验。双侧P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者白细胞分类比较 见表2。与非COVID-19 组相比，COVID-19组异淋%，NEU%，Nst%，Nst/ Nsg 较高，EOS%，LYM% 较低，差异均有统计学意义（t为4.037～61.209，均P＜0.05）；MONO%，BAS%差异无统计学意义（t为3.008，2.534；P为0.257，0.360）。

表2 两组患者白细胞分类比较[M（P25，P75）]

2.2 两组患者白细胞形态的比较 见表3。与非COVID-19 组相比，COVID-19 组白细胞间接计数较低，NEU，EOS，LYM，异淋，MONO 形态异形多样且明显。

表3 两组患者白细胞形态的比较

3 讨论

SARS-CoV-2 主要攻击呼吸系统，其中肺是主要的受损器官，心、肝、肾等器官可能没有受SARS-CoV-2 攻击或者不是SARS-CoV-2 主要攻击器官，但这些器官相关白细胞检查对于疾病的进展程度及治疗的评价非常重要[4]。本研究对比了COVID-19 患者、非COVID-19 患者的年龄、性别和胸部CT 病毒性肺炎表现，结果表明，与非COVID-19 组相比，COVID-19 组男性比例偏高，年龄偏大，胸部CT 病毒性肺炎表现比例偏高，差异均有统计学意义（χ2/t为7.027～21.551，均P＜0.05）。说明老年男性患新冠肺炎发病率较高，随着年龄增长，机体抵抗力和免疫力下降，患高血压、糖尿病等慢性疾病增多，男性中吸烟及饮酒的比例远高于女性，女性雌性激素对血管内皮保护作用和天然抗病毒能力强，因此老年男性肺部情况较差，较容易感染SARS-CoV-2[5]。SARS-CoV-2 感染患者传染性强，传播速度快，胸部CT 病毒性肺炎表现早，明显，进展快[6]。COVID-19 患者血细胞分析中白细胞分类常出现异常结果报警，需进行血涂片白细胞形态显微镜复检，白细胞手工分类、阅片能直观、准确、快速反映白细胞数量和质量[7]。NEU 在白细胞中含量最高，占50%～70%，是吞噬并杀死入侵人体病毒的第一道防线。LYM 占20%～40%，参与机体的细胞和体液免疫功能，是病毒感染的效应细胞。感染SARS-CoV-2 患者产生一系列免疫反应,致炎因子明显增多，NEU，Nst 增多，免疫功能受损，LYM 明显减少[8]。Nst，Nst/ Nsg，NEU 是最简单、方便、灵敏反映机体炎症状态指标[9]。本研究发现COVID-19 患者早期白细胞减少或正常，而Nst 增高，NEU 出现核左移。随病情进展Nst%，Nst/ Nsg ，NEU%逐渐增大，急性期大于恢复期。COVID-19 组LYM%＜20%占32%，LYM%20～30% 占63%，随着病情进展，COVID-19 组LYM%进行性下降，甚至降到1%，异淋%增高[10]。COVID-19 患者早期EOS%下降尤为明显[11-12]。92 例患者中40 例（43.5%）EOS%为0，而非COVID-19 组，仅7%出现为0。与非COVID-19 组相比，COVID-19 组异淋%，NEU%，Nst%和Nst/ Nsg 较高，EOS%，LYM%较低，差异均有统计学意义（t为4.037～61.209，均P＜0.05）；MONO%，BAS%差异无统计学意义（t为3.008, 2.534,P为0.257, 0.360）。文献中尸检发现SARS-CoV-2直接攻击全身免疫系统，对白细胞破坏、毒性强，免疫攻击大和炎症风暴[13]。与非COVID-19 组相比，COVID-19 组白细胞间接计数较低，NEU, EOS, LYM，异淋、MONO 形态异形多样且明显。NEU 以杆核增多，核棘突2～3 个多见，胞浆颗粒大小不一；EOS 少见，可见胞膜破裂；淋巴胞体偏小，可见核质发育不平衡,颗粒深染粗大,核不规则, 有切迹,异淋细胞核易见切迹，以花瓣核异淋和裂隙核异淋为主；MONO 核不规则, 空泡变性明显，颗粒增粗。白细胞正常或偏少，LYM%,EOS%减少，LYM 核异形可能是一个潜在的可靠的实验室预测SARS-CoV-2感染的参数[14]。外周血白细胞分类和形态分析对新冠肺炎早期诊断有很大价值，值得临床借鉴。