严重冷凝集标本对血常规检测结果的影响分析

安立斌

（沈阳医学院附属第二医院，辽宁 沈阳 110000）

血常规为临床最为基本的一种血液检验方法，液体与有形细胞组成血液，采取血常规检验能够对血液当中的细胞成分进行检验，与此同时在血液当中存在三种功能存在差异的细胞，即：红细胞、白细胞以及血小板。通过血常规检测，进一步对血液细胞的数量变化及形态分布情况，对疾病进行分析判断[1]。在临床诊疗工作中，血常规检查是常规检测手段，能够为患者相关疾病患者的病情提供客观、科学的有效依据。近年来，临床研究表明：在临床血常规检测过程中，容易受到冷凝集干扰因素的影响。对于冷凝集素来说，属抗红细胞抗原的IgM抗体；当冷凝集素处于0～5 ℃条件下，会和人红细胞产生凝集作用，通过加温处理在超过25 ℃的情况下凝集会消除，当温度降低则凝集会再次出现，对患者的自身血清与红细胞根据比例混合之后，基于0～5 ℃的条件下，能够观察到凝集现象[2]。此外，国内有学者经研究表明，严重冷凝集标本会对血常规检测的结果产生很大程度的影响，因此便有必要采取有效处理方法，确保血常规检测结果的准确率[3]。鉴于此，本课题针对本次将我院于2017年1月至2018年1月收集的严重冷凝集血常规标本36份作为研究的对象（来自36例患者），其目的是分析探讨严重冷凝集标本对血常规检测结果的影响，具体研究成果如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：本次将我院于2017年1月至2018年1月收集的严重冷凝集血常规标本36份作为研究的对象（来自36例患者），均知情签署相关诊疗同意书，且均经医学伦理委员会审批通过；其中，男性20例、女性16例；年龄9～72岁，平均为（46.8±1.3）岁；疾病类型为：8例为肺炎支原体感染患者、8例为肝硬化患者、10例为自身免疫性溶血性贫血患者、7例为系统性红斑狼疮患者、3例为白血病患者。首次进血常规检测，结果显示存在显著异常的问题，仪器显示红细胞凝集，且获得血涂片证明。此外，因为严重冷凝集标本发生较少，所收集的标本在时间上存在差异，难以集中进行处理，所以在临床工作过程中针对这些严重冷凝集标本采取了及时检测的方法，并进一步对检测数据进行详细记录。

1.2 方法：针对本次36份严重冷凝集血常规标本，考虑到择优选择处理方法，因此采取了四种方法进行处理，起到对比的作用，包括：直接上机法，37 ℃水浴法，血浆置换法，预稀释法。具体检测方法步骤如下：①仪器及试剂的选取：本次在全自动血细胞分析仪方面，选择由日本SYSMEX公司生产的XN-1000型号全自动血细胞分析仪，同时配套相应的试剂及质控品。针对仪器需每天进行常规维护保养处理措施，对于高、中、低质控结果都在可控范围内。此外，选择使用珠海贝索生物技术有限公司生产的瑞氏染液，并使用美国BD公司生产的真空采血管。②初步处理：于清晨空腹状态，抽取患者外周静脉血2 mL，采血过程选择使用乙二胺四乙酸二钾抗凝真空采血管，进一步进行完全混匀处理；对每1例患者分别采集标本2管，然后选择上述提到的四种方法进行分别处理。③直接上机处理法：对每1例患者的2管标本采取直接上机检测，最终检测结果以平均值为标准。④37 ℃水浴处理法：选择当中的1管血标本，置入37 ℃水浴箱当中，0.5 h之后及时进行上机检测。

此外，采取上述方法对严重冷凝集标本进行检测处理过程中，还需进行血涂片的制作，然后使用瑞氏染色后镜检，对血细胞凝集有无彻底解除进行观察判断。

1.3 评价标准：比较四种处理方法的血常规指标水平情况，包括：①红细胞；②血红蛋白；③白细胞；④血小板；⑤红细胞压积（HCT）；⑥平均红细胞体积（MCV）；⑦红细胞平均血红蛋白量（MCH）；⑧红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）[4]。

1.4 统计学分析：本次使用统计学软件SPSS21.0处理本次涉及的计量数据，计量数据使用（）表示，并用t检验，P＜0.05表示两组数据具备明显差异，具备统计学意义。

2 结果

2.1 直接上机检测结果分析：对于严重冷凝集标本，在没有通过任何处理的情况下，采取直接上机检测方法，出现仪器提示红细胞凝集报警信号，其中红细胞直方图存在异常的大红细胞波峰。与37 ℃水浴法、血浆置换法、预稀释法比较，在红细胞与HCT两项指标方面均明显更低（P＜0.05）；红细胞与血红蛋白之间的比重存在显著差异，即判断为异常（P＜0.05）；对于MCV、MCH、MCHC三项指标，和其他三种处理方法比较则明显更高（P＜0.05）。此外，在镜下进行观测，发现血涂片存在大量红细胞显著聚集成团状，在标本管内壁经肉眼能够看到凝集颗粒，呈粗沙样。见表1、表2。

2.2 37 ℃水浴处理方法检测结果分析：血常规标本通过37实施的水浴处理方法在0.5 h之后进行及时上机检测，结果显示：仪器未发出警报信号，红细胞与HCT结果接近正常水平，但是MCH与MCHC两项指标水平与血浆置换法、预稀释法比较均显著更高（P＜0.05）。通过处理之后的血常规标本，经图片染色之后，通过镜检发现依然存在少量的红细胞聚集，在血常规标本管内壁，存在少量的凝集颗粒，呈现细沙样。见表1、表2。

2.3 血浆置换法与预稀释法结果对比分析：通过血浆置换法与预稀释法处理之后的标本，在红细胞凝集现象方面彻底消除，红细胞、血红蛋白、白细胞、HCT、MCV、MC、MCHC均接近正常水平；但是，血浆置换法基于操作期间有血小板丢失的ent存在，致使检测结果与预稀释法比较显著更低，两组数据差异具备统计学意义（P＜0.05）。见表1、下表2。

表1 四种方法的红细胞、血红蛋白、白细胞、血小板指标水平情况对比（，n＝36）

表1 四种方法的红细胞、血红蛋白、白细胞、血小板指标水平情况对比（，n＝36）

表2 四种方法的HCT、MCV、MC、MCHC指标水平情况对比（，n＝36）

表2 四种方法的HCT、MCV、MC、MCHC指标水平情况对比（，n＝36）

3 讨论

对于冷凝集素综合征来说，指的是因自身反应性红细胞在凝集的作用，同时受到外部温度下降等原因的影响，进一步诱发的以慢性溶血性贫血疾病为主要特征的疾病，或以微循环栓塞为主要特征的疾病[5-6]。经研究发现，大部分人的血清当中均具备冷凝集素，在效价上偏低，通常不会导致自身红细胞的凝集[7]。然而，基于特定病理条件下，如自身免疫性溶血性贫血或者多发性骨髓瘤等病理作用下，冷凝集素的效价便会呈现剧烈上升的现象，进而导致病灶的出现。值得注意的是，对于冷凝集素，如果具备比较高的效价，其血液在离体之后随着温度的下降，冷凝集素和红细胞抗原之间发生作用，会导致红细胞自身产生凝集反应，且此类凝集存在可逆的特点；如果温度上升到一定的高度，所凝集的红细胞便会发生自动解聚的现象。然而，如果冷凝集素的效价偏高，血常规标本就算处于37 ℃的水浴，然后经过半小时的处理，还是会存在红细胞平均血红蛋白量（MCH）和红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）水平偏离正常水平的情况，使血细胞分析仪的检测结果受到很大程度的影响；此次得出了与之较为相似的研究成果[8-9]。

近年来，国内有学者对严重冷凝集标本对血常规检测的结果影响进行分析，除直接上机进行血常规分析以外，还纳入了三种处理方法，即37 ℃水浴法和血浆置换法还有预稀释法，结果显示，37 ℃水浴法的效果不理想，但是血浆置换法和预稀释法的效果更为理想；最后，通过对比分析发现，血浆置换法和预稀释法比较，血浆置换法存在血小板丢失的问题，因此综合考虑选择预稀释法，从而使严重冷凝集标本得到有效处理，进一步使血常规检测的质量得到有效提高[10]。

在此次研究过程中，37 ℃水浴法、血浆置换法、预稀释法比较，预稀释法最优，该方法需在1：7预稀释条件下及时进行检测处理，结果显示能够很好地解决血浆置换法血小板丢失的问题，从而保证后续血常规检测结果的质量水平。综上所述：在临床中，针对严重冷凝集标本血常规检测方法较多，相对于直接上机法、37 ℃水浴法以及血浆置换法，预稀释法在操作上更为便捷，进一步更能确保血常规检测结果的准确率；因此，可择优选择预稀释法。