圈养东北虎血常规及血液生化指标的测定分析

万浩宏，刘俊卿，张萍，蓝婷英，陈龙，杨晓农*

（1.西南民族大学生命科学学院，四川 成都 610041；2.雅安碧峰峡野生动物园，四川 雅安 625000）

东北虎又称西伯利亚虎、阿穆尔虎［1］，主要栖息在人类干扰少、有蹄类猎物密度高的森林生态系统中［2］。是世界现存虎种中体型最大、分布最北的亚种［3］，属国家Ⅰ级重点保护动物［4］。目前，关于虎属血常规和血液生化指标的研究多集中在不同虎亚种之间的横向比较，可能存在不同的缺点，如研究对象的数量较少［5-6］，且多为幼体［7-9］，或者实验时间长达数年［10］，或者检测对象仅为血常规或者血液生化指标当中的几项［7-11］。由于技术限制［10，12-15］，以前的测定数据已经不能适应现代动物园对圈养东北虎饲养繁殖、疾病诊疗的需要。

本试验以15 只圈养于雅安碧峰峡野生动物园的健康东北虎为研究对象，研究圈养东北虎的血常规和血液生化指标与其年龄、性别之间的相关性，并初步筛选出东北虎血常规和血液生化指标的参考范围，对今后圈养东北虎提供饲养繁殖、疾病诊疗等方面的参考，也为野生东北虎的救护起一定的参考作用。

1 材料与方法

1.1 试验动物 圈养于雅安碧峰峡野生动物园虎山区内，均为纯种的东北虎子一代和子二代。选取营养状况良好、无眼观病理状态、无妊娠情况的东北虎为试验动物。其中，成年东北虎均为一年龄以上的雄性东北虎3 只；亚成体东北虎为一月龄至一年龄的子二代东北虎，雄性7只，雌性5只。

1.2 试验时间与地点 于2018 年4 月10～17 日在雅安碧峰峡野生动物园虎山区内完成血液采样，于4月18日送至雅安市第一人民医院检验科进行分析测定。

1.3 采样方法 在化学保定的情况下用75.0%医用酒精棉球消毒穿刺部位皮肤后，经静脉穿刺用真空采血管采集后肢静脉血。普通血清管采集血液样本2.0 mL，用于血液生化指标检测；EDTA 抗凝管采集血液样本2.0 mL，用于血常规指标检测。

1.4 样品的保存与处理 将收集完成的血样轻轻颠倒数次，混合均匀后立即放入4 ℃低温保存箱中，待采样完成后送到雅安市第一人民医院检验科进行血常规和血液生化指标的检测。

1.5 测定指标与方法 血常规指标由US-1800全自动五分类血常规分析仪测定；血液生化指标由HITCH 7600-20 型分析仪测定。具体操作步骤参照各试剂盒和检测仪器的使用说明书，同一样本连续测定三次，取其平均值作为检测数据计入结果。

1.6 数据处理 用SPSS 21.0软件对试验数据进行均值分析，统计结果用平均值±标准差（x±s）表示；用Duncan 法对统计数据作多重比较，结果用P＜0.05 表示差异显著，P＜0.01 表示差异极显著。

2 结果与分析

2.1 圈养东北虎血常规指标的测定及分析 通过对采样于雅安碧峰峡野生动物园圈养东北虎的15个血样进行血常规检验、分析后，结果显示：平均血小板体积指标，各年龄段的差异极显著（P＜0.01），红细胞数、红细胞压积指标，各年龄、性别之间差异显著（P＜0.05），其余检测指标的差异不显著（P＞0.05）。具体见表1。

表1 雅安碧峰峡圈养东北虎的血常规指标

2.2 圈养东北虎血液生化指标的测定及分析 通过对采样于雅安碧峰峡野生动物园圈养东北虎的15 个血样进行血液生化检测、分析后，发现白蛋白指标存在极显著的年龄、性别差异（P＜0.01），总蛋白、球蛋白、谷氨酰转肽酶、无机磷指标存在显著的年龄、性别差异（P＜0.05），其余检测指标的差异不显著（P＞0.05）。具体见表2。

表2 雅安碧峰峡圈养东北虎的血液生化指标

2.3 圈养东北虎血常规、血液生化指标与年龄、性别的相关性分析 雄性亚成体东北虎的红细胞数（9.00±1.58）显著高于雌性亚成体东北虎（6.97±0.44）和雄性成年东北虎（7.35±0.70）（P＜0.05）。雄性亚成体东北虎的红细胞压积（47.11±5.90）显著高于雄性成年东北虎（38.57±3.19）和雌性亚成体东北虎（37.86±2.70）（P＜0.05）。雄性成年东北虎的平均血小板体积（12.17±0.42）极显著低于雌性亚成体东北虎（13.36±0.47）和雄性亚成体东北虎（13.27±0.53）（P＜0.01）。

雄性成年东北虎的总蛋白指标（62.50±6.09）显著低于雌性亚成体东北虎（80.22±10.55）和雄性亚成体东北虎（78.30±10.67）（P＜0.05）。雄性成年东北虎和雌性亚成体东北虎的白蛋白指标（45.37±2.93、47.16±3.63）极显著高于雄性亚成体东北虎（35.91±3.19）（P＜0.01）。雄性成年东北虎的球蛋白指标（17.13±6.17）显著低于雄性亚成体东北虎（41.49±12.38）（P＜0.05）。雄性成年东北虎和雌性亚成体东北虎的谷氨酰转肽酶指标（0.53±0.15、0.50±0.10）显著高于雄性亚成体东北虎（0.20±0.26）（P＜0.05）。雄性亚成体东北虎的无机磷指标（1.56±0.18）极显著低于雄性成年东北虎（2.02±0.33）和雌性亚成体东北虎（2.13±0.20）（P＜0.01）。

其余检测指标与年龄、性别的差异性不显著（P＞0.05）。

3 讨论

3.1 年龄、性别因素对血常规、血液生化指标的影响 雄性亚成体东北虎的红细胞数（9.00±1.58）显著高于雌性亚成体东北虎（6.97±0.44），这种差异推测与性腺的成熟有一定关系，雄性激素可刺激机体加速有核红细胞的分裂和血红蛋白合成，刺激肾脏产生红细胞生成酶［16］。平均血红蛋白含量（190.73±23.14）和平均红细胞数（8.00±1.47）与成年猫科动物的正常血液学值［12］有差别，分别高于其对应数据（135±17）和（6.6±1.0），推测是由于饲养地的海拔差异和测定方法不同造成的。红细胞压积有助于了解红细胞的增多与减少。雄性亚成体东北虎的红细胞压积（47.11±5.90）显著高于雄性成年东北虎（38.57±3.19）和雌性亚成体东北虎（37.86±2.70），可能与采样时的天气及应激造成的饮水减少有关。4 月17 日采集雄性亚成体东北虎的血样时，天气晴朗、气温升高，并且由于该日采样数量多、持续时间长，导致东北虎机体应激加强。雄性成年东北虎的总蛋白指标（62.50±6.09）显著低于雌性亚成体东北虎（80.22±10.55）和雄性亚成体东北虎（78.30±10.67），与张红绪等［7］的试验结果差异明显，推测与投喂饲料的营养成分不同有关。雅安碧峰峡野生动物园内圈养的成年东北虎日粮以冷冻鸡骨架为主，并且每周五停食一天，可能存在日粮中蛋白质摄入不足的情况，而亚成体东北虎日粮以精牛肉为主。

3.2 非年龄、性别因素对血常规、血液生化指标的影响 本次检测除5项血液生化指标和3项血常规指标有显著差异外，其余数据均无显著差异，具有一定的参考价值。但血红蛋白含量和红细胞数指标与成年猫科动物的正常血液学值［12］有差别，推测是由于饲养地的海拔差异造成的，但明显高于张锡然等［5］研究的结果，与赵广英等［14］研究的结果也不符合，推测是由于两者的检测时间相差多年，所采用的检测方法存在差异所致，具体原因还有待于进一步考究。关于血液生化指标的检测，钾、钠、氯、钙、镁、无机磷的检测结果均与张锡然等［5］、凌铭德等［17］研究的结果相符合。它们参与维持体液渗透压和酸碱平衡，维持神经肌肉的正常兴奋性，其在血液中浓度的稳定有利于各种生化反应进行。总蛋白、白蛋白、球蛋白的检测数据均低于张锡然等［5］的试验结果，这值得深入研究，初步推断是由于各个动物园内的饲养方法不同、日粮构成差异和两次试验所采用的检测方法不同所造成的。高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白的检测在圈养东北虎的血液生化检测中还是首次报道，鲜有参考资料。

总的来说，本次试验达到了预期的目标，所取得的血常规和血液生化指标对碧峰峡圈养东北虎后续的疾病预防、诊断和治疗提供了有效的参考资料。但同时由于样本量较小和缺少相应的参考数据进行比较分析，试验所得数据还有进一步优化的空间，如红细胞、白蛋白等指标在个体间的差异极显著，在后续研究中还有待深究。