一例猪流行性腹泻病毒与猪传染性胃肠炎病毒混合感染的诊断与思考

张贺敏

[摘 要] 2019年8月初，河南省遂平县某规模化猪场产房仔猪出现严重的腹泻、呕吐现象，最终因脱水而死亡。为探究猪群发病原因，对发病严重猪群进行临床解剖，结合分子生物学诊断技术，最终确诊为猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒混合感染所致。经过紧急疫苗接种、实施其他防控措施，2周后疫情得到有效控制，仔猪腹泻情况不再发生。

[关键词] 仔猪腹泻;猪流行性腹泻病毒;猪传染性胃肠炎病毒;混合感染

[中图分类号] S858.28 [文献标识码] B [文章编号]1674-7909（2020）06--2

在生猪养殖过程中，仔猪腹泻是比较常见的临床疾病，严重时导致患畜因脱水或心力衰竭而死亡，给猪场造成巨大的经济损失。引发仔猪腹泻的病原较多，包括细菌、寄生虫和病毒，其中导致仔猪腹泻的肠道病毒有猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪轮状病毒（PoRV）和猪德塔冠状病毒（PDCoV）等，这些病毒感染仔猪所引发的临床症状及病理变化类似，依靠传统的临床诊断鉴别较为困难[1]。此外，在某些疫情复杂的猪场，不同腹泻病毒混合感染的现象较为常见，这使得准确诊断疫病的难度更大[2，3]。笔者曾经对一例仔猪PEDV和TGEV混合感染案例进行诊断，下面将其诊断过程进行详细阐述。

1 发病情况

河南省遂平县某规模化猪场饲养繁殖母猪200余头，采取自繁自养模式，主要对外销售育肥猪和保育猪。2019年8月初，该猪场10日龄内少量新生仔猪出现腹泻，同时母猪有轻微腹泻。猪场饲养员在饲料中添加适量氟苯尼考与阿莫西林对母猪进行拌喂，同时对仔猪灌喂抗生素，但情况未见好转。截至8月中旬，已经有800多头仔猪发病，300余头仔猪因腹泻死亡，死亡率接近40%。

2 临床症状

观察发病猪群临床症状，发现发病仔猪腹泻严重，其粪便颜色为黄绿色，性状为水样状，甚至部分发病严重仔猪呈喷射状腹泻。发病猪群整体消瘦、精神反应迟钝，其中仔猪腹泻情况随日龄越低而发病越严重;部分母猪精神沉郁，采食量下降，但未发现母猪死亡现象。

3 病理变化

对发病严重仔猪进行解剖，主要病理症状集中表现在肠道部位，其肠系膜淋巴结肿大，肠道表面出血，且肠壁变薄，肠道内有未消化的凝乳块物质，且其含有较重的腥臭味。

根据病猪的临床表现、病理变化及猪场用药情况，我们初步判定该病的发生可能由猪肠道腹泻病毒感染所致。但由哪一种病毒感染引起尚不清楚，需实验室诊断确定。

4 实验室诊断

4.1 细菌检测

无菌采集病猪淋巴结、肺脏、肝脏和肠道内容物，将其匀浆后，取适量上清接种于鲜血琼脂培养基，将培养基置于37 ℃无菌培养箱内培养36 h，其后观察培养基表面是否存在菌落，并对菌株种类进行鉴定。结果显示，培养36 h培养基表面均未观察到菌落生长情况，同时染色镜检未检测到细菌存在。

4.2 病毒检测

无菌取3头发病仔猪的适量病变明显的小肠组织样品，将组织样品匀浆后，低温（4 ℃）高速（1.3万r/min）离心15 min，取上清采用Trizol法提取组织RNA，按照说明书将RNA反转录为cDNA，以cDNA样品为模板，采用RT-PCR法检测PEDV、TGEV、PoRV和PDCoV病原是否存在，然后对PCR产物进行凝胶电泳观察条带。检测结果显示，3份样品均被检测出PEDV和TGEV阳性，PoRV和PDCoV均为阴性，提示猪群腹泻是PEDV和TGEV混合感染所致。

5 防控措施

5.1 提高饲养管理水平

通过对发病猪群进行临床症状及实验室技术检测，最终确诊为PEDV和TGEV混合感染所致，降低仔猪发病率和死亡率主要依靠提高猪群饲养管理水平。一是将腹泻猪和健康猪隔离饲养，使腹泻猪群获得含有PED和TGE母源抗体的初乳，提高猪群抵抗病毒腹泻的能力;二是在仔猪饮水中添加多维和适量食盐，防止发病猪群因过度腹泻脱水死亡;三是将豬舍内温度提高，防止仔猪因寒冷扎堆，同时降低猪舍内湿度[4]。

5.2 开展消毒工作

对发病猪群进行隔离，对其所在栏舍进行消毒，可使用高压水枪对栏舍进行冲洗，同时进行熏蒸消毒，同时在走道两边铺适量浓度的石灰乳;对发病猪群排出的粪污进行及时清除与无害化处理，以切断病原的传播途径;做好饲养人员的培训工作，专人负责腹泻猪群的饲养管理工作，不能让饲养员在不同栏舍之间穿梭。

5.3 紧急疫苗接种与用药

对全群母猪免疫接种猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联疫苗（ZJ08和HB08猪）免疫接种（2头份/头），仔猪肌肉注射1头份/头;为了防止发病仔猪继发感染其他疫病，在仔猪饲料中添加适量阿莫西林和电解多维等，连续用药5 d后停药。

严格执行以上防治措施后，2周后回访，该猪场疫情得到有效控制，猪场仔猪发病率明显下降，无大规模仔猪死亡情况发生。

6 讨论

PEDV感染猪只后，主要在小肠黏膜上皮细胞中进行复制，受到侵染的小肠上皮细胞正常的结构被破坏，肠壁细胞发生死亡，肠绒毛脱落，从而肠壁变薄，肠道的表面积减少，使小肠消化吸收功能降低;另外，肠黏膜上皮细胞内的双糖酶、氨基肽酶等活性降低或者缺乏，因而导致肠腔小分子物质得不到进一步分解、吸收，使肠腔内的胶体渗透压升高，又因ATP酶活性降低或者缺乏，肠上皮细胞内钠泵失活，晶体渗透压也升高，从而引发仔猪渗透性腹泻，严重时脱水甚至死亡。

在仔猪生长过程中发生腹泻十分常见，导致仔猪腹泻的病因较多，其中病毒感染是常见的原因，很多肠道病毒均可以导致仔猪腹泻，而且其临床及病理变化相似，导致传统的临床与病理诊断已经无法满足对病原精确诊断的要求。本次接诊的案例中仔猪腹泻是由PEDV和TGEV混合感染所致，PEDV和TGEV均可导致仔猪腹泻，而且其发病症状一致，如果没有丰富的临床经验很容易误诊或漏诊，延误疫病的治疗。本次研究通过分子诊断技术最终确定为PEDV和TGEV混合感染，对猪群进行紧急免疫接种疫苗及提高饲养管理水平后疫情得到有效控制。故而，当猪场发生疫情后，应及时将病料样品送往专业检测机构进行病原检测，根据检测结果实施相应的防控措施，以减少经济损失。

参考文献

[1]张利卫，曹贝贝，李炳晓，等.新发猪Delta冠状病毒和猪流行性腹泻病毒SYBR Green I双重荧光RT—PCR检测方法的建立及应用[J].中国兽医学报，2018（4）：618-624.

[2]滑翔，胡中凯，黄小波，等.检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒的cDNA芯片的构建[J].畜牧兽医学报，2015（12）：2235-2242.

[3]陈志雄，王洪海，张峰.规模猪场哺乳仔猪混合感染PEDV和PDCoV暴发腹泻的综合防控[J].中国猪业，2019（5）：85-88.

[4]马寿福.仔猪流行性腹泻病的诊断与防治措施[J].国外畜牧学（猪与禽），2019（8）：19-20.