复合益生菌制剂对小白鼠生长性能、免疫及抗氧化能力的影响

2020-06-29李敬芳郑文香

中国饲料 2020年11期

李敬芳，郑文香

（廊坊卫生职业学院，河北廊坊 065000）

随着我国养殖业的发展，动物养殖数量逐年增多，已经形成了集约化、规模化的养殖模式，在养殖过程中为了更好防治相关的疾病，滥用抗菌药物，导致许多耐药细菌出现，降低了抗菌药物的治疗效果，同时也造成肉、蛋、奶等多种畜产品中的药物残留，危害着人们健康，成为了公共的卫生问题（张召兴，2017；易晓菲，2016）。因此，研发代替抗菌药物使用的新型添加剂成为了新的研究方向。复合益生菌制剂是由多种类的益生菌经过多种特殊工艺制成的一种活菌制剂，该制剂具有促进动物生长发育、调整肠道内菌群平衡、提高免疫机能等多种优点，被广泛应用于畜禽养殖中（仲伟光等，2018；胡兴义等，2017；刘政，2017）。相关研究表明，益生菌可以替代抗菌药物使用，具有广阔的应用前景（李世传等，2016）。本试验旨在研究复合益生菌制剂对小白鼠生长性能、免疫及抗氧化能力的影响，为复合益生菌制剂在临床进一步的应用奠定基础。

1 材料与方法

1.1 试验菌株复合益生菌制剂主要包括乳酸杆菌、乳双歧杆、酵母菌，其中乳酸杆菌、乳双歧杆的活菌数为 9.0×109cfu/g、酵母菌的活菌数为4.5×109cfu/g，由本试验制备的干燥固体制剂。

1.2 主要试剂与仪器免疫球蛋白IgG、IgM、I-gA ELISA Kit 试剂盒、细胞因子 IL-2、IL-6 ELISA Kit 试剂盒均购于 Elabscience 公司；总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）均购于北京中控生物技术有限公司；高速小型离心机均有德国Eppendorf 公司生产；全波长酶标仪由北京凯奥科技发展有限公司生产；常规的试剂及仪器由本实验室提供。

1.3 试验设计采用单因素设计试验，选择体质量为（20±2.2）g 健康昆明系小白鼠 120 只（北京维通利华实验动物中心），随机分成4 组，每组3 个重复，每个重复5 只，1组为空白对照组饲喂基础日粮，试验2、3、4 组分别在基础日粮中添加0.5%、1.0%、1.5%的复合益生菌制剂，试验期为56 d。按照常规的饲养方式对试验小白鼠进行饲养与管理，每个重复组单独饲养，自由采食和饮水。

1.4 试验饲粮配比参考秦哲（2017）的方法配制试验小白鼠的基础饲粮，其组成及营养水平见表1。

表1 饲粮组成及营养水平（干物质基础） %

1.5 指标测定及方法

1.5.1 生长性能测定在试验期间断料12 h，对每个试验组小白鼠逐个称重，记录试验开始与结束的体重及耗料量。测定平均日增重、平均日采食量、料重比。

1.5.2 免疫及抗氧化能力检测在试验后1、25、56 d，断料12 h，每个组随机抽取5 只小白鼠摘眼球取血，离心分离血清。按照说明书测定血清中免疫球蛋 IgG、IgM、IgA 及细胞因子 IL-2、IL-6 的含量，按说明书检测 T-SOD、GSH-Px、T-AOC 等抗氧化能力指标。

1.6 试验数据分析试验数据用 “平均值±标准差”表示，采用统计学分析软件SPSS 18.0 对试验结果进行单因素方差分析，以P ＜0.05 表示差异显著性。

2 结果

2.1 复合益生菌制剂对小白鼠生长性能的影响由表2 可知，试验3、4 组小白鼠平均日增重显著高于 1组（P ＜ 0.05），与 1组相比分别提高36.9%、30.43%；试验2 组平均日增重高于1组，差异性不显著（P＞0.05），试验 2、3、4 组之间相比，差异性不显著（P＞0.05）；试验 2、3、4 组平均采食量均高于1组，差异性不显著（P＞0.05）；试验 3、4 组料重比显著低于 1组（P ＜ 0.05），与 1组相比分别降低17.0%、15.6%；试验2 组低于1组，差异性不显著（P＞0.05）；3 个试验组之间相比，差异性不显著（P＞0.05）。

表2 复合益生菌制剂对小白鼠生长性能的检测结果

2.2 复合益生菌制剂对小白鼠免疫指标的影响由表3 可知，在试验后 1 d，试验 2、3、4 组血清中IgG 含量均高于 1组，差异性不显著（P＞0.05）；在试验后 28、56 d，试验 3、4 组血清中 IgG 含量均显著高于 1组（P ＜ 0.05），与 1组相比分别提高20.3%、20.3%、13.9%、12.8%；试验 2 组高于 1组，差异性不显著（P＞0.05），3 个试验组之间相比，差异性不显著（P＞0.05）。在试验后 1 d，试验 2、3、4 组血清中 IgA 含量均高于 1组，差异性不显著（P＞0.05）；在试验后 28、56 d，试验 3、4 组血清中 IgA 含量均显著高于 1组（P ＜ 0.05），与 1组相比分别提高18.0%、16.5%、15.8%、14.4%；试验2 组高于 1组，差异性不显著（P＞0.05），3 个试验组之间相比，差异性不显著（P＞0.05）；在试验后 1、28、56 d，试验 2、3、4 组血清中 IgM 含量均高于 1组，差异性不显著（P＞0.05）。

表3 复合益生菌制剂对小白鼠血清中免疫球蛋白含量的检测结果 ng/mL

由表4 可知，在试验后 1 d，试验 2、3、4 组血清中IL-2 含量均高于1组，差异性不显著（P >0.05）；在试验后 28、56 d，试验 3、4 组血清中 IL-2含量均显著高于 1组（P ＜ 0.05），与 1组相比分别提高 29.4%、27.5%、18.6%、18.1%；试验 2 组高于1组，差异性不显著（P > 0.05），3 个试验组之间相比，差异性不显著（P > 0.05）；在试验后 1、28、56 d，试验 2、3、4 组血清中 IL-6 含量均高于 1组，差异性不显著（P > 0.05）。

表4 复合益生菌制剂对小白鼠血清中细胞因子含量的检测结果 ng/mL

2.3 复合益生菌制剂对小白鼠抗氧化能力的影响由表5 可知，在试验后 1 d，试验 2、3、4 组血清中T-SOD 活性均高于1组，差异性不显著（P >0.05）；在试验后 28、56 d，试验 3、4 组血清中 TSOD 活性均显著高于 1组（P ＜ 0.05），与 1组相比分别提高 7.8%、7.6%、9.1%、8.9%；试验 2 组高于 1组，差异性不显著（P > 0.05），试验 2、3、4 组之间相比，差异性不显著（P > 0.05）；在试验后1、28、56 d，试验 2、3、4 组血清中 T-AOC、GSH-Px含量均高于1组，差异性不显著（P > 0.05）。

表5 复合益生菌制剂对小白鼠清中抗氧化能力指标的检测结果

3 讨论

3.1 复合益生菌制剂对小白鼠生长性能的影响相关研究表明, 益生菌富含多种营养物质及消化酶类，可促进饲料在动物体内的消化吸收，提高动物的生长性能。王杰等（2016）报道了复合益生菌制剂可以显著提高仔猪生长性能。申红春（2018）报道，复合微生物制剂可以提高肉牛的生长性能。本试验研究表明，试验3、4 组小白鼠平均日增重显著高于 1组（P ＜ 0.05），料重比显著低于 1组（P ＜ 0.05），试验 2、3、4 组平均采食量均高于 1组，差异性不显著（P > 0.05），说明了复合益生菌制剂可以提高小白鼠的平均日增重、平均日采食量、降低料肉比，以1.5%添加为适宜。复合益生菌制剂的添加可以促进小白鼠调节肠道菌群平衡，抑制有害菌的生长，促进消化道内消化酶的分泌，提高饲料在体内的利用率，从而提高小白鼠的生产性能。

3.2 复合益生菌制剂对小白鼠免疫指标的影响免疫球蛋白主要包括IgG、IgM、IgA，其主要的功能为介导体液免疫，其含量变化是评价免疫机能的重要指标之一，IgG、IgA 在抗感染免疫中起着重要作用，IgM 是机体免疫中出现最早的抗体，具有杀菌功能（张召兴，2017；胡兴义，2017；易晓菲，2016）。IL-2 是介导细胞免疫主要细胞因子，可以刺激机体T 淋巴细胞增殖，在免疫过程中具有重要作用（宋丽霞，2011）。细胞因子 IL-6 是免疫系统中重要的细胞因子，主要参与机体的体液免疫和细胞免疫，促进B 细胞分化、增殖和再次产生免疫应答（宋巴达玛，2010）。本试验研究表明，在试验后 28、56 d，试验 3、4 组血清中 IgG、IgA、IL-2 含量均显著高于 1组（P ＜ 0.05），在试验期间，试验 2、3、4 组血清中 IgM、IL-6 含量均高于 1组，差异性不显著（P > 0.05），说明复合益生菌制剂可以诱导小白鼠产生体液免疫和细胞免疫应答，提高其免疫机能。与刘明生等（2018）、胡兴义（2017）报道的一致。由于复合益生菌所含的有效活性物质可以刺激小白鼠免疫系统，诱导机体产生抗体与细胞因子，从而增强小白鼠的免疫机能。

3.3 复合益生菌制剂对小白鼠抗氧化能力的影响机体在新陈代谢过程中会产生多种氧化自由基，这些氧化自由基可以导致细胞发生氧化应激性损伤，给动物机体造成严重损伤（贾青辉等，2017；王传龙等，2017）。动物体内所含 T-AOC、TSOD、CAT 和GSH-Px 等酶系统具有清除自由基的作用（张建斌等，2018；王传龙等，2017）。本试验研究表明，试验后 28、56 d，试验 3、4 组血清中 TSOD 活性均显著高于 1组（P ＜ 0.05），在试验后1、28、56 d，试验 2、3、4 组血清中 T-AOC、GSH-Px含量均高于 1组，差异性不显著（P > 0.05）。说明复合益生菌制剂可以提高小白鼠血清中T-SOD、T-AOC、GSH-Px 活性，因而提高抗氧化能力。与王传龙等（2017）报道的酵母菌培养物可以提高蛋鸡抗氧化性能一致。复合益生菌制剂所含酶类物质激活了体内的酶系统，提高了清除自由基的能力，因而提高其抗氧化能力。