BECKMAN PK7300全自动血型检测系统可疑及错误结果的原因分析

陈洁

[摘要] 目的 探讨BECKMAN PK7300 全自动血型检测分析系统可疑及错误结果的原因。方法 回顾长沙血液中心2018年6—9月的31 816例经BECKMAN PK7300检测的全血样本的结果进行统计，分析其一次性判断成功率及失败率和可疑结果的原因分析。结果 对于RHD血型一次性判读正确率99.93%;ABO 血型一次性判读成功率为99.04% ;失败率为0.95%。可疑结果原因分析以标本脂血为主要原因，其次还有凝血、有杂质和加样失败、有气泡等其他因素影响。结论 BCEKMAN PK700全自动血型仪具有全自动、高通量等优点，检测前的样本质量对检测的结果影响尤为重要，做好检测前、检测中、检测后的质量控制是对实验质量保证的关键因素。

[关键词] 全自动血型仪;一次性判读成功率;质量控制;血液安全

[中图分类号] R446.1 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2020）02（b）-0172-03

[Abstract] Objective To investigate the causes of suspicious and erroneous results of the BECKMAN PK7300 automatic blood group detection and analysis system. Methods The results of 31，816 whole blood samples tested by BECKMAN PK7300 from June to September 2018 in Changsha Blood Center were reviewed for statistical analysis of the one-time judgment of success rate， failure rate， and cause analysis of suspicious results. Results The correct rate of one-time interpretation of RHD blood group was 99.93%; the success rate of one-time interpretation of ABO blood group was 99.04%; the failure rate was 0.95%. The main cause of the suspicious result analysis is the lipemia of the specimen， followed by other factors such as coagulation， impurities and sample failure， and air bubbles. Conclusion BCEKMAN PK700 automatic blood group meter has the advantages of full-automatic， high-throughput， etc. The quality of the sample before the test has a particularly important impact on the test results. Quality control before， during， and after the test is a key factor in ensuring the quality of the experiment.

[Key words] Automatic blood type meter; One-time interpretation success rate; Quality control; Blood safety

為保证临床用血安全，血型的准确鉴定是其首要前提。目前血型的临床检测方法主要有纸片法、试管法，微量微板法和全自动血型仪检测法，其中以试管法仍旧作为血型检测的金标准，然而在血站的血液检查工作中，由于标本数量大，因而无法作为常规检测方法，微量微板法对于大批量的样本检测时同样存在费时费力的缺点，且其结果需要人工判读，无法保存，结果回溯性差。BECKMAN PK7300全自动血型分析仪集自动加样、孵育、判读、数据保存及全过程监控为一体，具有全自动、高通量等优点外，其在不规则抗体和亚型筛选、测定 ABO血型抗体效价等方面也体现出较为卓越的性能[1]。但在其使用过程中会遇到无法判读或者错误判读血型结果的情况，这对于血液安全有着重大影响，现将该中心于2018年6—9月采集的31 816标本进行回溯性分析，报道如下。

1  材料与方法

1.1  材料来源

长沙血液中心无偿献血者的全血样本共计31 816例，均为EDTA-K2抗凝标本。

1.2  仪器与试剂

BECKMAN PK7300全自动血型检测系统;白洋600 A型离心机;单克隆抗-A/B血清（长春博德）;抗-D血清（上海血液生物）;标准红细胞悬液3%～5%（上海血液生物）;0.9%生理盐水。

1.3  方法

采用全自动血型仪进行操作。

1.3.1 试剂配制  ABO标准红细胞用生理盐水稀释为浓度为 1.6%～2.7%的细胞悬液;标准抗血清用生理盐水做1：40稀释。

1.3.2 结果判读  根据梯度板小孔中心的血细胞边缘的光通量的变化率以及与周边部分的光通量和中心部分的光通量的比例关系等满足设定参数的范围则判断阴性和阳性结果。

1.3.3 操作步骤  根据BECKMAN PK7300全自动血型仪操作手册进行实验，当仪器法鉴定无法判读样本时加做试管法以辅助鉴定。试管法按全国临床检验操作规程进行ABO正/反定型、RHD血型测定。两种方法都无法检测则送长沙血液中心输血研究室做进一步鉴定。

1.4  实验室参数设置

SPC表示位于小孔中心的血细胞边缘的光通量的变化率。该设备赋予SPC更高的优先权，是判断凝集和非凝集状态的主要参数。P/C表示小孔周边部分和中心部分的光通量的比例关系。LIA表示非凝集状态图像中聚集在小孔中心的细胞区域的面积[2]。见表1。

表1  BECKMAN PK7300 主要参数设置

1.5  统计方法

应用SPSS 21.0统计学软件进行数据分析，计数资料以频数和百分比（%）表示。

2  结果

2.1  31 816例的样本判读率与成功率分析统计

该次统计31 816例的样本中，对于RHD血型一次性判读正确率为99.93%;ABO血型一次性判读成功31 512 例，成功率为99.04%;错误判读76例;可疑标本228 例，失败率为0.95%。

2.2  228例ABO血型结果可疑标本分析统计

通过回溯性观察实验保存的图片可统计到以上出现可疑结果的原因。其中加样失败表现为结果空白或者结果为溶血从而影响正定型的结果判读。正反不符仅为该实验室结果显示的正反定型不一致，最终结果有赖于追溯至Shinow 9.0系统中报告生成为准。见表2。

2.3  20例RHD血型结果可疑标本分析统计

通过回溯性观察实验保存的图片可统计到以上出现可疑结果的原因。其中加样失败表现为结果空白或者结果为溶血从而影響RHD血型的结果判读。见表3。

3  讨论

该中心由2018年4月正式启动BCEKMAN PK700全自动血型仪，较以往采用微板法检测，在试剂用量、人员操作上大幅度减少了成本付出，在检测通量、结果准确性上都有了很大的提高，而且整个过程人为干预减少，结果可保存追溯，对于血站检验科的工作效率有了显著的提高。

该次讨论中，不管是RHD血型还是ABO血型的判读，该中心的BECKMAN PK7300全自动血型仪的结果正确率均在99%以上，其失败率均符合仪器设定的可容许1%～2%的失败率，其结果可靠。值得注意的是在该次228例可疑结果原因分析中，样本因素占了66.22%，其中尤其以脂血标本对反定型结果影响最大。样本存在凝块，反映了标本前处理时抗凝剂颠倒混匀不够，离心不够充分。加样失败的原因主要反映在溶血和检测量不够的情况。而以上的因素提示对于全自动血型仪的检测中样本因素起了关键的作用，包括了质和量的影响。有气泡和有杂质的影响主要归结于仪器的维护和保养，仪器管道的冲洗是维护仪器日常所必需，实验开始前就应该注意观察管道内是否有气泡，而实验结束后梯形板的清洁对于下一次实验有很大的影响[3]。目前该实验室采用的是超声波振荡清洗仪，只需要人为将梯形板置于超声波振荡清洗仪中清洗40 min后，置于干燥箱中风干待用，其清洁力度仍有待改善。在RHD血型检测中加样失败是其影响结果的主要因素，标本凝块，杂质也对实验有很大的影响。在156例RHD阴性结果中，送至输血研究室经过确认为阴性的有151例，其中变异型4例，RHD阳性1例。BCEKMAN PK700全自动血型仪在RHD阴性鉴定上的准确度为96.79%，由于RHD血型的复杂性和检测的局限性，变异型的检出仍旧有赖于血清学实验和基因鉴定[4]。该次讨论中检出的16例正反不符的样本，送至长沙血液中心输血研究室鉴定后，其中6例为亚型，4例为不规则抗体阳性，6例为血型抗体减弱。全自动血型分析仪用于不规则抗体筛查的灵敏度较之前微板法有了很大的提高，从而保障血液更安全[5-7]。然而全自动血型仪对于正反不符的原因并不能有效区分，存在其自身的局限性。而且全自动血型仪的结果图片还是需要人工核对，所以在使用血型仪过程中仍需工作人员严格按照SOP操作，认真核对结果，提高责任心，从而能避免因血型错误而造成的输血事故。

综上所述，BCEKMAN PK700全自动血型仪的投入使用，对于血站检验科的工作效率有了极大地提高和改善的同时，在检测前、检测中、检测后的质量控制仍是检测质量上的有力保证。

[参考文献]

[1]  王梓.全自动血型分析仪在血站血型检测中的应用[J].中国医疗器械信息，2016，22（10）：61-64.

[2]  杨忠思，周华友，冯秋霞，等.非配套pk7300型全自动血型检测系统方法的建立与评价[J].中国输血杂志，2017（11）：1228-1231.

[3]  许婷婷，张红，余琴，等.PK7300全自动血型仪在血站应用的探讨[J].临床血液学杂志，2018，31（2）：145-147.

[4]  Sandler SG，Chen LN，Flegel WA，et al.Serological weak D phenotypes： a review and guidance for interpreting the RhD blood type using the RHD genotype[J].Br J Haematol.2017，179（1）：10-19.

[5]  李琳琳，李美霖，车进，等.全自动血型分析仪与微板法应用于献血者不规则抗体筛查的比较分析[J].检验医学与临床，2016，13（5）：593-594.

[6]  王平，杨克坚，罗月明.献血者ABO血型反定型O细胞凝集原因分析[J].热带医学杂志，2009，9（5）：559-560.

[7]  隋丽丽，郭金金，李美霖，等.全自动血型分析仪与微板法在ABO血型筛查中的比较分析[J].国际检验医学杂志，2017， 38（21）：2964-2965.

（收稿日期：2019-11-19）