细胞块切片与常规细胞涂片免疫组化染色在胸腔积液病诊断中的价值

王双珠，王 敏

常规细胞涂片检测胸腔积液病敏感度相对较低(50%～78%)，不能清晰鉴别浆膜腔原发性间皮性肿瘤与转移性癌，可能与两者细胞形态十分相似有关[1]。准确区分转移性癌与间皮性肿瘤可有助于临床医师选择精准、有效的治疗方式[2]，近年细胞块切片免疫组化染色法越来越受到重视，其在鉴别间皮性肿瘤与转移性癌的敏感度较高，获得临床医师的青睐[3]。本文着重探讨胸腔积液病的细胞块切片与常规细胞涂片免疫组化染色的临床运用价值，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 临床资料 收集2017年1月～2018年5月浙江省台州医院诊治患有胸腔积液病的患者72例，随机分为实验组(36例)与对照组(36例)，其中实验组男性18例，女性18例，患者年龄15～75岁，平均(41.38±4.29)岁；对照组男性19例，女性17例，年龄16～77岁，平均(42.07±5.22)岁。入选患者均已签署知情同意书，比较实验组与对照组患者的临床资料(性别、年龄等)，差异无显著性。

1.2 方法

1.2.1 制作 对照组在治疗过程中采用常规细胞涂片法进行检测，实验组则采用细胞块切片免疫组化染色法进行检测，患者均于早上空腹状态下取50 mL胸腔积液，将其分装于5个试管中，对其展开离心处理，离心转速为3 000 r/min，时间为15 min。离心工作完成后，采用移液枪吸出上清液，从沉渣取部分液体给予细胞涂片学检查，剩下的沉渣则加入戊二醛(2.5 mL)，使其固定后再以3 000 r/min离心5 min，二次离心后运用移液枪吸出上清液，取出沉渣，包于滤纸中，在给予常规脱水后实施石蜡包埋切片，所有细胞块切片与细胞涂片分别给予免疫组化染色和HE染色。

1.2.2 HE染色 由两位经验丰富的高级职称病理医师进行观察，依照标本中细胞的黏除性、形态、核不典型性进行判断，若有反应性增生间皮细胞出现，无不典型性且细胞弥散性佳判断为良性，其细胞呈团状，核有强烈的不典型性以及细胞形态极为不温和评定为恶性，若细胞呈弥散状，核为中度或重度不典型判断为不确定[4]。

1.2.3 免疫组化染色 采用免疫组化SP法染色，抗体CK5/6、desmin、CK7、CEA、MOC-31、CD15、Calretinin、BerEP、TTF-1、WT-1与DAB显色试剂，均购自福州迈新公司；具体操作步骤严格按试剂盒说明书进行。

1.3 判断标准 TTF-1、WT-1阳性为细胞核呈棕黄色，CD15阳性为细胞质与细胞膜呈棕黄色，CK5/6、desmin、CK7、CEA、MOC-31、BerEP阳性为细胞质呈棕黄色，Calretinin阳性为细胞质与细胞核均呈棕黄色[5]。

2 结果

比较两组阳性检测率，实验组阳性检测率为100.00%(36/36)；对照组阳性检测率为75.00%(27/36)，两组相比差异有统计学意义(P<0.05)。

对比实验组与对照组病理诊断，结果显示：分型诊断恶性胸腔积液采用细胞块切片免疫组化染色检测的符合率较高，经组合性抗体检测转移性肺腺癌中CEA、CK7、TTF-1、CD15、BerEP、MOC-31均呈高表达，恶性间皮瘤中desmin、Calretinin、CK5/6及WT-1均呈高表达，常规细胞涂片检测明显低于细胞块切片免疫组化染色，差异有统计学意义(P<0.05，表1)。

表1 实验组与对照组病理诊断结果分析

3 讨论

临床治疗中，医师要想精准的为患者制定治疗方案，必须清晰的区分转移性癌与间皮性肿瘤的性质[6]。免疫组化染色法操作简单可行，定位阳性物质较准确，有较强的特异性。此外，细胞块的运用还能有效填补细胞涂片检测法的单一性缺点，其可以让细胞标本得到较好保存，并可连续切片展开多项检查[7]。

本实验中对照组患者在治疗过程中采用常规细胞涂片法进行检测，实验组患者则采用细胞块切片免疫组化染色法进行检测，抗体包括CK5/6、desmin、CK7、CEA、MOC-31、CD15、Calretinin、BerEP、TTF-1、WT-1等，鉴别胰腺癌与间皮性肿瘤。结果表明，细胞块切片免疫组化染色法具有特异性，同时敏感性也优于常规细胞涂片法。这是因为细胞块能够均匀分布，可以将脱落细胞的具体形态结构完整保存下来，在鉴别诊断中可以明显分辨出细胞的形态特征。然而，常规细胞涂片由于细胞分布不均匀，易使细胞产生重叠，使细胞整体结构显现不清晰，不利于鉴别胸腔积液病[8]。细胞涂片易产生数据差异以及厚薄不匀的现象，产生高背景着色形成假阳性，易导致误诊。此外，细胞涂片因阳性细胞未有具体化的对应标准，在判断时也会相应的增加其难度。与细胞涂片检测法相比，细胞切片免疫组化染色法的优点很明显，如防止假阳性出现、细胞分布十分均匀、阳性表达观察度较高等[9]。

综上所述，运用细胞块切片免疫组化染色法能够有效预防误、漏诊，对判断浆膜腔积液的细胞性质与类型效果显著。总之，在适当的抗体组合下，细胞块切片联合免疫组化染色检测胸腔积液对诊断间皮瘤以及肺腺癌等肿瘤的效果值得肯定，具有临床推广价值。