自身免疫性抗体检测在临床诊断自身免疫性肝病中的价值评估

杨月星

（台山市人民医院 检验科，广东 台山529200）

自身免疫性肝病 （autoimmune liver disease，AILD）是指由于自身免疫系统功能紊乱而引发的肝细胞或胆管上皮细胞炎症性病变，往往导致患者肝功能异常，并容易发展为肝硬化，主要包括自身免疫性肝炎 （AIH）、原发性肝硬化 （PBC）以及原发性硬化性胆管炎 （PSC）［1］。有研究［2-3］指出，AILD的发病机制与患者自身免疫机制存在较大的关联，检测血清自身免疫抗体的表达和肝功能指标对鉴别诊断AILD和病毒性肝炎具有重要的作用。为此，本研究探讨自身免疫性抗体检测在临床诊断AILD中的应用效果，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2018年4月至2019年9月在我院就诊的AILD患者69例 （AILD组）和病毒性肝炎患者77例 （病毒性肝炎组），并选取同期65例正常健康者作为健康对照组。AILD患者中男性39例，女性30例；年龄27～69岁，平均 （46.37±6.52）岁；AIH患者24例，PBC患者40例，PSC患者5例。病毒性肝炎患者中男性43例，女性34例；年龄24～72岁，平均 （47.44±7.13）岁；乙型肝炎患者55例，甲型肝炎患者16例，戊型肝炎患者6例。健康对照组中男性36例，女性29例；年龄25～68岁，平均 （45.61±6.34）岁。三组的一般资料比较，差异无统计学意义 （P＞0.05）。

1.2 入选标准纳入标准：①AILD患者的临床诊断及分型均符合 《自身免疫性肝病诊断和治疗指南》中的诊断标准［4］；②病毒性肝炎患者的临床诊断及分型均符合 《病毒性肝炎防治方案（试行）》中的诊断标准［4］；③依从性高，对本研究知情且自愿参与。排除标准：①患有精神病或严重意识障碍症的患者；②严重心理疾病的患者；③合并其他严重疾病或恶性肿瘤的患者。

1.3 方法

1.3.1自身免疫抗体检测 ①抗核抗体 （ANA）应用间接免疫荧光法检测，以HEP-2细胞及猴肝作为抗原，严格按照试剂盒说明书进行操作，检测结果以定性 （阳性或阴性）表示。②抽取静脉血5 mL，半小时后离心处理并分离血清置于冰箱中保存。应用免疫印迹条带法检测抗线粒体抗体M2型 （AMAM2）、抗肝肾微粒抗体Ⅰ型抗体 （LKM-1）、可溶性酸性磷酸化核蛋白SP100抗体 （SP100）、抗可溶性肝抗原抗体 （SLA）、抗肝细胞溶质抗原1型抗体 （LC-1）的含量，检测时将血清混合稀释100倍，结果以定性 （阳性或阴性）表示，1项及1项以上指标阳性即判定该患者自身免疫抗体阳性。

1.3.2肝功能指标检测 三组研究对象均在空腹状态下抽取静脉血5 mL，应用全自动生化分析仪检测丙氨酸转氨酶 （ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、谷氨酰转肽酶 （GGT）和碱性磷酸酶（ALP）含量。检测过程使用全自动生化分析仪原装试剂、校准品以及质控品。

1.4 统计学处理选用SPSS 21.0软件处理数据，计数资料以率（%）描述，比较采用χ2检验；计量资料以±s描述，比较采用方差分析或非参数检验；P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清自身免疫抗体阳性率AILD组患者的血清自身免疫抗体ANA、AMA-M2、LKM-1、SP100、SLA阳性率以及总阳性率均显著高于病毒性肝炎组和健康对照组 （P＜0.05）。见表1。

表1 三组研究对象的血清自身免疫抗体阳性率比较 ［n（%）］

2.2 肝功能指标AILD组患者的ALT、AST、GGT、ALP含量均显著高于病毒性肝炎组和健康对照组 （P＜0.05）。见表2。

表2 三组研究对象的肝功能指标含量比较 （±s，U／L）

表2 三组研究对象的肝功能指标含量比较 （±s，U／L）

组别 n A L T A S T G G T A L P A I L D 组 6 9 2 4 7.3 5±3 9.1 6 1 9 5.6 4±3 6.6 2 2 0 8.9 3±4 1.2 8 2 8 8.3 7±4 6.0 9病毒性肝炎组 7 7 7 8.3 3±2 1.5 2 6 2.7 6±1 8.4 9 5 9.8 7±1 6.2 3 1 2 4.6 7±3 1.5 5健康对照组 6 5 2 8.7 9±9.4 3 2 5.7 1±1 1.5 8 2 9.3 4±8.6 3 7 1.6 9±1 4.2 8 F值 1 2.5 6 5 8.3 0 4 8.5 9 4 1 4.4 7 9 P值 0.0 0 0 0.0 0 0 0.0 0 0 0.0 0 0

3 讨论

AILD的发病机制目前国内外尚无明确阐述，主要研究方向集中于AILD的鉴别诊断和临床治疗［5-6］。在发病初期，AILD患者并无明显特异的临床表现，在临床诊断方面容易和病毒性肝炎以及其他肝脏病症混淆，尤其是AILD可能会与病毒性肝炎合并发生［7］。另外，有研究［8］提出，机体在受到病毒感染后，可诱导自身抗原修饰而导致自身免疫系统异常，指出AILD和病毒性肝炎的发病机制有一定的共性存在。本研究中，病毒性肝炎患者有6例为ANA阳性患者，2例为AMAM2阳性患者。AILD的早期诊治是提高临床治疗效果和改善患者预后的关键环节，因此通过检测实验室指标鉴别诊断AILD和病毒性肝炎对进一步的临床治疗具有重要的意义。

本研究中，AILD组的自身免疫抗体总阳性率为91.3%（63／69），显著高于病毒性肝炎组和健康对照组 （P＜0.05），表明机体血清自身免疫抗体阳性是AILD患者的特异表现，可以认为自身免疫抗体对鉴别诊断AILD和病毒性肝炎以及健康人有重要作用。同时，本研究结果显示，在AILD患者中，ANA阳性率最高，达到85.5%，其次为AMA-M2和SP100，均显著高于病毒性肝炎组和健康对照组 （P＜0.05），提示ANA可作为鉴别诊断AILD和病毒性肝炎的免疫指标，具有较高的敏感度，但是ANA在不同的自身免疫性疾病中呈现不同程度的阳性率表现，特异性不高，因此需要结合其他免疫指标以及肝功能指标综合评价。AMA-M2抗体以线粒体内膜上的2-酮酸脱氢酶复合物为靶抗原，是AILD患者高度特异性的自身免疫抗体，尤其是对于PBC患者而言，具有较高的敏感性和特异性［9］。张宏宇等［10］的研究指出，在AIH患者、PBC患者、病毒性肝炎患者以及健康人中，PBC患者的血清AMA-M2阳性检出率远远高于其他三组。但是，由于自身免疫抗体水平在AILD病情的发生发展中是一个动态变化的过程，加之各项免疫指标在其他不同免疫疾病中也存在一定的阳性率，因此应根据临床特征、肝功能指标等多项资料进行综合分析，避免误诊。本研究肝功能检测结果显示，AILD组和病毒性肝炎组的肝功能指标显著高于健康对照组，表明两组患者的肝功能均受到损伤；同时AILD组的肝功能指标均显著高于病毒性肝炎组 （P＜0.05），表明肝功能指标一定程度上有利于AILD和病毒性肝炎的鉴别，但是考虑到肝功能指标和病情严重程度有较大的相关性，诊断特异性欠佳，因此需要联合自身免疫抗体和肝功能指标检测结果结合临床表现对AILD和病毒性肝炎进行鉴别诊断。

综上所述，自身免疫抗体检测对临床诊断自身免疫性肝病具有重要的应用价值，可用于自身免疫性肝病的早期诊断，联合肝功能指标检测有利于提高诊断准确性，值得临床应用推广。