解幽胶囊的质量标准研究

杜成兴 潘年琼 杨熟英 霍昕 杨迺嘉

(1.贵州省生物技术研究开发基地，贵州 贵阳 550002；2.贵州省科晖制药厂，贵州 清镇 551400）

解幽胶囊由5-HMF加辅料制成。5-羟甲基糠醛（5-HMF）是中药中广泛存在的化学成分,在中药炮制、贮藏、配伍过程中含量变化明显。现代药理学研究表明5-HMF具有抗氧化、改善学习记忆、抗过敏、保护神经细胞、抗炎等药理作用[1-4]。本研究采用高效液相色谱法对解幽胶囊中的5-HMF进行含量测定，以期建立解幽胶囊的质量标准[5-9]，为解幽胶囊的进一步开发利用提供参考。

1.仪器和材料

1.1 仪器

AUW120D型电子天平（岛津仪器苏州有限公司），AL204型电子天平（梅特勒—托利多仪器（上海）有限公司），Ultimate 3000高效液相色谱仪（美国赛默飞公司）。其他仪器均由贵州省生物技术研究开发基地提供。

1.2 材料

5-HMF对照品（批号：111626-201610）采购于中国食品药品检定研究院。解幽胶囊样品、药材及试剂由贵州省生物技术研究开发基地提供。

2.方法和结果

2.1 色谱适应性条件

依利特Supersil ODS-B C18柱（250mm×4.60mm，5μm）、流动相为甲醇—水（15:85)、流速为1ml·min-1、柱温30℃、检测波长为280nm；进样量10μL。

2.2 溶液的制备

2.2.1 样品制备方法

取解幽胶囊混合均匀，称取样品0.0318g，置于100ml容量瓶中，加入10%乙醇定容至刻度，摇匀，静置，得样品溶液。

2.2.2 对照品制备方法

精密称取5-HMF对照品10mg，置于100ml容量瓶中，加入10%乙醇定容至刻度，摇匀，静置，得5-HMF对照品溶液（10.2672μg/ml）。

2.3 线性关系考察

精密配制6种浓度的5-HMF对照品溶液：2.5668μg/ml、5.1336μg/ml、10.2672μg/ml、20.5344μg/ml、41.0688μg/ml、82.1376μg/ml，分别进样 10μL，以 5-HMF浓度为X轴，峰面积为Y轴，得线性回归方程。结果表明，5-HMF在2.5668～82.1376μg/ml范围内呈现良好线性关系，回归方程为y=70515x-20018（r=0.9999）。

2.4 稳定性实验

取解幽胶囊适量混合均匀，精密称取样品0.0318g。按2.2.1项下制备方法，得样品溶液，间隔1h进样一次，按2.1项下色谱条件，进样7次，每次10μL，计算样品中5-HMF的含量。结果显示RSD=0.09%，符合中国药典要求（RSD<2%），表明供试品在6h内稳定。

2.5 精密度实验

取解幽胶囊混合均匀，精密称取样品0.0318g，按2.1项下色谱条件，进样6次，每次10μL，计算样品中5-HMF的含量。结果显示，RSD=0.79%，符合中国药典要求（RSD<2%），表明仪器精密性良好。

2.6 中间精密度实验

取解幽胶囊混合均匀，精密称取样品0.0318g，按2.1项下色谱条件，进样6次，每次10μL，计算样品中5-HMF的含量。结果显示，RSD=1.71%，符合中国药典要求（RSD<2%），表明中间精密度良好。

2.7 重复性实验

取解幽胶囊混合均匀，精密称取样品6份，每份0.0318g。按2.1项下色谱条件进样，每次10μL，计算样品中5-HMF的含量。结果显示，RSD=0.96%，符合中国药典要求（RSD<2%），表明实验重复性良好。

2.8 加样回收率实验

取解幽胶囊混合均匀，精密称取9份，每份0.0318g，分为3组。每组按取样量的50%、100%、150%分别加入5-HMF对照品，按2.2.2项下制备方法，得样品溶液，按2.2.1项下色谱条件，进样9次，每次10μL，计算样品中5-HMF的含量，结果见表1。结果显示，平均加样回收率结果为99.93%，RSD=1.44%，符合中国药典要求（RSD<2%），表明实验可行性良好，该方法可用于解幽胶囊的含量测定。

表1 加样回收率实验结果

2.9 含量测定

取3个不同批次中试生产的解幽胶囊混合均匀，每批次称取2份，每份0.0318 g，按2.2.1项下制备方法，得样品溶液，按2.1项下色谱条件，进样10μL，计算样品中5-HMF的含量，结果见表2。结果表明：解幽胶囊中5-HMF的平均含量为32.7310 mg/g，最低为32.5010mg/g。

表2 含量测定实验结果

3.结论

在测定3批解幽胶囊样品的含量时发现，解幽胶囊中5-HMF的平均含量为32.7310mg/g，最低为32.5010mg/g，考虑到实际生产过程中含量会有所不同，因此将解幽胶囊中的5-HMF的限量定为：解幽胶囊每包含5-HMF不得少于32mg。经过方法学考察，解幽胶囊中5-HMF在2.5668～82.1376μg/mL范围内呈现良好线性关系，回归方程为y=70515x-20018（r=0.9999），加样回收率为99.93%（RSD＜2%），说明本方法专属性强，重现性好，可有效控制解幽胶囊的质量，为以后解幽胶囊的进一步开发利用及上市销售提供了前期基础。