急性白血病患者T细胞亚群的变化及其与临床特征和预后的关系

李 慧，赵红英，卢 峰

（1.简阳市人民医院血液内科，简阳 641400；2.云南省滇南中心医院·红河州第一人民医院肿瘤血液科，蒙自 661100；3.简阳市人民医院检验科，简阳 641400）

急性白血病（Acute leukemia，AL）是一种常见的血液系统的恶性肿瘤，其发生、发展与机体免疫功能的紊乱密切相关［1］。在AL的病情发展过程中，机体的免疫微环境是动态变化的。随着免疫微环境的改变，微环境中的各种免疫细胞亚群也随之发生变化［2］。人们可以通过检测T细胞亚群的具体情况来评估机体的免疫状态，间接反映AL微环境的变化情况。但T细胞亚群与疾病的关系仍然存在差异。有文献报道［3］，部分AL患者T细胞亚群百分率与健康人比较没有差异，但亦有研究认为［4］，T淋巴细胞亚群的水平与疾病相关。因此，笔者通过监测AL患者的T细胞亚群变化情况，并动态观察其在AL患者治疗前后的变化，为临床治疗提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2016年6月～2018年6月在我院进行治疗的AL患者80例作为观察组，将其按核型分析和基因检测分为低、中和高危组，例数分别为24例、27例和29例；治疗后按治疗效果重新分为三组，分别为完全缓解组41例，复发组17例以及未缓解组22例。观察组男性45例，女性35例，年龄19～69岁，平均年龄（26.87±4.34）岁。在疾病类型方面，急性淋巴细胞白血病42例，急性髓细胞性白血病38例。并选择同期健康志愿者40例作为正常对照组，该组男性25例，女性15例，年龄18～65岁，平均年龄（24.87±6.54）岁。两组在一般资料等方面进行比较均P＞0.05，具有可比性。本研究经两组知情且同意，并获得本院医学伦理委员会审核并批准。

1.2 纳入与排除标准

1.2.1 纳入标准（1）经血常规，骨髓涂片，流式细胞学，细胞组化染色等检查确诊为AL患者［5］；（2）年龄≥18岁；（3）1月前未接受过相关治疗。

1.2.2 排除标准（1）合并其他血液性疾病者；（2）合并重度感染、严重脏器功能损害或不全者；（3）半年内使用放、化疗，免疫抑制剂者。

1.3 检测方法采集各组患者的外周静脉血2 mL，加入EDTAK2抗凝。①取试管两只，分别标记为对照管和测定管，加入相应的抗体及标本。测定管：20μLCD4-FITC/CD8-PE/CD3-PC5+100μL 全血，对照管：20μLIgG1- FITC/IgG1-PE/IgG1-PC5+100μL全血，混匀，避光15 min。②加入500μL溶血剂，混匀，避光孵育10 min。③加入500μL鞘液及100μL荧光微球混匀，上流式细胞仪（购自美国贝克曼库尔特有限公司）检测。由计算机自动输出结果，单位为%。

骨髓原始细胞≤5%；临床无白血病细胞浸润的症状和体征；外周血红蛋白≥100 g/L（男性）或≥90 g/L（女性），中性粒细胞≥1.5×109 /L且分类无幼稚细胞，血小板≥100×109 /L为完全缓解。完全缓解患者出现骨髓原始细胞＞5%和（或）髓外白血病细胞浸润和（或）遗传学或分子生物学再次出现阳性为复发。

1.4 统计学方法使用SPSS 17.0统计软件对数据进行分析。患者T细胞亚群水平为计量资料，使用均数±标准差来表示，初诊AL组和正常对照组比较使用独立样本t检验，三组间比较使用方差分析，两两比较使用LSD-T检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 初诊AL组和正常对照组患者T细胞亚群比较

初诊AL组与正常对照组相比，CD3+T、CD4+T以及CD4T+/CD8T+显著降低，CD8+T显著升高，均P＜0.05，差异均有统计学意义，见表1。

表1 初诊AL组和正常对照组T细胞亚群比较

2.2 低、中和高危组患者T 细胞亚群比较三组患者的CD3+T、CD4+T、CD8+T以及CD4+T/CD8+T比较，均无显著性差异（P＞0.05）；且两两比较，无显著性差异（P＞0.05），见表2。

表2 低、中和高危组患者T 细胞亚群比较

2.3 治疗后T 细胞亚群比较与完全缓解组相比，未缓解组的CD3+T、CD4+T以及CD4+/CD8+水平均降低，CD8+T水平升高（P＜0.05）；复发组的CD3+T、CD4+T水平均升高（P＜0.05）。与未缓解组相比，复发组的CD3+T、CD4+T以及CD4+T/CD8+T水平均升高（P＜0.05）。

表3 治疗后T 细胞亚群比较

3 讨论

T淋巴细胞具有免疫杀伤、免疫辅助以及免疫抑制等功能［6］。根据T细胞表面的标志和功能状态，可分为若干亚群，各类T细胞在机体内数量和功能均处于平衡状态，共同维持机体免疫功能的稳定状态［7］。各类T细胞亚群出现比例失调或功能受损，是血液肿瘤形成的一大原因［8］。有学者研究报道［9］，AL患者存在T细胞亚群数量的改变与功能的损害。因此对AL患者外周血中CD3+T、CD4+T、CD8+T以及CD4+T/CD8+T的情况进行检测，了解其与临床特征和预后的关系，对临床上治疗AL具有重要意义。

机体的免疫异常可使肿瘤细胞逃避宿主的免疫监视，导致恶性肿瘤的发生［10］。CD4+T细胞亚群和CD8+T细胞亚群均为T细胞亚群的两个分类，CD4+T细胞亚群具有免疫协调功能，而CD8+T细胞亚群则具有杀伤靶细胞和免疫抑制的作用，因此CD4+T/CD8+T的比例稳定对维持细胞的免疫功能具有重要作用［11，12］。另外，CD3+T则一般用于计数T细胞的总数，其数量的降低显示整体免疫性功能的持续降低［13］。本次研究结果中，初诊AL组与正常对照组相比，CD3+T、CD4+T以及CD4+T/CD8+T显著降低，这提示AL患者存在T细胞平衡失调，其免疫功能受到抑制或T细胞数量有所下降，使得机体识别和杀伤肿瘤细胞的能力下降，肿瘤细胞生长失去抑制，对健康的细胞、组织的侵袭能力更强［14］。此外，CD4+T/CD8+T比值显著降低时，CD8+T水平却显著升高，CD4+T/CD8+T比值严重倒置，提示AL患者机体的免疫功能长期处于抑制状态［15］。这可能与AL患者免疫应答及免疫监视出现异常所致。另一方面，本次研究还显示，三组患者的CD3+T、CD4+T、CD8+T以及CD4+T/CD8+T比较，均无显著性差异；且两两比较，无显著性差异。这提示笔者急性白血病患者的CD3+T、CD4+T、CD8+T以及CD4+T/CD8+T水平与核型分析和基因检测的分类无关。

本次研究还监测了治疗后AL患者T细胞亚群的变化情况，结果显示未完全缓解组与完全缓解组相比，其CD3+T、CD4+T以及CD4+T/CD8+T水平均降低，CD8+T水平升高；复发组与完全缓解组相比其CD3+T、CD4+T水平均升高。复发组与未缓解组相比其CD3+T、CD4+T以及CD4+T/CD8+T水平均升高。这说明AL患者存在的免疫功能失调经过治疗之后有所改善。CD3+T、CD4+T的含量以及CD4+T/CD8+T的比值若降低，B细胞分泌抗体形成那个免疫复合物并激活补体，将会导致机体组织受损或生理功能紊乱。这可能是因为AL患者的免疫功能处于免疫抑制的状态，机体识别和杀伤突变细胞的能力亦下降［16，17］，但是治疗之后，若AL患者疾病得到缓解或痊愈，其水平有所升高。CD8+T细胞增多是引起细胞免疫损害的基础，可通过CD4+T/CD8+T比值得到敏感的反映［18，19］，当 CD4+T/CD8+T比值升高，提示免疫应答的正调节点占有优势。有研究报道［20］，CD4+T/CD8+T比值的升高更有利于患者的恢复和预后，维持细胞免疫反应的平衡状态。因此，细胞的免疫功能若受损将会进一步加重病情，而改善细胞免疫功能将有利于机体的恢复。治疗过后，CD3+T、CD4+T的含量以及CD4+T/CD8+T的比值明显上升，这有助于加快机体生理功能的恢复，提高患者抗肿瘤的能力。

总之，对T细胞亚群的变化情况进行检测，特别是CD4+T/CD8+T比值的检测，对AL患者的免疫功能的监测以及临床特征和预后有一定的临床意义。