畜产品中喹诺酮类药物检测技术

杨丹

喹诺酮类药物，特别是氟喹诺酮类抗生素的发展史可追溯到半个世纪之前。氟喹诺酮类药物又可称为吡啶酮酸类、吡酮酸类、沙星类药物，属于含氟第三代氟喹诺酮类化学合成抗生素，是广泛应用的人工合成抗菌药。喹诺酮类药物主要通过阻断DNA回旋酶，造成细菌DNA不可逆损害来达到抗菌效果，它们具有抗菌、抗支原体、抗球虫等作用。因喹诺酮类药物对多种革兰氏阴性菌具有良好的杀菌作用，是养殖中常用到的三大类药物之一，主要用于预防和治疗畜禽及鱼类的感染性病状。因为喹诺酮类药物价格低廉、抗菌谱广，被广泛应用于临床和兽药领域。

滥用引发的环境危害和人类疾病风险成为目前的焦点，甚至在经济利益的诱惑下，在养殖、加工贮存等过程中添加过量的抗菌药物，造成抗生素类药物残留量超标。喹诺酮类药物残留通过食物进入人体，造成人类中毒、过敏，甚至致癌、致畸、致突变等严重后果，给消费者的健康带来潜在的危害。有些国家将喹诺酮类药物列为禁药，或严格要求用量。目前，欧盟制定的喹诺酮类药物在动物源性食品中的残留标准是不超过100纳克/毫升。

目前，常用于畜產品中氟喹诺酮类抗生素残留的前处理方法有固相萃取法、基质固相分散萃取法、超临界流体萃取法、固相微萃取、分子印迹聚合物法、分散液液微萃取等方法。检测畜产品中残留的喹诺酮的方法有高效液相色谱法、液相色谱—串联质谱法、液相色谱—四极杆—飞行时间质谱法、荧光免疫测定法、免疫学方法等。胶体金免疫层析技术分为竞争法、间接法和双抗夹心法。胶体金法检测原理是以条状纤维层析材料为固相，样品溶液在毛细作用下在层析条上泳动，使样品中的层析材料上针对待测物质的受体与待测物产生特异性强、亲和性高的结合。在层析过程中免疫复合物容易被截留或富集在层析材料的一定范围内，可以通过酶促的显色反应或直接使用可目测的着色标记物来标记，在短时间内就可以观察到直观的实验结果。禽蛋中的药物残留主要使用胶体金免疫层析技术的竞争法。试纸条对含有恩诺沙星、沙拉沙星、双氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、培氟沙星、依诺沙星和恶喹酸等药物的猪尿样品的检出限值为20微克/升，检测的特异性高，在37℃时可保存160天左右;在4℃时，可保存24个月。胶体金免疫层析技术在基层养殖场易操作、易广泛应用，对工作人员的专业要求技术水平不高，应用到基层养殖场比较切合实际且便捷。

质谱分析是先将样品离子化，按离子的质荷比再进行分离，测量每个离子谱峰的强度，实现分析目的的分析方法。色谱与质谱的联用将色谱的分离能力与质谱的定性功能相配合起来，实现对复杂混合物进行更精准的定量和定性分析，简化了样品的前处理过程，使分析样品的过程更简单、快捷。高效液相色谱法拥有灵敏、快速、高分辨率、重复性稳定的优点，已经普遍应用到物质的定量和定向分析检测。在分析氟喹诺酮类抗生素残留中，高效液相色谱需要根据不同动物源性样品选用相应的检测器进行操作，通过回收率、定量限和检出限等系列参数计算出喹诺酮类药物的残留量。