支气管哮喘患者外周血CD3+、CD4+、CD8+、HLA-DR 细胞含量与疾病严重程度的关系研究

马少康

T 细胞为淋巴细胞的主要成分,可以参与多种生物功能,杀死靶细胞,辅助或者抑制B 细胞产生抗体。CD3+、CD4+、CD8+是T 淋巴细胞亚群的重要组成部分,参与免疫应答。支气管哮喘简称哮喘,慢性气道炎症是一种涉及多种细胞,如涉及嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T 淋巴细胞、中性粒细胞、平滑肌细胞及气道上皮细胞等成分的慢性炎症性疾病,临床上发病率比较高。近几年由于环境的改变,该病的发病率逐年上升,中国约有2000 万人罹患哮喘,严重影响患者的生活质量,给社会带来承重的经济负担［1］,该病是一种由临床免疫机制介导的慢性肺病并与临床患者的免疫功能好坏密切相关。罹患哮喘患者临床体液和临床细胞免疫功能均异常。由于该病反复发作,治疗费用较高,因此如果判断疾病的进展非常重要。大量研究表明临床上支气管哮喘患者的外周血淋巴细胞亚群的增加与否与临床哮喘发作程度密切相关。本研究对支气管哮喘患者外周血中CD4+、CD8+、CD3+、HLA-DR细胞水平进行研究,探讨支气管哮喘患者外周血T 细胞的关系,为临床支气管哮喘的免疫预防和临床诊断提供理论依据,现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018 年1 月～2019 年1 月本院80 例支气管哮喘患者,随机分为试验组(急性发作期患者)和对照组(非急性发作期患者),各40 例。其中,试验组患者男21 例,女19 例；年龄52～63 岁,平均年龄(57.0±4.5)岁；病程9～13 年,平均病程(10.2±3.23)年；基础疾病：高血压2 例,冠心病1 例,糖尿病2 例。对照组患者男20 例,女20 例；年龄46～67 岁,平均年龄(55.0±4.2)岁；病程3～10 年,平均病程(5.3±3.18)年；基础疾病：高血压2 例,冠心病1 例,糖尿病2 例。两组患者的性别、年龄、病程、基础疾病等一般资料比较,差异无统计学意义(P＞0.05),具有可比性。

1.2 纳入及排除标准

1.2.1 纳入标准 ①研究得到了临床医院伦理委员会的批准,所有患者都深度了解研究且均签署知情同意书；②表现为不停反复喘息、咳嗽、呼吸短促、胸闷的患者,接触过过敏原以及冷空气、物理、化学刺激等的患者,呼吸道感染的患者,过度运动以及过度通气(如大笑和哭闹)的患者,夜间或者凌晨发作加剧的患者；③发病过程中可在双肺听到散在或弥漫的喘息声的患者；④抗哮喘治疗可有效或自发缓解的呼气期延长的患者。

1.2.2 排除标准 ①其他肺部疾病包括肺纤维化、肺癌、支气管扩张等患者；②肝肾功能不全患者；③最近使用免疫抑制剂的患者；④肿瘤患者、结核患者以及其他免疫性疾病的患者；⑤不愿意参加研究的患者。

1.3 方法 所有受试者在早晨均抽取5 ml 空腹外周静脉血,测定外周血中CD3+、CD4+、CD8+、HLA-DR 细胞的含量。检测过程严格按照试剂盒说明书操作。

1.4 统计学方法 采用SPSS20.0 统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差()表示,采用t 检验；计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

试验组CD8+、CD3+、HLA-DR 细胞水平分别为(36.35±4.16)%、(1365.90±301.40)%、(1.98±0.72)%,均高于对照组的(23.41±3.63)%、(1105.90±381.40)%、(1.59±0.71)%,CD4+、CD4+/CD8+细胞水平分别为(22.52±3.41)%、(0.61±0.62),均低于对照组的(30.31±2.93)%、(1.30±0.55),差异均具有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 两组患者外周血CD8+、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、HLA-DR 细胞水平比较()

表1 两组患者外周血CD8+、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、HLA-DR 细胞水平比较()

注：与对照组比较,aP＜0.05

3 讨论

T 淋巴细胞来源于人体骨髓多能干细胞,其为卵黄囊和胚胎期的肝脏。在人类胚胎和初级阶段,骨髓中的一些多能干细胞或前T 细胞在胸腺激素的诱导下进入胸腺并且长大最后变成具有免疫活性的T 细胞。成熟T 细胞通过血流分布到外周免疫器官的胸腺依赖区并通过淋巴管、外周血和组织液循环最后发挥细胞免疫调节功能。T 细胞的循环利用有助于广泛接触进入人体的抗原并增强免疫反应最后使免疫记忆保持更多时间。T 细胞膜上有许多不同的标记物,其主要是表面抗原和表面受体。这些表面标记物是结合在细胞膜上的大蛋白质分子。辅助T 细胞在其他T 淋巴细胞诱导的免疫应答中起辅助和增强作用。由于支气管哮喘的具体发病机制尚不清楚,一些研究报道过敏反应和气道炎症与支气管哮喘的病理机制密切相关,免疫功能和炎症是影响过敏反应和气道炎症的重要因素。免疫应答的主要参与细胞为T 淋巴细胞,因此,T 淋巴细胞的异常变化是评价哮喘的重要指标。

哮喘是一种免疫性过敏性疾病,其特征是慢性呼吸道炎症反应涉及多种细胞［2］。大量研究发现,T 淋巴细胞亚群的异常表达对支气管哮喘的病情有较大影响。临床上CD3+和CD4+以及CD8+是临床T 淋巴细胞亚群的重要组成部分,且临床上CD4+和CD8+的比值分别表示免疫功能增强或减弱的程度。CD4+/CD8+是评价免疫功能的关键指标。气管哮喘发作时,CD4+T 细胞的激活和CD8+T 细胞功能的抑制是一致的［3］。提示支气管哮喘发作辅助性T 细胞的比例明显优于抑制性T 细胞,进一步说明CD4+T 淋巴细胞亚群的表达在支气管哮喘发作中起着重要作用。

病理学临床免疫反应是临床哮喘患者气道慢性炎症发生的主要原因,当患者气道受到刺激时会产生和释放炎症介质并导致呼吸分泌物增多,影响肺通气。T 淋巴细胞的主要功能是调节蛋白抗原诱导的免疫应答,并且其中最重要的是CD4+T 细胞,而且CD4+T 细胞与CD8+T 细胞比例的失衡会影响到患者免疫系统。有研究表明,当CD4+T 细胞或CD8+T 细胞的水平或功能异常时将会导致患者T 淋巴细胞调节失去平衡［3］,并导致机体发病。有学者对健康人外周血CD8+T与哮喘患者相比较发现,无论是发作期还是缓解期,其患者外周血的临床CD8+T 细胞水平明显高于健康人,且CD4+T细胞水平以及CD4+/CD8+比值均低于健康人,这项研究表明,哮喘患者的T 淋巴细胞有差别于正常人,说明通过T 淋巴细胞的含量可对患者的疾病状态进行判断。

有学者对哮喘患者进行分组,急性发作期与非急性发作期相比较,发现在急性发作期下其外周血的CD8+T 细胞水平明显高于非急性发作期［4］。而哮喘患者CD4+T 细胞水平和CD4+/CD8+比值均低于非急性发作期,且以上研究与本研究结果相同。最近研究表明,哮喘患者CD4+细胞在维持免疫平衡和抑制炎症方面起着重要作用,并与哮喘患者气道的炎症临床发作密切相关。哮喘患者外周血中CD4+数量减少会导致哮喘患者免疫抑制减弱,并且患者T 淋巴细胞的功能取决于T 淋巴细胞表面抗原的识别［5］。

哮喘患者T 淋巴细胞活化阶段发生在抗原刺激患者淋巴细胞活化和增殖的阶段,哮喘患者激活T 淋巴细胞后分泌的细胞因子与细胞接触后分泌的细胞因子激活其他的免疫细胞,最近的研究发现哮喘患者T 淋巴细胞在活化后会表达多种表面分子,包括CD69 和HLA-DR。这些分子的表达作为哮喘患者T 细胞活化的指标并已广泛应用于哮喘患者T 淋巴细胞的研究中。

在许多慢性传染病如艾滋病病毒感染、慢性乙型肝炎感染、EB 病毒感染和自身免疫性疾病,如系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎中,外周血中T 淋巴细胞表面活化标记物等的表达都会加强。临床上哮喘患者体液免疫和细胞免疫都依赖于患者T 淋巴细胞的增加,并通过鉴定抗原从而使细胞呈现特定抗原以帮助CD4+T 淋巴细胞。哮喘患者CD8+T 细胞活化后成为具有细胞毒性的T 淋巴细胞,其是哮喘患者免疫应答的重要效应细胞,并具有临床抗原特异性,因此检测哮喘患者T 淋巴细胞活化标志物有助于判断患者机体的细胞免疫学功能［6］。急性期患者CD4+T 淋巴细胞、CD8+T 淋巴细胞及HLA-DR 的表达水平高于缓解期。急性期哮喘患者比缓解期哮喘患者的T 淋巴细胞活化增多,且比急性期哮喘患者的细胞免疫功能活跃,这与以往的研究一致,认为T 淋巴细胞介导并参与细胞免疫反应,在哮喘患者气道病变和全身炎症反应的发病机制中起着重要作用。

综上所述,通过CD8+、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、HLADR 细胞水平对哮喘患者疾病的进展情况进行评估具有显著意义。但是本研究尚有不足之处,研究样本例数过少,观察指标比较单一,应该从多中心进行样本抽取,扩大样本数量,增加免疫指标,为临床治疗提供作证。