高温季节加州鲈的病毒病防控与肝脏保健

◆作者：巩华 赵长臣 陈总会 赖迎迢

◆单位：中国水产科学研究院珠江水产研究所

加州鲈，即大口黑鲈(large mouth bass，Micropterus salmoides)，属广温肉食性淡水鱼类，是目前广东省乃至全国重要的特种养殖鱼类。大口黑鲈是凶猛的肉食性鱼类，无节幼虫和轮虫常用作大口黑鲈仔鱼的开口饲料，鱼苗以轮虫和小型甲壳动物为食，通过驯化大口黑鲈能够摄食颗粒饲料。大口黑鲈长到40～60cm 时就能被驯化吃软颗粒饲料（Williamson，1990）。

该品种原产美国，因其适应能力强、养殖周期短、抗病能力强、肉质鲜美等特点，从1970 开始从密西西比河流域推广到世界各地，1983 年引入我国广东，成为地方特色名优品种，养殖产业规模不断扩大，深受行业重视,但是随着养殖密度的不断增加、水体环境恶化以及病原微生物的传播，加州鲈病害相关的报道越来越多，发病越来越严重。特别是病毒病，如虹彩病毒科（Iridoviridae）蛙病毒属（Ranavirus）的大口黑鲈病毒（Large mouth Bass Virus，LMBV）、大口黑鲈溃疡病病毒（Large mouth Bass Ulcerative disease Virus，LMBUV），虹彩病毒科细胞肿大病毒属（Megalocytivirus）的传染性脾肾坏死病毒（Infectious Spleen and Kidney Necrosis Virus，ISKNV），弹状病毒科（Rhabdoviridae）水泡病毒属（Vesiculovirus）的加州鲈弹状病毒（Large mouth Bass Perhabdovirus，LBPV），自2008 年发病以来，从苗种到成鱼，都有发生，甚至近年来在加州鲈上还检出神经坏死病毒（Nervous necrosis virus，NNV），这些病毒病虽然发病季节各不相同，但病毒病在广东全年都会发生，可感染鱼苗、幼鱼和成鱼，有时致死率最高可达90%以上，可通过水源、鱼卵、饵料鱼等进行水平传播，同时也存在通过亲鱼进行垂直传播的可能。

目前鱼类病毒病还没有特效药物，对加州鲈的疫苗研究方兴未艾，除了做好苗种检疫和隔离之外，只能通过外调水体，内服保肝产品提高免疫力，进行综合防控。特别高温季节，加州鲈摄食旺盛，需要从管理各个环节入手，积极防控各类病害发生。

1 加州鲈的病毒病

1.1 蛙属虹彩病毒

由病毒感染引起的加州鲈疾病死亡率高，且难以防治，对世界范围内的加州鲈养殖业带来了较为严重的威胁。加州鲈病毒首次发现于1991 年的美国弗罗里达州的野生鱼体中，1995 年美国南卡罗莱纳州的水库养殖加州鲈暴发大规模死亡，经病原分离鉴定为LMBV，分子特性研究表明该病毒隶属于虹彩病毒科（Iridoviridae） 蛙病毒属（Ranavirus）。我国最早发现于2008 年广东省的佛山顺德地区，被其感染的加州鲈死亡率高达60%以上。此次流行暴发的加州鲈溃疡病的发生温度为25～32℃，病鱼体表有斑块状出血性溃疡，甚至大片溃烂，裸露肌肉坏死并有出血，尾鳍、胸鳍和背鳍基部红肿溃烂，部分病鱼体色变黑，眼有白内障，或伴有心腔血块聚积，鳃动脉扩张淤血，鳃丝和肝脏发白，少数病鱼螺旋游动，肝、脾、肾肿大并伴有出血。病鱼肝脏肿大、颜色发白或发黄，也有的发病鱼体表虽完好但脾脏肿大，且此次病毒主要影响成鱼。实验分离得到的加州鲈溃疡病病毒（LMBUV）在病毒粒子大小与LMBV 相似，与裂唇鱼病毒（DFV）的氨基酸序列同源性最高，为100%；与LMBV 氨基酸序列同源性为98%，推测此次暴发溃疡病是由观赏鱼DFV 病毒传播感染加州鲈所致，这也是我国加州鲈的蛙属虹彩病毒病首次报道。

1.2 细胞肿大虹彩病毒

2009 年在广东省佛山南海、顺德等地，一种新的病毒被发现。发病鱼在水面离群慢游，鳃变白或伴有出血点，肝脏肿大变白或土黄色，少数鱼肝脏有出血斑，脾脏肿大变黑红色，肾脏也肿大。一些病鱼腹隔膜破裂、溃烂，黏连在一起。部分病鱼体色变黑，下颌至腹部发红，眼眶四周充血，严重时个别眼球突出。该病以肝脾的肿大为主要特征，暂命名为大口黑鲈肝脾肿大病。这种病毒的细胞质中存在大量的病毒颗粒，分子特性分析显示，与鳜染性脾肾坏死病毒（ISKNV）的MCP 基因核苷酸同源性为98%，氨基酸同源性为99%，说明该病毒与ISKNV 有很近的亲缘关系，也可能就是ISKNV 的一个病毒株。电镜观察和MCP 基因测序分析结果显示，该病毒属于虹彩病毒科细胞肿大病毒属（Megalocytivirus）。

1.3 弹状病毒

2013 年以来，在加州鲈的主养区的苗种发病严重，该病主要在4-5 月、10-11 月，水 温 在25℃～28℃，发病快，可导致100%死亡。病鱼主要症状是烂身、烂鳍、停止摄食，濒死鱼在水面漫游，严重者体色发黑。解剖病鱼鳃有少量出血点、肝脏严重肿大、充血，呈“花肝”，肾脏肿大，胃肠空、无食，其他组织器官无明显变化。加州鲈鱼弹状病毒病的病原为加州鲈弹状病毒，属水泡病毒属（Vesiculovirus），为线性负链单链RNA 病毒，病毒粒子大小为53nm×140nm，形态似棒状或子弹状。

2 临床诊断

这些病毒病在生产中主要通过临床典型症状、组织病理变化以及发病季节、水温、发病程度、流行速度等初步判断，但临床确诊就要通过分子手段，即进行核酸的各种聚合酶链式反应（PCR）检测，通过保守序列的特异性条带进行分析。

3 防控措施

目前加州鲈的养殖中，病毒病危害日渐严重，这些病原可以通过水体和病鱼传播，有的在苗种中潜伏时间较长，随着苗种携带，严重时80%池塘发病，死亡率短时间内可高达90%，用药效果不佳，经济损失大，在病害发生之前进行预防具有积极意义。

养殖过程中注意调水改底。水产养殖动物生活在水中，是一个生产、净化场所，必须满足环境生物生存、生长的要求，才能有效地稳定环境和提高生产、净化效能，水质的好坏直接决定动物的健康状况。所以，除了保证溶解氧、合适的温度、pH 值、一定的浮游生物量外，养水的关键是氨氮的天然和人工控制。注意养殖过程中的底质维护，池塘底部的土壤是许多积累在池塘生态系统中的物质仓库，也是各类病原储存的温床。一般增氧机，特别是涌浪机、微孔增氧设备等，可以促进水体上下交换，提高水体底部的含氧量，降低条件性致病菌的繁殖，提高机体免疫力。

一旦发病，使用药物须注意有关事项，忌用强刺激性药物。治疗病毒病的药物还没有特效药，许多相关疫苗也正在研发中，所以在养殖过程中应该适当控制养殖密度，严格消毒，杜绝传染源传播，同时在饲料中添加一些营养保健药物，生产中防控鱼类病毒病最好的选择还是内服中药类制剂，如三黄散、板蓝根、穿心莲等清热解毒、凉血消肿类中药。复方中草药添加剂的使用，使得合成激素的胆固醇含量增加，从而促进了鱼体代谢和生长；搭配抗菌药物防止细菌类病原继发性感染，同时添加维生素等，调理动物肝脏。

4 加州鲈肝脏调理

在临床诊断过程中，几乎所有发病加州鲈的肝脏都处于非正常状态：肝脏肿大，质地变脆，同时颜色变浅、变黄，肝脏有出血点或斑状出血，即“花肝”症状。肝脏在鱼体内主要分泌胆汁，合成各种消化酶和储存糖原，进行蛋白质、脂肪、碳水化合物的异化和同化作用。养殖环境中的农药、兽药、添加剂、激素和病原毒素等可能会危害到鱼体健康的外源物质的代谢主要在肝脏中进行，肝脏在解毒抗应激方面发挥主力作用。而在发病高峰期，大多数动物生长旺盛，摄食量大，肝脏负担大。动物排泄的氨氮多，造成水中氨氮等有毒化学物质浓度上升，对动物机体危害大；高温季节易出现底质、水质的持续恶化，有毒有害物质长时间超标，养殖密度大的水体在养殖中后期，蓝藻、裸藻等分泌有害藻毒素的微藻生长旺盛，都会影响机体，特别是肝脏。高温季节养殖鱼摄食旺盛，特别前期攻料太猛，造成体内脂肪、糖原蓄积过多，肝脏负担大，还可能形成脂肪肝。

通过驯化加州鲈能够摄食颗粒饲料到体长40～60cm，目前加州鲈养殖中已可全程投喂人工饲料，饲料是水产养殖过程中最大宗的投入品，饲料的选择与管理是养殖成败的关键因素之一。研究也发现，诱发加州鲈肝脏疾病的主要原因可能就是饲料中高水平的可消化碳水化合物（＞20%）和霉菌毒素等，特别是使用的膨化饲料中，适当增加淀粉含量可提高膨化系数，增加浮水率，且淀粉含量稍高可增加挤压操作宽度，易获得高质量膨化颗粒。但已有研究表明肉食性鱼对葡萄糖的消化吸收效率高，但血液中葡萄糖的清除速率慢，易引起持续性高血糖，高糖会引起加州鲈鱼体肝脏的病变，增加代谢负担，生长减缓。室外养殖实验中饲料的碳水化合物由27%降低到20%，可改善加州鲈的肝脏组织形态，提高运输过程抗逆性和成活率。体重23～29g的加州鲈养殖30 天的实验表明，加州鲈饲料中纤维素的含量不能超3.5%，否则会造成肝脏组织形态和功能的显著性变化。

因此在加州鲈病毒病的预防中，保肝护肝应该成为重要措施之一。

4.1 中草药

中草药中含有多种生物活性物质和天然营养物质，能促进动物机体代谢和蛋白质及酶的合成，提高肝脏代谢功能，降低肝脏负担。很多中药组方，如龙胆泻肝散、小柴胡散、板蓝根散、三黄散等是很好的保肝类组方，同时具有清热解毒的功效，在养殖过程中，特别是高温季节添加，可以提高免疫力，降低肝脏应激强度。但是由于加州鲈是肉食性鱼类，对中草药的消化吸收能力普遍不如畜禽动物（消化道肌肉层厚度、肠壁绒毛数量、消化酶的种类和活性），对中草药加工工艺要求更高，如极细粉（200 目以上）的效果比普通散剂（40 目）要显著得多，而在生产中使用中药提取物的效果更佳。

4.2 维生素

饲料中添加维生素可以很好维护肝脏功能。如VC 参与各种物质代谢，特别是其作为羟化酶的辅酶必须物质。如VC 作为脯氨酸和赖氨酸羟化酶的辅酶，催化羟脯氨酸和羟赖氨酸的形成，而脯氨酸和赖氨酸是结缔组织、上皮组织、骨组织中的胶原蛋白的重要组成成分，VC 不足，可导致毛细血管脆性大大提高，骨骼发育畸形，伤口愈合难等，严重不足时可导致坏血病。而动物体内胆固醇转变为胆酸的过程中必需经有VC 参与的羟化反应，才能使胆固醇以胆酸盐的形式排出体外。VC 还可以调节机体免疫力及应激反应，大量研究表明饲料中添加150～200mg/kg水平的VC 能提高加州鲈的生长等相关各项生理机能，增强抗病力，提高饲料利用效率及鱼体存活率。而VA、VD、VE 等是肉食性鱼类的必须维生素，以加州鲈生长性能、钙磷代谢、血清和肝脏抗氧化能力以及抗感染能力等作指标，对饲料中维生素A 水平的最适需求量为2600～3550 IU /kg，VD3的 最适需求量为1370～1340 IU/kg，VE 最适需求量为400IU/kg 以上。

4.3 益生菌

饲料中添加酵母粉、乳酸菌等益生菌，能够维护肝脏机能。酵母菌、乳酸菌等能将食物中的大分子蛋白质，部分降解为小分子肽和游离氨基酸，还可以分泌乳酸，产生多种消化酶，促进鱼体胃肠的消化吸化，减轻肝脏负担。酵母水解物除小肽、游离氨基酸及丰富的B 族维生素外，还有大量的甘露聚糖、葡聚糖和核苷酸等益生物质，能够显著提高肝脏活性，特别是肝脏中的转氨酶活性。乳酸菌能产生B 族维生素，包括叶酸、胆酸、生物素、维生素B6和维生素K 等，提供肝脏活动的辅酶，促进肝脏中的物质同化作用。研究发现，随着酵母等蛋白含量升高，加州鲈生长加快，但水体中总氨氮水平显著升高，会影响肝脏健康，一般以葡聚糖和甘露聚糖为指标，其最适需求量分别为600～900 和400～600 mg/kg。此外还需注意益生菌不能与具有抗菌作用的添加物一起使用。

4.4 其它活性物质

饲料中还可以添加胆汁酸、氨基酸、酶类等活性物质。胆汁酸是胆汁的主要成分，是动物机体在进行降解胆固醇的途径中的降解产物（固醇类物质），能够将脂肪和脂类物质乳化为油水混合状态，进而利于脂肪酶与脂类物质的作用，促进脂肪的消化代谢，不过胆汁酸蓄积在肝脏和血液中，可引起肝坏死和机体系统与器官的损伤。一般来说，胆汁酸在加州鲈饲料中的推荐剂量为250～300mg/kg。饲料中半胱氨酸盐酸盐能显著提高加州鲈的特定生长率、摄食率及肠道胃蛋白酶和胰蛋白酶活性，其添加量为620～680mg/kg。还需要注意的是，胆汁酸等有机物的含量和种类具有生物物种差异性，产生功效的物质也不相同，在添加时除注意添加剂量，还要注意选择适合加州鲈需要的产品种类。

此外，为了防止加州鲈饲料原料的氧化产生危害，需添加外源性的抗氧化剂，一般添加硒元素，特别是有机硒，但高水平的硒会对肝细胞有一定毒性。在综合生长性能、血浆生化指标、组织抗氧化指标及肝脏组织结构等指标，当饲料硒本底含量为0.76 mg/kg 时，加州鲈硒元素最高推荐剂量为0.5 mg/kg（总硒含量为1.29 mg/kg）。鱼粉、磷虾粉等动物蛋白质原料中硒元素水平高，因此在加州鲈饲料中使用鱼粉时要综合考虑原料来源中各有效成分的含量。

参考文献：（略）