青年鸡新城疫、高致病性禽流感免疫抗体检测

谢 梅，刘广喜，田亚娜

（衡水市冀州区农业农村局 053200）

2016 年以来，衡水市冀州区某青年鸡养殖场根据疫苗厂家的建议结合本场经验，自拟免疫程序进行鸡新城疫、高致病性禽流感等主要疫病免疫，未发生过新城疫、高致病性禽流感。 为摸清该场青年鸡免疫抗体水平，给免疫工作提供科学依据，我们于2019 年7 月30 日对该场52 日龄青年鸡随机抽取30 只鸡血清进行了鸡新城疫、H5 亚型禽流感(Re-11 株，Re-12 株)和H7 亚型禽流感（H7Re-2 株）免疫抗体检测。 通过检测，鸡新城疫血凝抑制抗体效价平均为9.1log2，H5 亚型禽流感(Re-11 株)血凝抑制抗体效价平均为9.8log2，H5 亚型禽流感(Re-12 株)血凝抑制抗体效价平均为9.2log2，H7 亚型禽流感（H7Re-2 株）血凝抑制抗体效价平均为10log2，免疫抗体效价高而整齐，现将该场鸡免疫方案及免疫抗体检测结果报告如下，供兽医同行和养鸡工作者参考。

1 鸡饲养管理和免疫情况

1.1 饲养管理情况

该青年鸡养殖场位于村东南角，距村500m，养殖场周围为杨树林。 育雏舍为全封闭鸡舍，自动控温、自动通风、人工光照。育雏笼为阶梯式育雏笼，自动饮水、自动喂料、自动清粪，自己出饲料配方让某饲料厂配制混合饲料。 采取全进全出饲养管理方法，每批饲养35000～40000 只，鸡饲养周期55～60d。

1.2 免疫情况

1.2.1 1 日龄在孵化场喷雾免疫鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗（默沙东Ma5+Co30）1 头份。

1.2.2 7 日龄用肇庆大华农生物药品有限公司生产的鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗点眼1.2 头份，同时肌肉注射肇庆大华农生物药品有限公司生产的鸡新城疫、H9 亚型禽流感二联灭活疫苗0.3mL。

1.2.3 14 日龄翅根刺种杨凌绿方生物工程有限公司生产的传染性喉气管炎、鸡痘二联活疫苗1.5 头份，同时肌肉注射青岛易邦生物工程有限公司生产的重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗（H5N1Re-11 株+Re-12 株，H7N9H7-Re2 株）0.3mL。

1.2.4 21 日龄用肇庆大华农鸡新城疫、 传染性支气管炎二联活疫苗1.5 头份，同时肌肉注射肇庆大华农生物药品有限公司生产的鸡新城疫、H9 亚型禽流感二联灭活疫苗0.3mL。

1.2.5 35 日龄肌肉注射青岛易帮生物工程有限公司生产的重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗（H5N1Re-11 珠+Re-12株，H7N9H7-Re2 株）0.4mL。

2 实验材料和方法

2.1 检测方法 高致病性禽流感诊断技术GB/T 18936-2003血凝和血凝抑制（HA-HI）试验。

新城疫诊断技术GB/T 16550-2008 血凝和血凝抑制 （HAHI）试验。

2.2 检测仪器 96 孔90°V 型血凝板、5～50μL 多道移液器、5～50μL 单道移液器、微量振荡器、生化培养箱等。

2.3 检测试剂

2.3.1 ND 抗原 生产厂家： 青岛立见诊断技术发展中心；批号：010131801；生产日期：20180423；有效期：20200422。

2.3.2 H7 亚型Re-2 抗原 生产厂家： 哈尔滨国生生物科技股份公司；生产日期：20190415；有效期：20210414。

2.3.3 H5 亚型Re-11 抗原 生产厂家：哈尔滨国生生物科技股份公司；生产日期：20190416；有效期：20210415。

2.3.4 H5 亚型Re-12 抗原 生产厂家：哈尔滨国生生物科技股份公司；生产日期：20190415；有效期：20210414。

2.4 被检血清 于2019 年7 月30 日该批52 日龄时，随机抽取30 只鸡翅静脉血各2mL，自然分离血清，-15℃以下保存被检。

3 免疫抗体检测结果

3.1 ND 血凝抑制免疫抗体检测结果

3 份10log2，27 份9log2，平均为9.1log2，抗体水平较高。

3.2 H5(Re-11)血凝抑制抗体检测结果

26 份10log2，3 份9log2，1 份8log2，平均为9.8log2，抗体水平高而整齐。

3.3 H5(Re-12)血凝抑制抗体检测结果

8 份10log2，21 份9log2，1 份8log2，平均为9.2log2，抗体水平高而整齐。

3.4 H7N9 血凝抑制抗体检测结果

30 份10log2，抗体水平高而整齐。

4 讨论与分析

4.1 从实验结果可以看出， 该场于7 日龄和21 日龄接种二次肇庆大华农生物药品有限公司生产的新城疫、H9 亚型禽流感二联灭活疫苗， 于14 日龄和35 日龄接种二次青岛易邦生物工程有限公司生产的重组禽流感病毒 （H5+H7） 三价灭活疫苗（H5N1Re-11 株+Re-12 株，H7N9H7-Re2 株），于52 日龄采血检测，ND、H5 亚型Re-11、H5 亚型Re-12 和H7 亚型Re-2 血凝抑制抗体效价水平均较高，且比较整齐，说明疫苗质量较好，免疫程序得当。 7 日龄首免和21 日龄二免两次鸡新城疫、H9 亚型禽流感二联灭活疫苗免疫间隔时间短，仅14d，但是免疫抗体效价还是较高的。

4.2 重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗（H5N1Re-11株+Re-12 株，H7N9H7-Re2 株）二次免疫后，三种毒株抗体效价相近，因此，在批量检测中，只做一个毒株的血凝抑制免疫抗体效价，也可推测其他两个毒株抗体效价。

4.3 在养鸡生产中，有些蛋鸡青年鸡养殖场，在50～60d 育雏育成期间，仅做一次鸡新城疫、H9 亚型禽流感二联灭活疫苗和重组禽流感病毒（H5+H7）二价或三价灭活疫苗的免疫，经多次检测，各种抗体水平均较低，平均仅2～4log2，不能很好抵抗野毒攻击。

4.4 这次试验由于缺少H9 亚型禽流感抗原， 因此未做H9亚型禽流感抗体的检测。 在以往的抗体检测工作中， 用鸡新城疫、H9 亚型禽流感二联灭活疫苗免疫后， 同时进行抗体检测，一般H9 亚型禽流感抗体效价比鸡新城疫抗体效价高1～2 滴度。

总之，在对蛋鸡青年鸡饲养场做鸡新城疫、H9 亚型禽流感、H5 亚型禽流感和H7 亚型禽流感等病免疫时， 需要根据实际情况及时做好加强免疫， 这样才能保证在育雏后期有足够的免疫抗体，免受各种相关病毒性疾病的侵袭。