Twist过表达与正常宫颈组织向宫颈癌病变发展关系的Meta分析

秦恩杰，孟沙，熊敏涵，成莹，姚运红，胡新荣

调查与研究

Twist过表达与正常宫颈组织向宫颈癌病变发展关系的Meta分析

秦恩杰，孟沙，熊敏涵，成莹，姚运红，胡新荣

523808 东莞，广东医科大学基础医学院

宫颈癌是临床常见的妇科恶性肿瘤之一，在全球发病率中仅次于乳腺癌，严重威胁着女性的生命健康[1]。宫颈癌的发生发展是一个渐进的演变过程，从宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）发展到宫颈癌可经历数年至数十年。因此，通过有效的筛查方法早期发现并及时进行干预，可使宫颈癌的发病率和病死率降低 80%[2]。Twist 是一种碱性的螺旋-环-螺旋转录因子，在多种类型肿瘤中过度表达，并发挥关键作用，且在乳腺癌、肝细胞癌、卵巢癌和肝细胞癌等的侵袭和转移中起重要作用[3-4]。

Twist 在 CIN 和宫颈癌中表达的相关性分析已有文献报道，但尚未见对其差异表达的系统评价。我们通过检索和筛选公开发表的相关期刊文献，系统评价了正常宫颈、CIN 和宫颈癌组织中 Twist 表达的阳性率，以期阐明 Twist 与 CIN 及宫颈癌发生发展的关系，为早期诊断 CIN 从而预测宫颈癌的发生提供分子标志。

1 资料与方法

1.1 纳入与排除标准

1.1.1 Twist 蛋白检测方法 采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶免疫组织化学（SP）法检测 Twist 蛋白。

1.1.2 研究类型 Twist 蛋白在 CIN 和宫颈癌中表达差异的病例-对照研究，对应文献需见刊。文种限中文和英文。

1.1.3 研究对象 ①全部受试者取材前都未经特殊治疗；②研究方法相似，且为病例-对照研究；③全部受试者不界定种族和国籍。

1.1.4 排除标准 ①无相应对照组；②非 SP 法或非蛋白质水平阳性（如以 mRNA 相对表达量等判定）；③相同作者相似内容重复报道。

1.2 检索策略

计算机检索 Cochrane Library、PubMed、Embase、Medline、CBM、知网、维普及万方等数据库，时间范围为自建库起，止于 2019 年 7 月。中文检索词包括Twist、宫颈上皮内瘤变、宫颈癌、病例对照研究，英文检索词包括 Twist、cervical intraepithelial neoplasias、cervical cancer、case-control study。检索词的逻辑关系为“或”和“OR”。根据论文所附参考文献进一步扩大检索范围。

1.3 文献筛选与信息提取

文献检索由两位研究人员独立进行，异议之处经讨论决定或由第三方判定。提取信息包括文题、作者姓名、发表年限、纳入病例年龄范围、CIN 和宫颈癌中 Twist 表达阳性例数等。

1.4 统计学处理

采用 RevMan 5.3 软件进行 Meta 分析，以比值比（odds ratio，OR）及 95% 可信区间（95% confidence interval，95% CI）为效应量表示结果。< 0.05 为差异有统计学意义。χ2检验对提取的研究结果进行异质性检验（α = 0.1）：当≥ 0.1，² ≤ 50%，采用固定效应模型；当< 0.1 且² < 50%，说明各研究结果间存在异质性，但在可接受范围内，采用固定效应模型进行 Meta 分析；若< 0.1 且²> 50%，说明各研究结果间存在异质性，分析其异质性来源，若无明显临床异质性，采用随机效应模型进行 Meta 分析，若异质性过大，则采用描述性分析。对比两种效应模型分析结果进行敏感性分析，若结果一致，表明敏感性可接受。

2 结果

2.1 文献检索结果

初步检索 583 篇相关文献，经严格按纳入标准筛选后，共纳入 18 篇文献，均为中文文献（查找到的 5 篇英文文献，与部分中文文献为相同作者和相似内容，属重复报道，故排除），共含 2359 例受试者，包含正常宫颈 416 例、CIN 946 例和宫颈癌 997 例。筛选流程见图 1。

2.2 纳入研究的基本特征和方法学质量评价

18 篇文献[5-22]研究报道了正常宫颈、CIN 和宫颈癌组织中 Twist 的蛋白表达情况，其中对 Twist 表达的强弱，多依靠经验判定。纳入研究相关信息见表 1。

2.3 Meta 分析结果

2.3.1 宫颈癌组与正常宫颈组间比较 18 篇文献报道了宫颈癌组 997 例与正常宫颈组 416 例中 Twist 蛋白表达情况。森林图显示= 23%，= 0.08，符合固定效应模型条件，分析 Twist 表达阳性率显示，宫颈癌组大于正常宫颈组[OR = 22.22，95% CI（15.68，31.49）]（图 2），差异有统计学意义（< 0.00001）。

图 1 文献检索和筛选流程

表 1 纳入研究的基本特征分析

2.3.2 宫颈癌组与 CIN 组间比较 18 篇文献报道了宫颈癌组 997 例与 CIN 组 946 例中 Twist 蛋白表达情况。森林图显示² = 55%，= 0.002，各项研究结果之间统计有中度异质性，采用随机效应模型，分析 Twist 表达阳性率显示，宫颈癌组大于 CIN 组[OR = 4.26，95% CI（3.49，5.19）]（图 3），差异有统计学意义（< 0.00001）。

2.3.3 CIN 组与正常宫颈组比较 18 篇文献报道了 CIN 组 946 例与正常宫颈组 416 例中 Twist 蛋白表达情况。森林图显示²= 44%，= 0.02，符合固定效应模型条件，分析 Twist 表达阳性率显示，CIN 组大于正常宫颈组[OR = 4.82，95% CI（3.47，6.69）]（图 4），差异有统计学意义（< 0.00001）。

图 2 宫颈癌组与正常宫颈组 Twist 表达的比较

图 3 宫颈癌组与 CIN 组 Twist 表达的比较

2.3.4 敏感性分析 对各个评价指标行敏感性分析，对纳入的 18 个研究进行漏斗图分析，漏斗图未见明显不对称（图 5），两种效应模型分析结果均一致，表明敏感性可接受。

3 讨论

据统计，我国宫颈癌每年的新发病例约有 13.5 万，约占世界新发病例的 1/4，且每年以 2% ~ 3% 的速度增长，近几年，宫颈癌在欧美发达国家的发病率出现明显下降，与宫颈癌有效的早期诊断及治疗密切相关[23]。宫颈上皮内瘤样病变是一组癌前病变，与宫颈浸润癌密切相关，反映了宫颈癌发生发展中的连续性。由此可见，宫颈癌防治的关键在于其早期病变诊断和治疗[24]。1995 年国际癌症研究中心（IARC）专题讨论会明确提出：宫颈癌的主要病因为 HPV 感染，但 HPV 感染并非宫颈癌发生的唯一因素。HPV 感染在一定程度上能导致 CIN 的发生，故是宫颈癌发生的病因之一[25]。

Twist 是一种转录因子，由常染色体上基因编码，其蛋白具有碱性螺旋-环-螺旋结构。在生理条件下，Twist 能够调节组织重建，细胞迁移，参与胚胎发育和新生血管生成。Twist 基因的过度表达能够促进细胞恶性表型的转化，在特定的情况下，可以促进上皮细胞向间充质细胞转化、增强细胞运动和迁移能力，与肿瘤发生、发展和浸润及转移密切相关[26]。因此，Twist具有癌基因特点，其在恶性肿瘤中高表达，通过调控EMT 促进肿瘤的侵袭和转移[27]。

图 4 CIN 组与正常宫颈组 Twist 表达的比较

图 5 18 个纳入研究的漏斗图分析

本研究分析显示，与正常宫颈组织相比较，Twist 在 CIN 和宫颈癌组织中表达均明显上调，与前期报道[6-22]的结果相符，支持Twist 过表达可以作为宫颈癌的预后因素之一。而与 CIN 组织相比较，Twist 在宫颈癌组织中的表达进一步升高，也与多数报道[5-7, 9-22]的研究结果一致，提示 Twist 过表达可能与正常宫颈组织通过 CIN 向宫颈癌发展有关。然而，在以往的相关报道中，并非完全支持 Twist 过表达增加正常宫颈组织向 CIN 发展的风险。常蕾[5]发现，Twist 在正常宫颈组织中的表达高于 CIN 组织；范琼等[8]认为，Twist 表达在 CIN 和宫颈癌组织间无显著差异。本研究通过 Meta 分析，在较大样本量的层面上，支持 Twist 蛋白表达在正常宫颈、CIN 与宫颈癌组织中的表达逐步升高，两两比较均具有显著的统计学意义，故支持 Twist 表达增加与正常宫颈组织通过 CIN 向宫颈癌发展有关，且检测 Twist 的表达可能有助于癌前病变及宫颈癌的预测。

本次研究不排除有以下局限性：①只纳入了公开发表的相关文献，不排除有偏倚和遗漏；②纳入的各项研究中使用的组织标本处理方法、免疫组化染色操作及评价方法、抗体稳定性等因素可能会影响数据的一致性。

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国家自然科学基金（81572566）

胡新荣，Email：huxinrong @163.com

2019-07-30

10.3969/j.issn.1673-713X.2020.01.015