液相色谱-柱后衍生法测定果蔬中克百威等农药残留量的前处理方法研究

宋 佳 高春芳 朱卫芳 吴 婕 陈 悦 张建辉

（上海市青浦区农业技术推广服务中心 201700）

氨基甲酸酯类农药具有高效、选择性强、易分解等特点[1]，主要用于水稻、棉花、果树、蔬菜等农作物的虫害防治中，此类农药常见的有克百威、三羟基克百威、速灭威、甲萘威、异丙威、仲丁威等。这些农药虽不是剧毒、高毒农药，但具有一定的致癌性，会抑制人体内胆碱酯酶的活性，从而影响人体内神经冲动的传递。因此，农业农村部2002年199号公告中明确规定，在蔬菜、水果、茶叶、中草药生产上，不得使用克百威等农药。

但近期在农产品质量安全监测中发现，个别不法商人在蔬菜、水果等农作物生产中隐性添加克百威等农药，严重危及老百姓“舌尖”安全。因此，在果蔬上市前，加强对氨基甲酸酯类农药残留量的检测是确保农产品质量安全的有效手段。目前，国家食品安全标准对克百威和三羟基克百威等农药残留检测的参考方法是NY/T 761-2008[2]，但该检测方法在前处理中使用的有机试剂量多、污染大、环节多、操作繁琐，且对检测人员的技术要求高。近年来，国际上出现了一种用于农产品检测的快速样品前处理技术，即QuEChERS（Quick快速、Easy简便、Cheap低廉、Effective高效、Rugged稳定、Safe安全）前处理方法，该方法有机试剂用量少、用时短、安全环保。在此背景下，笔者以草莓和生菜为试材，针对果蔬中克百威、三羟基克百威、速灭威、甲萘威、异丙威、仲丁威6种氨基甲酸酯类农药残留，从检测准确度（回收率）、精度（相对标准偏差）、检测效率（用时）、对环境污染程度（有机试剂用量）、检测人员操作技能要求（步骤环节）等方面，对NY/T 761-2008第3部分前处理方法和QuEChERS前处理方法进行对比试验。现将相关试验结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料与设备

试验材料包括乙腈、甲醇、二氯甲烷、氯化钠、RO纯水、克百威标准溶液、三羟基克百威标准溶液、速灭威标准溶液、甲萘威标准溶液、异丙威标准溶液、仲丁威标准溶液、NH2萃取柱、0.22μm滤膜、氨基甲酸酯分析试剂包、安捷伦Bond Elut QuEChERS试剂盒（盐包、净化管）。

试验设备包括液相色谱仪（安捷伦LC1260）配FLD检测器、柱后衍生器（Pinnacle PCX）、匀浆机、离心机、氮吹仪、漩涡器及分析实验室常用设备。

1.2 加标回收试验设计

分别按照NY/T 761-2008第3部分前处理方法和QuEChERS前处理方法的主要步骤进行操作，对克百威、三羟基克百威、速灭威、甲萘威、异丙威、仲丁威按照添加含量分别为0.05、0.10、0.50 mg/kg三个水平进行加标回收测定。见表1。

2 结果与分析

2.1 加标回收测定结果

由表2可知，针对克百威、三羟基克百威、速灭威、甲萘威、异丙威、仲丁威6种农药的3个不同添加含量，两种前处理方法的添加回收率为91.0%～105.0%，相对标准偏差在0～7.4%，均能满足GB/T 27404-2008[3]附录F的技术要求（当添加量为0.1～1.0 mg/kg时，回收率为80%～110%，重复性＜15%；当添加量为0.01～0.10 mg/kg时，回收率为60%～120%，重复性＜20%）。其中，QuEChERS前处理方法中，草莓和生菜两种样品中克百威、三羟基克百威、速灭威等6种农药的添加回收率≥98.0%（除生菜样品中异丙威添加量为0.10 mg/kg时，回收率为95.0%）、重复性RSD＜3.0%（除生菜样品中三羟基克百威添加量为0.05 mg/kg时，重复性RSD为4.4%）。由此说明，QuEChERS前处理方法的准确度较NY/T 761-2008第3部分前处理方法更高。

表1 两种前处理方法的主要步骤

表2 两种方法前处理方法的加标回收测定结果

2.2 运行成效比较

从检测结果精密度、试剂种类及用量、用时等方面对两种前处理方法的单个样本运行成效进行比较。由表3可知，NY/T 761-2008第3部分前处理方法使用了3种有机试剂，分别是乙腈、甲醇和二氯甲烷，总用量达62.5 mL；而QuEChERS前处理方法仅用了1种有机试剂（乙腈），用量仅为20 mL。在整个前处理用时上，NY/T 761-2008第3部分前处理方法在提取过程中需静置30 min，净化过程还需氮吹仪加热、吹干、过氨基柱，该过程需20 min，全程需60 min;而QuEChERS前处理方法在提取过程中仅需离心机离心5 min，净化过程需净化管净化离心5 min，全程仅需30 min，操作用时显著缩短。

表3 两种前处理方法的运行成效比较

3 结论与讨论

试验结果表明，采用NY/T 761-2008第3部分前处理方法和QuEChERS前处理方法同时测定草莓和生菜样品中克百威、三羟基克百威、速灭威、甲萘威、异丙威、仲丁威6种农药残留，回收率及相对标准偏差结果都能满足GB/T 27404-2008附录F的技术要求，但更宜采用QuEChERS前处理方法。主要原因是：（1）QuEChERS前处理方法的准确度和精密度更高。具体表现为回收率更高和相对标准偏差结果更小，这是因为QuEChERS前处理方法的步骤简单，仅加入乙腈提取、净化柱净化、上机等环节，无需经过氮吹仪加热、过柱环节，在整个前处理过程中农药损失较小、对操作人员技术要求较低。（2）QuEChERS前处理方法所用的有机试剂量少，更符合经济、安全、环保的要求。（3）QuEChERS前处理方法用时少、效率高，达到了快速检测的目的。因此，从检测结果的准确度和精密度、检测试剂用量和用时、安全环保等多方面综合考虑，在测定果蔬样品中克百威、三羟基克百威、速灭威、甲萘威、异丙威、仲丁威6种农药残留时，采用QuEChERS前处理方法更适宜。

本试验研究仅在草莓和生菜样品上进行了加标回收测定，对于在其他种类的果蔬样品上是否会得到同样的结论，还需进一步试验验证。