正畸牙齿移动过程中Follistatin在牙周组织中表达的动物实验研究

闫 欣 王明锋

（大连市口腔医院，辽宁 大连 116023）

随着医疗行业的发展，正畸治疗作为矫正错位牙齿的有效方式，其生物学基础为颌骨的可塑性，通过正畸治疗过程中对牙齿造成的一定压力，使得骨细胞增生，引起骨组织的改建，最终实现牙齿矫正的目的。而在调控新骨形成过程中，转化生长因子-β超家族起到了极为重要的作用，即骨形态发生蛋白、活化素等[1-2]。其中，骨形态发生蛋白可以对骨细胞的分化起到良好的调节作用，而活化素为骨形态发生蛋白的作用提供了动力。而本文中所研究的FST作为一种抑制蛋白，可以以高亲和力与活化素结合，与骨形态发生蛋白配体低亲和力结合，最终起到负性调节骨形态发生蛋白的骨组织的改建作用。本次研究通过在SD大鼠口腔内建立正畸牙齿移动模型，以观察FST在牙周组织中表达水平，以寻求正畸治疗方面更为深入理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选取21只SPF级的SD大鼠作为本次动物实验研究对象，按照随机分组的方式将其分为1 d组、3 d组、5 d组、7 d组、14 d组、21 d组、28 d组，每组各3只SD大鼠，其平均体质量为（200±20）克，且均为八周龄的雄性大鼠。在大鼠口腔内一侧建立正畸模型为观察侧，未建立一侧为对照侧。对比各组间一般资料无明显差异（P＞0.05）。

1.2 研究方法：对比各组SD大鼠口腔内观察侧及对照侧的情况，具体研究方法如下：①在21只SD大鼠口腔内的观察侧进行正畸口腔建模，以上颌处的种植钉为正畸支抗，使用镍钛弹簧拉大鼠左上颌处第一颗磨牙往近中处移动；大鼠口腔内的右上颌第一颗磨牙为对照侧，不做任何处理。②分别按照天数与组数的关系，在第1、3、5、7、14、21、28天处死大鼠以获取标本，切取SD大鼠口腔内两侧的上颌第一磨牙以及周围牙周组织。③将标本置于4%的多聚甲醛中72 h，使用10%的EDTA脱钙，使用梯度酒精脱水，使用正丁醇透明，使用石蜡包埋。此后将标本切片，进行免疫组化染色。

1.3 评价指标：通过显微镜对标本的FST表达水平进行观察记录，将观察侧及对照侧的第一颗磨牙1/3牙根处作为界限，取近中压力侧、远中张力侧的牙周膜图片进行灰度值分析。FST的阳性表达为胞质内棕黄色染色，灰度值高低与染色程度成反比。

1.4 统计学方法：采用SPSS 18.0统计软件进行相关数据分析，配对设计计量资料采用t检验，多组计量资料采用单因素方差分析，α=0.05，P＜0.05为有统计学意义。

2 结果

在实验过程中，各组对照侧的压力侧灰度值为（193.27±1.32），张力侧灰度值为（191.44±1.44）；1 d组、3 d组、5 d组、7 d组、14 d组、21 d组、28 d组压力侧灰度值分别为（187.12±3.77）、（184.85±2.59）、（181.32±0.99）、（176.81±3.04）、（178.62±2.39）、（180.61±1.39）、（187.90±4.41）；1 d组、3 d组、5 d组、7 d组、14 d组、21 d组、28 d组张力侧灰度值分别为（183.72±2.61）、（178.30±2.91）、（167.62±3.01）、（161.08±1.01）、（167.32±1.40）、（178.12±3.70）、（186.47±2.92），观察组间数据，FST呈现先增强后减弱趋势，且观察侧的张力侧变化较压力侧变化更为明显，具有显著差异（P＜0.05）。

3 讨论

根据相关资料显示，骨形态发生蛋白（BMP）主要是通过信号传导系统来调节骨细胞的分化，而FST作为一种抑制蛋白，也是骨形态发生蛋白信号传导通路上的细胞外拮抗剂[1]，通过BMPs与BMPs受体相结合，阻碍BMPs与其自身受体结合以发挥其作用，并实现对于骨形态发生蛋白的调节。在本次研究过程中发现，牙周膜图片灰度值在第7天为最小值，即FST在正畸牙齿牙周膜中的表达水平在第7天为最高值，呈现先增强后减弱趋势，并且其张力侧的表达水平高于压力侧，即可证明FST的确参与到了骨细胞的改建之中，并且随着正畸牙齿的移动，对骨细胞不断的进行改建，影响了正畸治疗的过程。

综上所述，Follistatin作为一种细胞外拮抗剂，通过对骨形态发生蛋白及活化素的影响，参与到了正畸牙齿移动骨改建过程之中，并且对正畸牙齿的骨改建起着负调节的作用。